Изобретение относится к получению нового соединения - (5)-альфа-этил- 2-ОКСО-1-пирролидинацетамида, обладающего антигипоксической и антиишеми- ческой активностью.
Цель изобретения - разработка на основе известных методов способа получения нового соединения, обладающего ценными фармакологическими свойст вами при низкой токсичности.
Пример 1. а) Получение этил- (8)-4-//1-(аминокарбонил) пропил/- /-амино/бутирата.
К суспензии 47,75 г (0,345 моль) хлоргидрата (8)-2-аминобутанамида (альфа : +26,1°; , метанол) в 400 мл толуола добавляют 143,6 мл .(1,035 моль) триэтиламина. Смесь нагревают до и вводят в нее по каплям 67,2 г (0,345 моль) этил-4- бромбутирата..
Выдерживают реакционную среду при 80°С в течение 10 ч, затем фильтруют в горячем состоянии с целью удаления солей триэтиламина. Фильтрат выпаривают при пониженном давлении и получают 59.г маслянистого остатка, состоящего в основном из продукта моно- алкилирования и содержащего незначительное количество диалкилпроизвод- ного.
Полученный неочищенный продукт использован как таковой без дополнительной очистки для получения (S)- альфа-этил-2-оксо-1-пирролидинацетамида циклизацией,
б) Получение (5)-альфа-этил-2- оксо-1-пирролидинацетамида.
Растворяют 54 г неочищенного продукта, полученного в а), в 125 мл толуола в присутствии 2 г 2-оксипи- ридина. Выдерживают смесь при 110 С а течение 12 ч.
Нерастворимое вещество отфильтровывают в горячем состоянии. Затем выпаривают фильтрат при пониженном давлении. Остаток очищают методом хроматографии на колонке 1,1 кг диоксида кремния (диаметр колонки 5 см; элюент - смесь этилацетата, метанола и концентрированного аммиака в объемном соотношении 85:12:3),
Выделенный продукт повторно кристаллизуют из 50 мл этилацетата. Получают таким образом 17,5 г (З)-альфа- ЭТИЛ-2-ОКСО-1-пирролидинацетамида, Т,пл, 117°С альфа : -90,0° ( , ацетон). Выход 41%,
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Пример2, а) Получение (S)-N-/ /1-(аминокарбонил)пропил/-4-хлорбу- танамида.
Смешивают 345,6 г (2,5 моль) измельченного карбоната калия и 138,5 г (1 моль) хлоргидрата (8)-2-амино- бутанамида в 2,5 л ацетонитрила. Реакционную смесь охлаждают до температуры приблизительно 0°С л вводят в нее по каплям раствор 129,2 г (1,2 моль) 4-хлорбутирилхлорида в 500 мл ацетонитрила. По окончании добавления реакционную смесь оставляют, нагреваться до температуры окружающей среды. Отделяют нерастворимое вещество фильтрованием и вьтаривают фильтрат при пониженном давлении. Полученный неочищенный остаток перемешивают в течение 30 мин в 1,2 л безводного эфира при 5-.10°С, Осадок отфильтровывают,.промывают его дваж-. ды 225 мл эфира и сушат в вакууме. Получают таким образом 162,7 г (S)- Н-/1-Саминокарбонил)пропил/4-хлорбу- танамида, Т,пл, 118-123 с, альфа j, : -18° (, метанол). Выход 78,7%,
Полученный таким образом неочищенный продукт вполне пригоден для следующей стадии циклизации. Однако он может быть очищен путем перемешивания в течение 1 ч в безводном этилацета- те, Т,пл, 120-122 С, альфа :-22,2° (, метанол),
б). Получение (5)-альфа-этил-2-ок- со-1-пирролидинацетамида,
При в атмосфере азота смешивают в 45 мл дихлорметана 6,2 г (0,03 моль) (S)-N-(1-(аминокарбонил) пропил/-4-хлорбутанамида и 0,484 г (0,0015 моль) тетрабутиламмонийброми- д.а. Добавляют в течение 30 мин не превышая температуры реакционной смеси +2°С, 2,02 г (О,036.моль) порошкообразного гидроксида калия. Затем смесь перемешивают в течение 1 ч, К ней добавляют еще 0,1 г (0,0018 моль) измельченного гидроксида калия и перемешивают еще в течение 30 мин при О С, Оставляют нагреваться до температуры окружающей среды, . I Удаляют нерастворимое вещество фильтрованием и концентрируют фильтрат при пониженном давлении, Получен- ньй остаток кристаллизуют повторно в 40 мл этилацетата в присутствии 1,9 г молекулярного сита -0,4 нм, которое уда,ляют эатем фильтрованием в горячем состоянии. Получают таким обра3,
зон 3,10 г (5)-альфа-этил-2-оксо-1- пирролидинацетамида. Т. пл. 116,7 С, альфа : -90,1° ( , ацетон) . Выход 60,7%.
Пример 3. Получение (8)-аль- фа-этил-2-оксо-1-пирролидинацетамида
Этот пример.иллюстрирует вариант способа, указанного в примере 2, согласно которому промежуточное соедине ние 4-хлорбутанамид, полученный in situ, не выделен.
К суспензии 69,25 г (0,5 моль) хлоргидрата (3)-2-аминобутанамида в 600 мл дихлорметана добавляют при температуре окружающей среды 84 г безводного сульфата натрия. Охлаждаю до 0°С и добавляют 115 г измельченного гидроксида калия, затем 8,1 г (0,025 моль) тетрабутиламмонийброми- да, растворенного в 100 мл дихлорметана. При энергичном перемешивании добавляют .по каплям при О С раствор 77,5 г 4-хлорбутилхлорида в 100 мл дихлорметана. Спустя 5 ч реакции до- бавляют еще 29 г измельченного гидроксида калия. Через 2 ч реакционную смесь фильтруют через byflo-cel и выпаривают фильтрат при пониженном давлении. Остаток (93,5 г) дисперги руют в 130 мл горячего толуола в течение 45 мин. Фильтруют и вьтаривают при пониженном давлении. Растворяют остаток (71,3 г) в горячем состоянии в 380 мл этилацетата, к которому прибавлено 23 г молекулярного сита 0, 4 нм в виде порошка. Эту смесь нагревают с рефлюксом и фильтруют в горячем состоянии. После охлаждения фильтрата целевой продукт кристаллизуется. Получают таким образом 63 г (S)-альфа-этш1-2-оксо-1-пирролидинацетамида . Т. пл. 117 С. альфа : -91,3° (, ацетон). Выход 74,1%.
Фармацевтические испытания.
Рацемический альфа-этил-2-оксо-1- пирролидинацетамид (продукт А) и (S)- альфа-этил-2-оксо-пирролидинацетамид (продукт В), полученный согласно изобретению, были подвергнуты фармакологическим испытаниям.
1. Защита против гипоксии (мьши).
Принцип этого испытания состоит в измерении выживаемости, организма, подвергнутого действию атмосферы, прогрессивно обедняемой кислородом. Принимая во внимание особую чувствительность нервной системы к поражениям такого типа, полученные результаты
с
Q
n 5 ,.
0
0
5
95
этого испытания можно интерпретировать как меру сопротивляемости нервной системы. Следовательно, продукты, повышающие сопротивляемость животных, пригодны для лечения и предупреждения агрессий центральной нервной системы гипоксического характера.
Методика. Прибор представляет собой герметичную прозрачную клетку высотой 37 см, глубиной 39 см и шириной 97 см. Эта клетка объемом 140 л имеет 60 прозрачных отсеков размерами 6 « 10 )( 10 см, позволяющих содержать в изоляции 60 мьшей.
Вентилятор обеспечивает.перемеши вание атмосферы, циркулирующей по отсекам через решетчатый пол. Клетка оборудована устройством для ввода азота с постоянным расходом и отвер стием, сообщающимся- с окружающим воздухом. .
в качестве животных взяты мыши- самцы CNMRI) весом 20-22 г. Им перестают давать пищу накануне испытания. Опыт проводят на следующий ден одновременно с тремя группами по 20 мышей; контрольная группа получает орально воду (25 мл/кг), а остальные две группы получают каждая испытуемый продукт орально..
Через 25 мин после введения животных перераспределяют наудачу между отсеками такш образом, чтобы ни одна из трех групп не попала в лучшее ме- С7 о в клетке.
Через 30 мин после введения клет(
ку закрывают и вводят азот с постоянным расходом (7,750 л технического азота в 1 мин) в течение приблизительно 37 мин. К этому времени атмосфера содержит 3,7% кислорода. Клетку оставляют закрытой до критического момента - когда из двадцати контрольных животных остаются в живых не более трех. В это время клетку открывают и впускают в нее окружающий воздух. Через несколько мгновений под- : считывают количество выживших животных в каждой группе.
Опыты -повторяют для каждой дозы испытуемого продукта один или два раза. Результаты подытоживают для получения минимум 40 (или 60) животных на дозу и 40 (60) соответйтвую- щйх контрольных животных,
Для, каждой дозы испытанного продукта количество выживших животных
среди обработанных данным продуктом сравнивают с количеством выживших контрольных животных. Разность между этими числами выражает защитную активность продукта по отношению к гипоксии, вызванной недостатком кислорода. Статистическое значение {YT этой разности оценивается тестом Fischer-Gates.
В табл.1 приведены результаты, полученные для возрастающих доз продуктов А и В, (
Таблица 1
Изобретение касается замещенных пирролидина, в частности получения ( S) -ot.-3Tmi-2-oKco-1 -пирродинацетами- да, который обладает антигипоксической и антиишемической активностью и может быть использован в медицине. Цель изобретения - создание активного и малотоксичного вещества указанного класса. Синтез ведут циклизацией 
Примечание, -NS- разность незначительная
В этом опыте левовращающий энан- тиомер, полученный согласно изобрёте- ЛИЮ (продукт В), повышает выживаемость животных, лишЬнных кислорода, начиная с дозы 0,032 ммоль/кг. Рацемат (продукт А) проявляет подобную активность только начиная с дозы 0,32 ммоль/кг (первая эффективная доза), а следовательно, он в 10 раз менее активен левовращающего энантио- мера,
Принцип. Электроэнцефалографические проверки показывают,, что перевяз ка двух общих сонных артерий у крыс вызывает истинную ишемию головнбго мозга: кривая электроэнцефалограммы становится плоской и даже изоэлектри- ческой (электрическая пауза).
Методика. Крыс-самцов Wistar весом 250-350 г анестезируют пентобарбита- лом, который вводят интраперитонеаль- но в дозе 50 мг/кг (0,5 мл/100 г).
Сразу же после анестезии животным вводят интраперитонеально, из расчета
0,5 мл/100 г, либо испытуемый продукт растворенный в изотоническом растворе хлорида натрия (обработанные животные) , либо только изотонический раствор хлорида натрия, или плацебо (конт .рольные животные,
Приблизительно через 20 мин снимают лигатуру с обеих общих сонных артерий и приблизительно через 10 мин их одновременно перевязывают. Эту операцию проделывают одновременно на контрольных и обработанных животных .
Через 1 ч после введения испытуе-. мого продукта или плацебо вводят снова интраперитонеально такую же дозу либо испытуемого продукта (обработанным животным), либо плацебо (контрольным животным).
Через 5 ч после первого введения вводят в третий раз дозу либо испытуемого продукта (выжившим обработанным животным), либо плацебо (выжившим контрольным животным).
Через 24 ч после первого введения проверяют у всех животных под анесте
зией, вызванной пентобарбитапом, эффективность лигатуры путем рассечения сонных артерий ниже лигатуры. Отмечают количество выживших животных как из обработанных, так и из контрольных животных. Для каткдой дозы испытанного продукта количество выживших животных из обработанных данным продуктом сравнивают с количеством выживших животных из контрольных. Разность вьфажает защитную активность продукта против летальности, вызванной одновременной лигатурой обеих сонных артерий. Статистическое значение (Р) этой разности оценивается тестом Brandt - Snedecor,
.В табл.2 приведены результаты, по- лученные для возрастающих доз продуктов А и В.
Таблица2
Примечание. NS- разность незначительная
Из табл.2 следует, что рацемат (продукт А) активен лишь начиная с дозы 0,64 ммоль/кг. Напротив, лево- вращающий энантиомер, полученный согласно изобретению (продукт В),
защищает животных от смерти, вызванной однозременной лигатурой обеих сонных артерий, начиная с дозы 0,16 ммоль/кг, следовательно, он в четыре раза более активен, чем рацемат.
Токсичность. В табл.3 приведены для продуктов А и В значения LD мг/кг,, при внутривенном введении, определенные у мышей-самцов, к крыс- самцов.
ТаблицаЗ
1790
1500
20
1081
1038
Из табл.3 следует, что левовращаю- щий энантиомер, полученный согласно изобретению (продукт В), является, как и рацемат (продукт А), очень малотоксичным, и что токсичная доза гораздо больше активной дозы.
Формула изобретения.
Способ получения (8)-альфа-этил- 2-оксо-1-пирролидинацетамида, о т - лич ающийся тем, что (S)-2- аминобутанамид общей формулы
Х-СН2-СН -У-гасн(СгН5)СОШ2, где X - ZOOC при Y -СН„-, где Z - С -С -алкил,
или X - HalCH, при Y -СО-, где Hal - галоген,
подвергают циклизации в среде инертного органического растворителя в присутствии в качестве катализатора 2-оксипиридина или тетрабутиламмоний- бромида соответственно.
| Патент Великобритании № 1309692, кл | |||
| Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов | 1917 |
|
SU2A1 |
