2-МЕТОКСИКАРБОНИЛМЕТИЛЕН-4-БРОМ-5-АРИЛ-2,3-ДИГИДРОФУРАН-3-ОНЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ АНТИСТАФИЛОКОККОВУЮ АКТИВНОСТЬ Советский патент 1996 года по МПК C07D307/58 A61K31/335 

Предлагаются новые соединения, а именно 2-метоксикарбонилметилен-4-бром-5-арил-2,3-дигидрофуран-3-оны, проявляющие бактериостатическую активность по отношению к золотистому стафилококку. Указанное свойство позволяет предполагать возможность использования этих соединений в медицине.

Целью изобретения является усиление бактериостатической активности и понижение токсичности в ряду производных 2-метилен-4-галоген-5-арил-2,3-дигидрофуран-3-онов.

П р и м е р 1. 2-Метоксикарбонилметилен-4-бром-5-фенил-2,3-дигидрофуран-3-он (Iа).

К смеси 2,53 г (0,01 моль) 4-бром-5-фенил-2,3-дигидрофуран-2,3-диона и 3,34 г (0,01 моль) метоксикарбонилметилентрифенилфосфорана добавляют при перемешивании 200 мл бензола и нагревают при температуре 80^оС в течение 5 мин. Охлаждают до комнатной температуры, осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из этилового спирта. Получают 2,65 г (86%) кристаллического продукта (Ia) с т.пл. 129-130^оС.

Найдено, C 50,37; H 3,08; Br 25,70.

C₁₃H₉BrO₄
Вычислено, C 50,51; H 2,93; Br 25,85.

Структура соединения (Iа) подтверждена спектральными данными.

ИК-спектр, (ваз. масло) ν, см^-1: 1696 (СООСН₃), 1685-1675 (С=С, С=О), 1577 (С₆Н₅, С=С).

Спектр ПМР, (ГМДС), ДМСО-Д₆, δ, мд.д. 3,78, с. (3Н, СООСН₃), 6,04 с (1Н, СН), 7,90 м (5Н, С₆Н₅).

П р и м е р 2. Синтез 2-метоксикарбонилметилен-4-бром-5-n-толил-2,3-дигидро- фуран-3-она (Iб).

К смеси 2,67 г (0,01 моль) 4-бром-5-n-толил-2,3-дигидрофуран-2,3-диона и 3,34 г (0,01 моль) метоксикарбонилметилентрифенилфосфорана добавляют при перемешивании 200 мл бензола и нагревают при 75^оС в течение 10 мин. Охлаждают до комнатной температуры, осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из этилового спирта. Получают 2,5 г (78%) кристаллического продукта (Iб) с т. пл. 152-153^оС.

Найдено, C 52,17; H 3,60; Br 24,69.

C₁₄H₁₁BrO₄.

Вычислено, C 52,04; H 3,43; Br 24,73.

Структура соединения Iб подтверждена спектральными данными.

ИК-спектр, (ваз. масло), ν, см^-1: 1689 (СООСН₃), 1685-1678 (С=С, С=О), 1573 (С₆Н₅, С=С).

Спектр ПМР, (ГМДС), ДМСО-Д₆, δ, м.д. 2,44 с (3Н, СН₃), 3,81 с (3Н, СООСН₃), 6,05 с (1Н, СН), 7,80 м (4Н, С₆Н₄). Соединения Iа и Iб представляют собой желтые кристаллические вещества, растворимые в спирте, ацетоне, хлороформе, диметилсульфоксиде и нерастворимые в воде и эфире.

Существенное изменение в структуре соединений Ia и Iб по сравнению с аналогом по структуре и действию 2-метоксикарбонилбромметилен-5-n-толил-2,3-дигидрофу- ран-3-оном (II), заключающееся в изменении положения атома брома в молекуле, приводит к увеличению антистафилококковой активности и значительному уменьшению острой токсичности соединений.

Острую токсичность ЛД₅₀ (мг/кг) соединений Ia и Iб определяли по методу Г. Н.Першина. Соединения вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 20-24 г в виде взвеси в 2%-ной крахмальной слизи. Рассчитывали также величину относительной токсичности (ОТ, усл. ед.), показывающую во сколько раз соединение II токсичнее исследуемых соединений (ОТ ЛД₅₀ исследуемого соединения: ЛД₅₀ соединения II.

Для определения бактериостатической активности по отношению к золотистому стафилококку исследуемые соединения растворяли в этиловом спирте в соотношении 1:100 и разводили мясопептонным бульоном (МПБ) до соотношения 1:500. Бактериостатическую активность изучали методом последовательного разведения полученных растворов МПБ по отношению к эталонным штаммам золотистого стафилококка (грамположительные бактерии). При этом использовали смыв суточной культуры, выращенной на мясопептонном агаре, стерильным физиологическим раствором хлорида натрия и готовили исходные разведения с концентрацией 500 млн. микробных тел в 1 мл смыва по бактериальному стандарту. Полученную смесь разводили стерильным МПБ в 100 раз. Это разведение бактериальной культуры с концентрацией 5 млн. микробных тел в 1 мл использовали как рабочий раствор, который в количестве 0,1 мл вносили в 2 мл МПБ, содержащего соответствующее разведение исследуемого соединения. Таким образом, бактериальная нагрузка на 1 мл раствора составляла 250 тыс. микробных тел. Результаты опытов учитывали после 18-20 ч выдержки контрольных и опытных образцов в термостате при 36-37^оС. Регистрировали наличие роста или отсутствие его за счет бактериостатического действия соединения. За действующую дозу принимали минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) соединения, при которой наблюдается задержка роста бактериальной культуры.

Сравнивали острую токсичность ЛД₅₀, антистафиллококковую активность и величину отношения МИК исследуемых соединений Iа, Iб, II и широко применяемого в медицине противомикробного средства этакридина лактата к их ЛД₅₀. Результаты испытаний представлены в таблице.

Острая токсичность ЛД₅₀ соединения Iа 620 мг/кг, а соединения Iб более 2000 мг/кг. Согласно классификации токсичности препаратов, соединение Iа относится к классу малотоксичных, а соединение Iб практически нетоксичных веществ. Соединение II токсичнее соединений Iа и Iб соответственно в 36,5 и более чем 117,6 раз. Введение соединения Iб внутрибрюшинно в дозах, превышающих 2000 мг/кг, что необходимо для точного определения ЛД₅₀, нецелесообразно ввиду механического раздражения брюшины.

Как видно из таблицы, соединения Iа и Iб проявляют выраженное бактериостатическое действие по отношению к эталонным штаммам золотистого стафилококка при МИК соответственно в 4 и 2 раза меньшей, чем эталон сравнения (II), т.е. последний менее активен, а также в 33,3 раза меньшей, чем этакридина лактат. Вместе с тем соединения Iа и Iб проявляют бактериостатический эффект в значительно меньших соответственно в 152 раза (3,65:0,024) и более чем 243 раза (3,65:0,015) эквитоксических концентрациях.

Таким образом, 2-метоксикарбонилметилен-4-бром-5-арил-2,3-дигидрофуран-3-оны Iа и Iб проявляют выраженную антистафилококковую активность, значительно большую, чем у известного соединения аналогичной структуры (II), а также являются гораздо менее токсичными. Следовательно, соединения Iа и Iб могут найти применение в медицине в качестве противомикробных лекарственных средств.

Изобретение касается замещенных фуранов, в частности 2-метоксикарбонилметилен-4-бром-5-фенил(или п-толил)-2, 3-дигидрофуран-3-онов, проявляющих антистафилококковую активность, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных и менее токсичных веществ указанного класса. Их синтез ведут реакцией 4-бром-5-фенил (или п-толил)-2, 3-дигидрофуран-2, 3-диона с метоксикарбонилметилентрифенилфосфораном в среде бензола при 80^oС. Выход, %; т. пл., ^oС; брутто ф-ла: а) 86; 129 - 130; C_1 3H₉BrO₄; б) 78; 152 - 153; C_1 4H₁1BrO₄. Новые вещества имеют токсичность LD_5 0 620 и >2000 мг/кг и активность при минимальной ингибирующей концентрации 15 и 31 мкг/мл против соответственно 70 и 500 мкг/мл для этакридина лактата. 1 табл.

2-Метоксикарбонилметилен-4-бром-5-арил-2,3-дигидрофуран-3-оны формулы

где R - атом водорода или метил,
проявляющие антистафилококковую активность.