Способ внутригрупповой дифференциации вирусов Коксаки В Советский патент 1988 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для дифференциации внутри подгруппы вирусов Коксаки В и их ди- агностики.

} Пример. Исследованию подвер- 1гают стандартные штаммы подгруппы |вирусов Коксаки В (Коксаки В1 - Соп- necticut, Коксаки В2 - Ohio-1 , Коксаки ВЗ-Nancy, Коксаки В4 - ivB, Коксаки В5 - Faulkner, Коксаки В6 - Schmidt), а также .13 штаммов энтеро- вирусов подгруппы Коксаки Б, выделенных от больных серозным менингитом, герпангиной, а также из водных объектов окружающей среды. Индикацию вирусов химическим соединением проводят в культуре клеток (ФЭЧ). Клетки ФЭЧ выращивают в растворе Хенкса, содержащем 0,5% гидролизата лактапь- бумина и 10% сыворотки крупного рогатого скота. За 3 ч до внесения вируса проводят смену на среду того же состава без сыворотки, но с добавлением аморфного трипсина в конечной концентрации 50 мкг/мл.- Вируссодержа щий материал вносят на монослой после удаления среды из расчета 0,1 мл Ч05 ЦПДдо/мл на 250 тыс. клеток и после часового контакта культуру за- ливают средой, содержащей трипсин в такой же концентрации (50 мкг/мп) и инкубируют при 37 С. Аналогичным образом инфицируют культуру ФЭЧ в питательной среде, в которую не добавлен трипсин. Инфицированные пробирки инкубируют при 37°С в течение 48-72 ч. Результат оценивают по ЦПД вируса.

в случае его развития в ФЭЧ без до-: бавления к питательной среде трипсина, исследуемые штаммы относят к Коксаки В1, ВЗ, В5, Вб, а в случае раз- вития в ФЭЧ на трипсинсодержащей среде (при отсутствии такого эффекта в ФЭЧ без трипсина) его относят к Коксаки В2 и В4,

Принадлежность вирусов к Коксаки В1, ВЗ, В5, В6 и Коксаки В2, В4 контролируют и подтверждают типированием вирусных агентов иммунными сыворотками в реакции нейтрализации.

Сравнительные данные по дифференциации стандартных штаммов вирусов Коксаки В внутри своей подгруппы в культуре клеток (ФЭЧ) приведены в таблице.

Использование способа позволяет проводить дифференциацию вирусов Коксаки В внутри группы, что повысит точность диагностики.

g

25 Формула изобретения

Способ внутригрупповой дифференциации вирусов Кок.саки В, заключающийся в том, что исходной вирусной суспензией заражают культуру клеток ФЭЧ, инкубируют и при наличии цитопатичес- кого эффекта дифференцируют вирусы Коксаки В1, ВЗ, В5, В6, а при отсутствии еГо дополнительно заражают исследуемой суспензией культуру клеток .- ФЭЧ, инкубируют в присутствии 50,Оi i:6,6 мкг/мл трипсина и при появлении цитопатического эффекта дифференцируют вирусы Коксаки В2, В4.

Изобретение относится к вирусологии и касается способа внутригруп- пой дифференциации вирусов Коксаки В. Для осуществления способа исследуемой вирусной суспензией заражают культуру клеток ФЭЧ, которые инкуби-. руют, и определяют цитопатический эффект, при наличии последнего дифференцируют вирусы Коксаки В1, ВЗ, В5, В6. В случае отсутствия этого эффекта повторно заражают исследуемой суспензией клетку того же типа, инкубирование ведут в присутствии трипсина и при наличии цитопатическо- g го эффекта на этом этапе дифференци- руют вирусы Коксаки В2, В4. 1 табл. V/7