Способ выделения антибиотика Советский патент 1962 года по МПК C07C291/10 A61K31/277 A61P31/04 

Известно получение антибиотика, содержащего Ь4-ди-(роксифепил)-2,3-диизонитрил - бутадиен-1,3 путем ферментации поверхностным методом экстракции мицелия органическими растворителями (эфиром, ацетоном, спиртом, этилацетатом и другими), перегонки, промывания сырца легким бензином, растворения в горячем состоянии с применением органических растворителей (спирт, ацетон, диоксан) и осаждения водой. Такой способ выделения указанного антибиотика имеет следующие основные недостатки:

а)разведение в воде поверхностных культур проводится в большом числе теклянр{ых колб, для приготовления питательных сред стерилизации посева и для отделения старого мицелия посредством фильтрования требуется много рабочей силы, расходуется больщое количество материала и необходимы значительные отапливаемые производственные площади;

б)неточность контроля и регулирования процесса ферментации во время роста культуры, продолжающегося в течение 28 дней;

в)неприменимость способа для погруженной культуры;

г)возможные потери продукта.

Предлагаемый -способ выделения антибиотика, содержащего 1.4ди-(р-оксифенил)-2.3-диизонитрибутадиен-ЬЗ, из культуральной жидкости в отличие от известных способов позволяет упростить технологическую и аппаратурную схемы выделения ант1 биотика, снизить потери продукта и исключить применение растворителей. Это достигается тем, .что штамм выращивают методом погруженных культур до полного распада л..ицелия, после чего осаждают антибиотик в культуральной жидкости и очищают известными прие.мами. К периоду распада мицелия

№ 145570- 2 культуру изолируют и выдерживают до полного растворения антибиотика в культуральной жидкости с последующей очисткой известными приемами.

Пример 1. Споры специальпого пепициллового штамма после пересева на агаре па просе при температуре 300° К 27°С и по истечении 10-дпевиой инкубации берут для посева па каждые 100 мл питательного раствора. Полученную таким образом сильно разросшуюся предварительную культуру добавляют в количестве 5%, как посев, к 10 л промежуточной культуры, из которой затем берут по 5 л для посева в 100л главной культуры. После культивирования в течение 8 дней при температуре 300° К (27°С) мицелий распадается, и процесс ферментации прекращают. Загрязненный антибиотик, осевший в культуральной жидкости, отделяют с помощью фильтрования, центрифугирования и очищают известными приемами. Выход чистого антибиотика составляет 60 г на 100 л питательного раствора.

Пример 2. Приготовление материала для посева и процесс ферментации проводят, как в примере /. После начавшегося распада мицелия (примерно через 5 дней) погруженную культуру перемещают в запасной сосуд для дальнейшего самонереваривания, которое приводит к полпому раснаду мицелия. Затем выделяют антибиотик, как в примере 1.

Пример 3. Поступают так же, как в примерах 1, 2, с той лишь разницей, что часть мицелия развивающейся основной культуры применяют в качестве посевного материала для последующих культур.

Предмет изобретения

1.Способ выделения антибиотика, содержащего Ь4-ди-{р-оксифенил)-2,3-диизонитрилбутадиен-1,3, из культуральпой жидкости, отличающийся тем, что, с целью упрощения технологии, снижения потерь продукта и исключения использования растворителей, штамм выращивают способом погруженных культур до полпого распада мицелия, осаждают антибиотик в культуральной жидкости и очищают известными приемами.

2.Способ по п. I, отличающийся тем, что к периоду распада мицелия культуру изолируют и выдерживают до полного растворения антибиотика в культуральной жидкости с последующей очисткой известными приемами.