Способ получения носителя иммуноглобулинов для обнаружения возбудителя чумы Советский патент 1992 года по МПК G01N33/531 

(46) 15.06.92.БКШ. ff 22:

(21) 4041357/14|

U2) 01.11.85.

(71)Ростовский-иа-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт

(72)А.Н.Наркевич, Б.В.Везуглова А.П.Кочеткова и В.Л.Коэлова /

(53)576.8.093(088.8)

(56)Авторское свидетельство СССР

| 1227006. кл. G 01 N 33/53t, 1985.

(54)СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЙ НОСИТЕЛЯ ИМЙУ- НОГЛОБУШНОВ ДЛЯ оеНАРУЖЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ

(57)Изобретение относится к медиций-. ской микро 5иологии, точнее к серологическим методам лабораторной диагностики чумьт. Цель изобретения - уп{ ощение способа получения носителя иммуноглобулинов и повышение качества целевого продукта за счйт ускорения обнаружения возбудителя чугш. Для этого в дистиллироваяиой воде растворяют поливинилпирролидон, диок- сан, акролеин, перемешивают, добавляют гидразин и конго красное в 4% воды по отношению ко всей реакционной смеси. Смесь перемешивают 1 ч для завершения роста полимерных частиц, доводят рН дд 11,Ь добавлением раствора едкого яатра и перемв- птвают еще 1 ч Полийерную дисперсию с частицами 0 5 мкм осазвдают цеятри- фугированкем и дистиллированной ВОДОЙ.

i

Йь й U9

сл

11443578 2

Изобретение относится к медицин-зиологическом растворе и путем послеской микробкологин, а именно к серо-донательного переноса 0,5 мл смеси

логичрским методам лабораторной Диаг-из лунки в лунку готовят последованостнки чумы.тельные разведения. Контрольные лунки

Итрестен способ получений носителяне содержат антигена, В каждую лунку

иммуноглобулинов на основе эритро-добавляют по 1 капле сенсибилизироцктов барана, ванной суспензии .полимера, пластинку

Целью изобре ения является упроще-осторожно встряхивают, оставляют на

ние способа получения носителя имму- п1,5-2 ч, после чего производят учет

ноглобулинов и повышение качества це-реакции. При положительной реакции

левого гфодукта за счет ускоренияобразуется агглютинат, равномерно

обиарулсения возбудителя чумь1.выстилающий дно лунки. При отршдйПример , В 69,6% дистилли-тельном результате и-в контроле пре-{

роаанной воды растворяют 1% поливи- |спарат собирается на дне лунки и Ъиде

нилпкрролвдонар А% диоксана и 21% .компактного осадка или колечкя красакропеина, К райтвору при переметива него цвета.

мин дрояБляют 0,2% гидразина и 0,2%j Предлагаемьй способ проще, чем

Конго красного в 4% воды по отиойениюспособ-прототипt :полимеэизация протеко .всей реакционной смеси, СмейЬ nepe-jgкает в одну стадию. Носитель пслучамешивпкгг 1 ч для завершения роста .ется окрашенным, имеет готовые ре кполимерных частиц, затем доводят рНционные группы и не нуждается в до- .

до iUO добавлением Oj2M раствораПолнительной химической Ъбрлботкё. едкого натра и перемеривают еще 1ч Полученный на основе носитеПолимариую дисперсию с диаметром час- 25 диагностикум позволяет обмаружитиц 5 мкм оса адают центрифугированиемвать в объемных серологических гёаки отмывают дистиллированной. воДой,циях возбудитель чумы .а 1, ч,

П р и м е р 2, Б 71 75% дистилли-что в 3-4 раза быстрее, чем с помощыд

рованной воды растворяют 1% поливинилг; диагностикума, 11риго гозлен ного по

пир)7ол1-1дона5 4% диоксана 19% акролеш,-способу-прототипу.

на. К растгзору для полимеризации . По чузствительности диагносгикум,

добаплягот 0,15% гидразина и 0,1%«олученный на основе преддагаемого ноконго красного в 4% воды. Далее поли-сИтеля, не уступает диагностик му,

меризацпю гфоводят при рН 10,5. Диа- .описанному в прототипе и эрит оцита метр частиц препаратй 3 мкм, Ному -lyMHOhfy. диагностикуму, i

Прим е р 3, Смесь 74,1% дистйл- Диагностихум, полученный описываелированной воДы, 0,5% полийинилпир--мым способом был проверен на гпецйролкдона, 4% диоксана и 17% аКролеИ-фйчность с 15 штаммами Y.pseudotuber-.

па полимеризуют, как в примере 1.culosis, II - Е.coll, 6 - V.cholerae,

Диаметр частиц препарата 2,5 мкм, h - V.Nag, 4 V.eltor, 5 - AeromoП р и м е р 4, Приготовление диаг-пае, I - В.mallei I - B.pseudomal4

ностикума, .Смесь iOO мг суспензии по-lei, 5 - Peeudomonae, 16 Fr.tula- :

лимера и Оs 25-1,, О мг иммуноглобулинаrenais, 3 - B.antracoides, 4 - Sh.

в 3 мл забуференного фйзиологцяеско-dysenterlae 5 - Staph.aureua 5 - ;

го раствора хлористого натрия срН 7,0. j Commamonag, вьщерживают при периодическом neperte- ; .,

шивании 18 ч при 4° С «Отмытый физио- С указайн1л«й мйкроо|)ганизмами и

логическим раствором хлористого на -кочцентрации to w.K./Mft реакции были

рня препарат суспендируют в 8 мл это-отрицательны. го раствора с 0,1% бычьего сывороточного альбумина и используют доя по- Формула и з о б р е т е и Я Я станонки реакции,

. П Р и м е р 5, Методика постановки Способ получения носителя иммуио-

реакции. В лункя полистироловых плас- ,глобулинов ,для обяаружёния возбудитетин разлитзают по 0,5 кп раствораЛЯ чумы, включающий полимеризацию

1%-ной нормальной кроличьей сыворотки55мономера в водном растворе, о т л и в физиологическом растворе хлористо-чающийся тем, что, с целью

го натрия. В первую лунку добавляютупрощения способа н повышения качест0,5 мл исследуемого материала в фи-ва целевого продукта за счет ускоол31443578

ния обнаружения возбудителя при поди- 0,5-1,ОЛ поливинилпирролидона, 4% меризации используют f7-21%-ный вод- дноксаиа и 0,1-0,2% красителя конго ный раствор акрсхлеина, при этом его красного, а затем не менее 1 ч при. инкубируют сначала не менее 1ч с рн 10,5-11,0. О,15-6,2% гидразина в присутствии