Способ определения антиокислительной активности сыворотки крови Советский патент 1988 года по МПК G01N33/48 

4 IsD СЛ СЛ

СА СО

Изобретение относится к медицине; а именно к экспериментальной и клинической биохимии, и может быть использовано для диагностики сердечно-сосу- дистых заболеваний.

Целью изобретения является повышение точности и ускорение способа,

Пример. Ис гледуют сьторотку крови, полученной из краевой вены уха беспородного кролика-самца массой 1,3 кг без добавления и с добав- леннем восстановленного глутатиона (rSH) до конечной концентрации 0,55 мМ Инкубацию контрольной и опытной сьгао ротки крови (по 0,2 и О, шт), а также соответствующих количеств дне- тиллированной воды, проводят в 3 мп 0,1 М фосфатного буфера рН 7j,4 в 125 мМ растворе хлористого калия Че- рез 10 и 5 мин последовательно добавляют 0,5 кп 1 1чМ раствора перманга- ната калия, дважды по 0,5 мл 10 мМ раствора закисного сернокислого желе за и 1 мл 20%-ного раствора .трихлор™ уксусной кислоты, Надоса,цочнуго жидкость инкубируют 20 мин при с 1 мл Oj7%-ного раствора тиобарбиту- ровой кислоты и 0,5 .мл in, раствора соляной кислотЫо ПолученньпЧ окрашен- ньй продукт экстрагируют 3 мл н- бута иола и определяют оптическую плотность бутанолового слоя на спектрофотометре при длине волны 532 нм. Определение выполняют в течение 1,5 ч,

Для контрольной сьгоороткн получены Величины оптической плотности ЕО,, 0,160| Ео,г -0,275| К йод 1J 5 j

Для сыворотки с добавлением FSHt Е 0,055 EO.I 0,1671 EQ,,, 0,2555

К

АОА

кзо.

Следовательно, добавление к сыворотке крови водорастворимого кофактора ферментативной антиокислительной системы (rSH) приводит к увеличению антиокислительной активности () с 1,15 до 1,30.

Формула изобретения

Способ определения антиокислительной активности сыворотки крови, путем инкубации пробы и спектрофотомет- рирования малонового диальдегида, отличающийся тем, что,с целью повьшения точности и ускорения способа, антиокислительную активность определяют последовательно в двух пробах по отношению накопления малоново го диальдегида на единицу объема сьпзоротки крови в среде инкубации и рассчитывают по формуле

(ЕО,, -Е) 0,2

TE J-E J oTr

коэффициент антиокислительной активности; оптическая плотность контрольной пробы; оптическая плотность опытной пробы для 0,1 мл сы- воротки;

оптическая плотность для опытной пробы для 0,2 мл сыворотки.

где Кдод

Е.

о.г

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в научно- исследовательских лабораториях для проведения экспериментальных работ и в клинических лабораториях для диагностики сердечно-сосудистых заболеваний. Цель изобретения - повьшение точности способа и сокращение времени определения антиокислйтельной активности путем инкубации,добавления реагентов и спектрофотометрирования. Для этого дополнительно определяют отношение накопления малонового диаль- дегида на единицу объема сыворотки крови при двух различных количествах сьторотки в среде инкубации и рассчи- тьшают по формуле: (Eoi -Ец) хО,(Ео,-ЕО-0,1, где ко- эффициент антиокислительной активности; Еу - опт гческая плотность контрольной пробы; ЕО, -оптическая плотность опытной пробы для 0,1 мл сыворотки; EQ .j -оптическая плотность опытной пробы для 0,2 мл сьшоротки. Способ определения антиокислительной активности сьшоротки крови значительно упрощает проведение анализа, сокращает время определения с 6 ч до .. 1,5 ч и повышает точность определения. S сл