Изобретение касается производных 1,2,4-триазино[5,6-b]индола, конкретно амида (1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-3-тио)уксусной кислоты формулы
ускоряющего процессы восстановления после физических нагрузок и обладающему противогипоксической активностью.
Целью изобретения является новое производное 1,2,4-триазино[5,6-b]индола, обладающее одновременно способностью ускорять процессы восстановления после физических нагрузок и противогипоксической активностью, а также улучшенными свойствами: более высокой восстановительной активностью в поздние сроки (48 ч и более) после физических нагрузок и меньшей токсичностью по сравнению со структурными аналогами гидрохлоридом 3-(2-диметиламиноэтилтио)-9-метил-1, 2,4-триазино[6,5-b]индола (II), этиловым эфиром 1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-3-тиогликолевой кислоты (III) и дигидрохлоридом 8-метокси-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b]индола (IV).
П р и м е р. К раствору 12,13 г (0,06 моль) 3-меркапто-1,2,4-триазино[5,6-b] индола в 72 мл 1 н.раствора едкого натра постепенно прибавляют раствор 6,73 г (0,072 моль) хлорацетамида в 55 мл воды. Сразу после смешивания выпадает осадок продукта реакции. Перемешивают 2 ч, оставляют на ночь, выпавший осадок промывают ледяной водой (2х40 мл), охлажденным спиртом (2х20 мл) и сушат при 90oC. Получают амид (1,2,4-три азино[5,6-b]индолил-3-тио)уксусной кислоты, выход 13,49 г (86,9%). Вещество очищают перекристаллизацией из смеси диметилформамида и изобутилового спирта (1,6:1) 78,3 мл/г, выход при перекристаллизации 67,8% и получают в виде мелких белых кристаллов, т.пл. 228 230oC (разл.). Вещество не растворяется в воде, растворимо в диметилсульфоксиде, устойчиво при хранении, не гигроскопично.
Вещество однородно по данным ТСХ на силуфоле, Rf 0,85 (элюент - ацетон-бензол-ДМФА, 3:2:1).
Строение соединения 1 подтверждается данными элементного анализа, УФ-, ИК- и масс-спектроскопии.
Найдено, C 50,82; H 3,27; H 26,94; S 12,14.
C11H9N5OS.
Вычислено, C 50,96; H 3,50; N 27,01; S 12,36.
ИК-спектр в вазелиновом масле, ν, см-1: 3380 (валентные колебания NH), 1600 (NH, полоса амид II), 1640 (C=0).
УФ-спектр в спирте, lмакс, нм (lg ε ): 264 (4,51), 342 (4,08).
Масс-спектры, m/z (относительная интенсивность,): 261 M+2 (2,1), 260 M+1 (3,6), 259 M+ (21), 243 (25), 242 (100), 216 (34), 215 (46), 201 (21), 187 (36), 186 (49), 173 (41), 169 (79), 168 (21), 129 (29), 102 (41).
Ниже приведены результаты исследования биологической активности и токсичности соединения I.
Влияние на процессы восстановления после физических нагрузок. Изучение влияния соединения I на процессы восстановления работоспособности после максимальной физической нагрузки производили на крысах. Предварительно отобранных животных заставляли совершать бег на третбане до полного отказа от работы, после чего им немедленно вводили препараты. Контрольной группе вводили изотонический раствор натрия хлорида в том же объеме. Все группы животных совершали повторный бег на третбане через 1, 24, 48 и 72 ч после введения препаратов.
Вводили следующие препараты: соединение I и препараты сравнения: наиболее активный аналог гидрохлорид 3-(2-диметиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4-триазино[6,5-b] индола (II) и этиловый эфир 1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-3-тиогликолевой кислоты (III), обладающие тем же спектром биологической активности, что и соединение I. Все препараты вводили внутрибрюшинно в виде водной суспензии, стабилизированной твином-85. Препараты I и III вводили в дозе 40 мг/кг, препарат II в дозе 20 мг/кг. Все дозы подобраны предварительно в отсеивающих опытах как оптимальные эффективные дозы. Результаты исследования приведены в табл. 1.
В табл. 1 представлены средние данные из 6 8 наблюдений для каждой точки в виде к исходному бегу для каждого животного. Различия с контролем статистически значимы во всех случаях, кроме интервала 1 ч. Различия между группами недостоверны во всех случаях.
Соединение I превосходит аналоги III и II в поздние сроки после введения (через 48 и 72 ч).
Влияние соединения I на выживаемость животных при острой гипобарической гипоксии. Опыты ставили на белых мышах-самцах обычных кондиций. Животных "поднимали" в барокамере в первую минуту на 5 км, а далее со скоростью 1 км/мин до 9,5 11 км, где они находились на "площадке" 45 мин. Учитывали число выживших животных. Препараты вводили за 45 60 мин до опыта описанным способом в дозах 6,25 100 мг/кг. Изучены соединение I и аналог соединение III, обладающее тем же спектром биологической активности, и наиболее активный аналог дигидрохлорид 8-метокси-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b]индол (IV). Результаты опытов приведены в табл. 2.
Несмотря на то что вещество I несколько уступает обоим аналогам по активности, проверка с помощью точного метода Фишера показала, что ни в одном случае отличия в активности препарата I и любого из аналогов не являются статистически значимыми. Более того, наименьшее значение Р составляет 0,43, что означает принадлежность всех выборок, полученных с разными препаратами, к одной генеральной совокупности. Выживаемость в контрольных группах для всех препаратов была примерно одинакова и равнялась 8 12%
Соединение I практически не отличается по противогипоксической профилактической активности от аналогов.
Токсичность соединения I и аналогов. Определяли острую токсичность соединений I IV. Результаты изучения и данные для сопоставления по максимальным эффективным дозам и терапевтическим индексам веществ приведены в табл. 3.
Соединение I относится к веществам малотоксичным, тогда как все аналоги принадлежат к веществам, умеренно токсичным. Его терапевтический индекс намного выше, чем у любого из аналогов.
Таким образом, соединение I превышает аналоги по действию на восстановление после истощающих физических нагрузок, близко к аналогам по противогипоксическому действию и существенно превышает по терапевтическому индексу.
Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к амиду (1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-3-тио)уксусной кислоты, который ускоряет процессы восстановления после физических нагрузок и обладает противогипоксической активностью. Цель - выявление новых более активных соединений указанного класса. Получение целевого соединения ведут из 3-меркапто-1,2,4-триазино[5,6-b]индола в NaOH и хлорацетамида в водной среде. Выход 67,8%, т. пл. 228 - 230oС. Полученное соединение обладает более высокой восстановительной активностью в поздние сроки (48 ч и более). 2 табл.
Амид(1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-3-тио) уксусной кислоты формулы
ускоряющий процессы восстановления после физических нагрузок и обладающий противогипоксической активностью.
