ДИГИДРОХЛОРИД 8-МЕТОКСИ-3-(2-ДИЭТИЛАМИНОЭТИЛТИО)-1,2,4-ТРИАЗИНО [5,6-B]ИНДОЛА, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ И СТРЕСС-ПРОТЕКТИВНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1996 года по МПК C07D487/04 A61K31/53 

Изобретение относится к производным триазиноиндола, конкретно к дигидрохлориду 8-метокси-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b] индола формулы 1

обладающему антигипоксической и стресс-протективной активностью.

Целью изобретения является новое производное триазиноиндола, оказывающее одновременно антигипоксическое и стресс-протективное действие и обладающее более высоким уровнем активности по сравнению со структурными аналогами.

П р и м е р 1. К раствору 3 г (12,91 моль) 3-меркапто-8-метокси-1,2,4-триазино[5,6-b]индола в 30 мл 1н. водного едкого натра при перемешивании постепенно приливают раствор 2,44 г (14,2 ммоль) гидрохлорида 2-диэтиламиноэтилхлорида в 8 мл воды. Продолжают перемешивание 3 ч и оставляют на ночь. Осадок отфильтровывают, промывают водой (4х2,5 мл) и сушат при 110^oС. Получают основание соединения формулы 1 в виде кристаллов цвета хаки, выход 3,82 г (89, 2%). Вещество превращают в гидрохлорид путем перекристаллизации из 150 мл смеси изопропилового спирта и концентрированной соляной кислоты (8,5:1 по объему). Получают дигидрохлорид 8-метокси-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b]индола, выход 3,3 г, оранжевые кристаллы, Т.пл. 2,7^oС.

Вещество растворяется в воде, устойчиво при хранении, не гигроскопично, однородно по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ).

Условия ТСХ: адсорбент силуфол, растворитель для нанесения водный спирт 1:1, подвижный растворитель метиловый спирт 3 н. водный аммиак, 10:1 по объему, Rf 0,26.

Строение вещества формулы 1 подтверждается данными элементного анализа, потенциометрического титрования щелочью в 70%-ном водном спирте, а также УФ-спектром.

Найдено, C 47,38; H 5,91; Cl 17,42; N 17,60, S 7,85.

C₁₆H₂₃Cl₂N₅OS.

Вычислено, C 47,52; H 5,73; Cl 17,54; N 17,32; S 7,93.

УФ-спектр в воде: λ_макс, нм (lg E): 220 (4,271), 272,5 (4,404), 281 (4,412), 342 (4,010). Спектр снят на приборе СФ-20. Положение двух длинноволновых полос поглощения характерно для 3-S-аминоалкильных производных 1,2,4-триазино[5,6-b]индола.

П р и м е р 2. Определение антигипоксической активности.

Определяют антигипоксическую активность на мышах массой 18-22 г и крысах-самцах массой 180-220 г на модели гипоксической гипоксии, которую вызывают путем помещения животных в барокамеру с приточно-вытяжной вентиляцией. Мышей поднимают на высоту 11000 м, а крыс на 12000 м. За животными ведут наблюдение в течение 45 мин с момента достижения соответствующей высоты. Регистрируют процент выживаемости в опыте и контроле.

Соединение формулы I вводят внутрибрюшинно в дозе 6,25; 12,5; 25,50 и 100 мг/кг в виде 1%-ного водного раствора. Контрольным животным вводят внутрибрюшинно такой же объем физиологического раствора за 1 ч до подъема.

Антигипоксическую активность в осложненных условиях исследовали на крысах путем однократного предварительного подкожного введения им изадрина в дозе 80 мг/кг за сутки до подъема в барокамере. На этом фоне препарат вводят крысам внутрибрюшинно за 1 ч до подъема в дозе 25 и 50 мг/кг. Регистрируют длительность жизни животных.

В результате исследования обнаружено, что профилактическое введение предлагаемого соединения дает значительное увеличение выживаемости мышей в дозе 6,25 и 12,5 мг/кг. Так в указанных дозах препарат защищает от гибели до 60% мышей, а в дозах 25, 30 и 100 мг/кг массы до 80% животных.

В следующей серии изучали активность предлагаемого препарата в осложненных условиях.

Показано, что длительность жизни крыс увеличивается при введении им этого препарата в дозе 25 мг/кг. Если у контрольных животных зарегистрировали длительность жизни 8,3 мин, то после введения препарата 34,6 мин.

Соединение формулы I в малых дозах значительно увеличивает выживаемость животных в условиях гипоксической гипоксии, а также увеличивает длительность жизни животных в осложненных условиях. Влияние соединения формулы I на устойчивость животных к гипоксии (Р≅ 0,5) показано в табл. 1.

Соединение II структурный аналог гидрохлорид 3-(2-диэтиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4-триазино[5,6-b] индола. Влияние соединения формулы I на устойчивость к гипоксии в осложненных условиях представлено в табл. 2.

Исследование стресс-протективной активности предлагаемого препарата.

В качестве модели длительного стресса используют методику лишения мышей сна, пищи и воды в медленно вращающемся барабане (0,2 км/ч). Опыты выполнены на 50 мышах-самцах. Одновременно исследованы две группы животных. После суточного пребывания в барабане животным представлялся суточный отдых, пища и вода, после чего они снова помещались в барабан. Указанная последовательность событий сохранялась до гибели большинства животных контрольной группы.

Этот препарат вводился на протяжении всего эксперимента два раза в сутки подкожно в дозе 10 мг/кг. Контрольные животные получили в те же сроки физиологический раствор. Статистическая обработка результатов производилась по точному критерию Фишера (табл.3). Влияние соединения формулы I на выживаемость животных в условиях длительного стресса показано в табл.3.

Полученные данные свидетельствуют, что профилактическое введение соединения формулы I в условиях длительного стресса в 3 раза увеличивает выживаемость животных в этих условиях.

Острая токсичность вещества определялась на самцах белых мышей. ЛД₅₀ при внутрибрюшинном введении составила 200 мг/кг.

Предлагаемое соединение обладает достаточной фармакологической широтой.

Соединение формулы I в дозе 50 мг/кг превосходит аналог, соединение II, по гипоксической активности и значительно превосходит аналог, соединение III, по стресс-протективной активности и, кроме того, обладает двумя указанными видами активности одновременно.

Дигидрохлорид 8-метокси-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b] индола формулы

обладающий антигипоксической и стресс-протективной активностью.

Дигидрохлорид 8-метокси-3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазино- (5,6-b)индола формулы

обладающий антигипоксической и стресс-протективной активностью.