ы
Изобретение относится к способу получения лр.вовращающего энантиоме- ра uL -ЭТИЛ-2-ОКСО-1-пирролидинацета- мида, обладающего антигипоксической и антиишемической активностью.
Целью изобретения является разработка на основе известных методов способа получения левовращающего энантиомера, имеющего абсолютную кон фигурацию S и обладающего ценными фармакологическими свойствами при низкой токсичности.
Пример, а) Получение соли R -oi-метил-бензиламина Б -о -этил- 2-ОКСО-1-пирролидинуксусной кислоты.
В реакторе емкостью 50 л суспендируют 8,7 кг (50,8 моль) рацемической (1 )-5 -этил-2-оксо-1-пирролидинуксусной кислоты в 21,5 л безводного бензола. К этой суспензии постепенно добавляют раствор, содержащий 3,08 кг (25,45--моль.) (4 )ме- тил-беизиламина .и 2,575 кг (25,49. моль) триэтиламина в. 2,4 л безводного бензола. Затем смесь кипятят с обратным холодильником вплоть до Полного растворения. Охлаждают и оставляют кристаллизоваться в течение нескольких часов. Таким образом получают 5,73 кг соли ,-метил- бензиламина (-этил-2-оксо- -пирролидинуксусной кислоты. Т.пл. 148 - 151°С. Выход 77,1%. Эта соль может быть очищена путем кипячения с обрат ным холодильником в течение 4ч в 48,3 л бензола. Охлаждают и отфильтр вьшают. Таким образом получают 5,040 кг целевой соли. Т.пл. 152 - 153,5°С. Выход 67,85%. б) Получение Б -о -этш1-2-оксо-1 -пирролидинуксусной кислр.ты.
5,04 кг соли, полученной по пункту а), растворяют в 9 л воды. Туда же медленно добавляют 710 г 30%-ного раствора гидроксида натрия. рН достигает 12,6 и температура не превышает 25 С. Раствор перемешивают еще в течение 20 мин и освободившийся oi - метил-бензиламин экстрагируют несколько раз объемом в целом 18 л бензола.
Затем водную фазу подкисляют до
рН 1,1 добавлением 3,2 л 6н. соляной кислоты. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают водой и высушивают.
..
с
15
20 . 25 зо-,r о- 40 j50
55
Фильтрат экстрагируют несколько раз объемом в целом 50 л дихлормета- на. Органическую фазу высутиивают над сульфатом натрия, фильтруют ее и выпаривают досуха при пониженном давлении.
Полученный после выпаривания остаток и ранее выделенный осадок растворяют вместе при нагревании в 14 л дихлорметана. Дихлорметан отгоняют и заменяют постепенно 14 л толуола, в котором продукт кристаллизуется. Охлаждают до комнатной температуры и кристаллы отфильтровывают. Таким образом получают 2,780 кг З3-о,-этил- 2-ОКСО-1-пирролидинуксусной кислоты. Т.пл. 125,, М - 26,4°(с,- ацетон), выход 94,5%.
в) Получение Б}-о -этил-2-оксо- 1-пирролидинацетамида,
34,2 г (0,2 моль) Б - -этш1-2- оксо-1-пирролидинуксусной кислоты суспендируют в 225 мл дихлорметана, охлажденного до - 30 С. К полученной суспензии прикапывают 24,3 г (о,24 моль) триэтиламина в течение 15 мин. Реакционную смесь затем охлаждают до -40 С и добавляют в нее 24,3 г (0,224 моль) этилхлорформиата в течение 12 мин. Затем пропускают ток аммиака в течение 4,5 ч. Оставляют температуру повышаться до комнатной и удаляют образовавшиеся соли аммония путем отфильтровывания и промывки Дихлорметаном. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Таким образом полученный твердый остаток диспергируют в 55 мл толуола и перемешивают в течение 30 мин, затем отфильтровывают и перекристаллизуют из 280 мл этилацетата в присутствии 9 г порошкообразного молекулярного сита 0,4 нм.
Получают 24,6 г Б -oi-этил-2-oк- со-1-пирролидинацетамида. Т.пл. 115 - 18 С (oi) - 89,7° (, ацетон). Выход 72,3%.
Рассчитано,%: С 56,45; И 8,29; N 16,46.
С8Н,4,0
Найдена,%: С 56,71; Н 8,22; N 16,48.
Используемую в этом синтезе рацемическую (i )-а -этил-2-оксо-1-пирро- лидинуксусную кислоту получают описанным образом.
В колбу емкостью 20 л, содержащую 3,65 кг (18,34 моль) (этил)-(1 )-piЭТИЛ-2-ОКСО-1-пирролндинацетата в речение 2 ч добавляют при температуре, не пpeвbШJaюl eй бо с, раствор, содержащий 788 г (19,7 моль) гидрокси- да натрия в . л воды. Когда это добавление закончится, температуру смеси доводят до 80 С и отгоняют образующийся спирт до тех пор, пока температура в среде не достигнет , Охлаждают до 0°С и в течение 2,5 ч добавляют 1,66 л ( моль) 12 и. соляной кислоты. Отфильтровывают осадок, промывают его двумя литрами толуола и перекристаллизуют его из изопропилового спирта. Таким образом получают 2,447 кг рацемической (±)-о -этил-2-оксо-1 -пирролидин- уксусной кислоты, плавящейся при 155-156°С. Выход 78%.
Рассчитано,%: С 56,12; Н 7,65; N 8,18.
CgH.NO,
Н 8,10;
Найдено,%: С 55,82; N 7,97.
Фармакологические испытания.
Рацемический oi -этил-2-оксо-1-пи ролидинацетамид (продукт А) и ог,-этш1-2-оксо-1 -пирролидинацетамид (продукт в) изобретения подвергают фармакологическим тестам.
Защита по отношению к гипоксии (мышь).
Для каждой дозы испытуемого про-.
Метод этого теста основан на измерении возможностей выживания организ- 35ДУкта эксперименты повторяют один ма мыши в постоянно обедняемой кисло-или два раза, результаты обобщают для родом атмосфере. Учитывая особую чув-получения минимума 40 (или 60) обра- ствительность нервной системы к та-ботанных дозой животных и 40 (или 60) кого типа поражению (агрессии), по-соответствующих контрольных животных.
40
лученные в этом тесте результаты могут интерпретироваться как величина сопротивления нервной системы. Продукты, увеличивающие сопротивление животных, следовательно, пригодДля каждой дозы испытуемого продукта число выживших животных из обработанных продуктов животных сравнивают с числом выживших животных из контрольных животных. Разница между
жена устройством для подачи азота с постоянным дебитом и отверстием, сооб- 1чающимся с окружающим воздухом.
Животными являются самцы (род NMRl) весом по 20-22 г. Они подвергаются натощак бодрствованию до опыта. Эксперимент осуществляется на следующий день и одновременно на трех
группах из 20 мышей; контрольная группа получает воду (25 мл/кг) перораль- но, а две другие группы, каждая пе- рорально, получают испытуемый продукт. Спустя 25 мин после введения, живот
бы ни одна из трех групп животных не была локализована в предпочтительном месте клетки.
Спустя 30 мин после введения клетки закрывают и туда впускают азот с постоянным дебитом (7,750 л технического азота в минуту) в течение примерно 37 мин; атмосфера содержит тогда 3,7% кислорода.
Коробка (клетка) остается закрытой вплоть до критического момента, когда не наблюдается более, чем трое выживших из 20 контрольных животных. Б этот момент клетку открывают и туда попадает окружающий воздух. Несколькими моментами позднее пересчитывают выживших в каждой группе животных.
Для каждой дозы испытуемого про-.
ДУкта эксперименты повторяют один или два раза, результаты обобщают для получения минимума 40 (или 60) обра- ботанных дозой животных и 40 (или 60) соответствующих контрольных животных.
Для каждой дозы испытуемого продукта число выживших животных из обработанных продуктов животных сравнивают с числом выживших животных из контрольных животных. Разница между
Изобретение касается замещенных гетероциклических веществ, в частности получения (--этил-2г-оксо-1-пир- ролидинацетамида (ПАЦ), обладающего антигипоксической и антиишемической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных и малотоксичиых веществ указанного класса. Синтез ПАЦ в.едут из ,i-этил-2-oкco-l-пиppo- лидинуксусной кислоты, которую последовательно обрабатывают этилхлорфор- миатом и аммиаком. Выход ПАЦ 78%, т.пл. 155-156°С, брутто-ф-ла . Активная доза 0,016 ммоль/кг, токсичность: LDfo 1081 мг/кг. 3 табл. СО
ны для лечения и предохранения от по- 45 этими числами выражает загтитнун) а.кражений типа гипоксии центральной нервной системы.
Прибор состоит из герметичной и прозрачной камеры, имеющей высоту 37 см, глубину 39 см и ширину 97 см. Эта коробка (камера) емкостью 140 л снабжена 60 прозрачными отделениями (секциями) 6x10x10 см, позволяющими принимать 60 мышей, по отдельности. Вентилятор обеспечивает там перемешивание атмосферы, которая циркулирует среди отделений (секций) через, решетчатое перекрытие. Камера снаб0
5
тивность продукта по отношению к гипоксии, вызванной лишением кислорода. Статистическое значение (Р) этой разницы оценивается тестом Fischer- late s.
В табл.1 даются результаты, полученные для возрастающих доз продук-- тов А и В.
В тесте левовращающий энан- тиомер (продукт В) повышает выживание животных, лишенных кис- .лорода, начиная с дозы 0,032 ммоль/кг. Рацемат (продукт А) проявляет
подобную активность только начиная с 0,32 ммоль/кг (1-я эффективная доза) и, следовательно, в 10 раз менее активен, чем левовра- щающий энантиомер.
Защита по отношению к церебральной ишемии (крысы).
Электроэнцелографические контроля показали, что лигатура (перевязка) обеих сонных артерий вместе у крысы вызывает постоянную церебральную ишемию: кривая электроэнцелограммы сплющивается и становится даже изоэлект- рической (электрическое молчание).
Сам1ц 1 крыс Вистер весом по 250 - 350 г анестезируются пентабарбита- лом, вводимым интраперитонеально в дозе 50 мг/кг (0,5 мл/100 г). Немедленно после анестезии животным вводят интраперитонеально по 0,5 мл/ 100 г испытуемого продукта, растворенного в изотоническом растворе хлорида натрия (обработанные животные)
Из табл.2 следует, что рацемат (продукт А) активен только начиная с дозы 0,64 ммоль/кг. Напротив, лево- вращающий энантиомер изобретения
или только изотонический раствор хло- 25 (продукт В) защищает животных от ле- рида натрия или плацебо (контрольные животные).
Спустя примерно 20 мин обе сонные артерии вместе обнажают и, спустя около 10 мин, их одновременно перевязывают. Эта операция проводится одновременно на контрольных и на обработанных животных.
Спустя час после введения испытуетальности, вызванной одновременной лигатурой обеих сонных артерий, начиная с 0,16 ммоль/кг, и, следовательно, оказывается в 4 раза более актив- 30 ньм, чем рацемат.
В табл.З приведены значения, внутри венно, для продуктов А и В, ЛД д-определенные у самца мъти и самца крысы
Из табл.З следует, что левовращаюИз табл.З следует, что левовращаю
мого продукта или плацебо снова вво- 5 Щий энантиомер изобретения (продукт дят интраперитонеально,. в той же до- в) является, как и рацемат (прозе, либо испытуемый продукт (обработанным животным), либо плацебо (контрольным животным).
Спустя 5 ч после первого введения третий раз инъекцируют дозу либо испытуемого продукта (выжившим обработанным животным), либо плацебо (выжившим контрольным животным). Спустя 24 ч после первого введения, у всех животных под анестезией за счет пен- табарбитала проверяют эффективность
дукт А), очень мало токсичным и ток сическая до за находится вьш1е активной дозы.
40 Формула изобретения
Способ получения 8 -о -этил-2- оксо-1-пирролидинацетамида, отличающийся тем, что s3-oi- 4g ЭТИЛ-2-ОКСО-1-пирролидинуксусную кис лоту подвергают взаимодействию с этилхлорформиатом, затем с аммиаком.
лигатуры путем сечения сонных артерий ниже ее. Отмечают число выживших животных как среди обработанных животных, так и среди контрольных животных. Для каждой дозы испытуемого продукта число выживших средиживотных, обработанных продуктом, сравнивают с числом выживошх среди контрольных животных. Различие выражает защитную активность продукта по отношению к летальности, вызванной одновременной лигатурой (перевязкой) обеих сонных артерий.
Статистическое значение (Р) этого различия оценивается тестом Brandt - Snedecor.
В табл.2 представлены результаты, - полученные для возрастающих доз продуктов А и В.
Из табл.2 следует, что рацемат (продукт А) активен только начиная с дозы 0,64 ммоль/кг. Напротив, лево- вращающий энантиомер изобретения
(продукт В) защищает животных от ле-
(продукт В) защищает животных от ле-
тальности, вызванной одновременной лигатурой обеих сонных артерий, начиная с 0,16 ммоль/кг, и, следовательно, оказывается в 4 раза более актив- ньм, чем рацемат.
В табл.З приведены значения, внутривенно, для продуктов А и В, ЛД д-определенные у самца мъти и самца крысы.
Из табл.З следует, что левовращаюЩий энантиомер изобретения (продукт в) является, как и рацемат (продукт А), очень мало токсичным и токсическая до за находится вьш1е активной дозы.
Формула изобретения
Способ получения 8 -о -этил-2- оксо-1-пирролидинацетамида, отличающийся тем, что s3-oi- ЭТИЛ-2-ОКСО-1-пирролидинуксусную кислоту подвергают взаимодействию с этилхлорформиатом, затем с аммиаком.
Таблица 1Табл ица2
А В
1790 1081 .
1500 1038
| Патент Великобритании № 1309692, кл | |||
| Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов | 1917 |
|
SU2A1 |
