Способ получения лектина Советский патент 1988 года по МПК A61K35/78 

4 DO 00 Х

О

Изобретение ОТРЮСИТСЯ к медицине и биологии и касается способа получения лектика из растительного сьфья

Целью изобретения является упрощение способа и сокращение времени процесса.

П р и м е р 4 о 1 кг надземной части каланхое Блоссфельда измельчают, отжимают coKj фильтруют его через бумажньй фильтр при комнатной температуре Фильтрат охлаждают до 4 с и добавляют охлажденный до 96%- ньй этиловьй спирт до конечной концентрации спирта 30% и оставляют на 1 ч при 4 С, Через. 1 ч смесь центрифугируют в рефрижераторной цен трифу- ге при 4 С в течение 10 мин при 6000 go К надосадочному 30%-ному спиртовому раствору добавляют ох- ,лажденный до 4 С 96%-ньш этияовьй спирт до получения насыщения и выдерживают 1 ч при 4 С, Затем центрифугируют в рефрижераторной центрифуге при 4 С в течение 5 мин при 6000 g. Осадок собирают и растворяют в минимальном (до 50 мл) количестве охлажденной до 4°С дистиллированной воды,

Растйоренньй осадок диализируют против охлажденной до дистиллированной воды в течение 2 ч. Затем центрифугируют в рефрижераторной центрифуге при 4 С в течение 20 мин при 6000 go Надосадочньй раствор соби- рают и извлекают из него лектин сле дуняцим образ ом о

Колонку (3x15 см) наполняют аффинным сорбентом (овогелем) при 4 С, промьшают водой, охлажденной до 4 с Промывку колонки ведут до тех пор, пока оптическая плотность вытекакицей жидкости при 280 нм не снизятся до 0,10„

Раствор лактина после последнего центрифугирования пропускают через колонку с аффинным сорбентом при 4

после чего колонку промывают охлажденной до 4 С дистиллированной водой до тех пор, пока оптическая плот- ность вытекающей жидкости при 280 нм не снизится до 0,15. Затем через колонку пропускают 0,10 н., раствор уксусной кислоты или 0,15 М раствор хлористого натрия в О,1 М ацетатном

буфере при комнатной температуре и собирают фракции, содержащие лектин. Наличие лектина во фракциях определяют -с ПОМОЩЬЮ реакции эритроагглю- тинации либо по оптической плотности

раствора на спектрофотометре. Собранные фракции, содержащие лектин, сливают вместе и диализируют против дистиллированной воды в течение 2 ч при 4 С, затем лиофильно высушивают.

Выход готового продукта составляет 103 мг при элюции лектина уксусной кислотой и 99 мг при элюции лектина раствором хлористого натрия. Способ состоит из 13-ти стадий. Продолжительность процесса 15,5 ч. Извест- ньй способ включает 21-у стадию, его продолжительность 51 ч.

Формула изобретения

0

35

Способ получения лектина путем измельчения растительного сырья, экстракции, осаждений целевого продукта, очистки и сушки, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и сокращения времени процесса, в качестве источника сырья используют надземную часть каланхое Блоссфельда (Kalanchoe blossfeldiaha

v.Poelln), экстракцию ведут 29-31%- 4U

ным этиловым спиртом, осаждение осуществляют 78-82%-ным этиловым спир- ТОМ5 а очистку проводят на аффинном сорбенте, используя в качестве элю- ента 0,08-0,12 н. уксусную кислоту или 0,1-0,18 М раствор хлористого натрия.

Изобретение относится к медицине и биологии, касается способа получения лектина из растительного сырья, в качестве которого используют надземную часть коланхре Блосфельда. Экстракцию сырья ведут 29-31%-ным этиловым спиртом. Затем проводят осаждение центрифугированием при 6000 g 78-82%-ным этиловым спиртом и очистку на аффинном .сорбенте. В качестве элюента используют 0,08- 0,12 н. уксусную кислоту или 0,1- 0,18 М р-р NaCl.