Способ подготовки проб для количественного определения лекарственных средств группы первичных ароматических аминов в ткани печени Советский патент 1989 года по МПК G01N33/50 

Изобретение относится к токсикологической химии и может быть использовано при проведении химико-токсикологических и судебно-химических ис-. следований.

Целью изобретения является упрощение и повышение чувствительности определения.

Поставленная цель достигается использованием трехкратного настаивания объекта исследования хлорной кислотой в концентрации 1-4 н, с последующим объединением вытяжек первичных ароматических аминов.

Способ осуществляется следующим образом.

Мелкоизмельченная ткань печени, содержащая исследуег-ый препарат группы первичных ароматических аминов, помещают в химический стакан и заливают раствором хлорной кислоты в концентрации 1 ,0-4 , О н. до полного покрытия твердых частиц объекта и настаивают 2ч при комнатной температуре, периодически перемешивая содержимое стакана. По истечении указанного срока кислотную вытяжку сливают Операцию настаивания повторяют дважды, применяя настаивание в течение соответственно 2 и 1 ч. Объединяют полученные вытяжки и измеряют объем полученногоi извлечения. Осажденные в процессе изолирования хлорной кислотой белки отделяют центрифугированием небольшой части вытяжки (8-10 мл)|. Аликвотную часть полученной депротесл tc

ас

инизированной вытяжки используют для определения в ней исследуемых препаратов группы первичных ароматических аминов.

Пример. Свежую печень трупа человека, погибшего в результате травмы, мелко измельчают и по 25 г помещают в химические стаканы. В стаканы прибавляют по 10 мл раствора соответствующего соединения с концентрацией 100 мкг/мл, оставляют на сутки при комнатной температуре периодически помешивая„ Параллель но проводят холостые опыты. По истечении 24 ч изолируют исследуемые вещества и подготавливают пробу к анализу описанным способом.

Количественное определение содержания исследуемых препаратов в пробе проводят фотоколориметрическим методом, основанным на реакции взаимодействия диазотированных препаратов с 3-oi, У -дикарбоксипропилродаНИНОМо

Расчет содержания анализируемых веществ в исследуемых растворах производят по соответствуюгдим калибровочным графикам.

При построении калибровочных графиков в мерные колбы на 25 мл вносят по 0,01; 0,05; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 мл стандартного раствора препарата в 1,0 н. соляной кислоте при проведении исследования на новокаин и новокаинамид в дистиллированной воде) с концентрацией 100 мкг/мл, после чего в колбы вносят недостающее до 1 мл количество 1 Но соляной кислоты и по 1 мл 0,1%-ного родного раствора нитрита натрия Через 15 с в колбы добавляют по 1 мл 0,1%-ного спиртового раствора З-с/, J-дикарбоксипропилроданина. После Тщательного перемешивания общий объем жидкости в колбе доводят до метки смесью 0,05 М раствора тетра- бората натрия и 0,1 н. раствора гидр оксида натрия (1:2)„ После перемешивания содержимого колб производят измерение оптической плотности окрашенных растворов азороданинов с использованием фотоэлектроколориметра КФК-2 в кювете с толщиной рабочего

0

5

0

5

0

5

0

5

0

слоя 50 мм при светофильтре с длиной волны нм.

Светопоглощение окрашенных растворов во всех случаях подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций 1-40 мкг препарата в 25 мл конечного объема. В качестве раствора сравнения используют смесь всех перечисленных реактиВОВо

В таблице приведены препараты группы первичных ароматических аминов в печени человека при обработке ее хлорной кислотой разных концентраций.

Таким образом, применение предлагаемого способа за счет использования в качестве изолирующей жидкости хлорной кислоты в концентрации 1- 4 н., исключения процессов экстракции органическими неполярными растворителями, исключения необходимости центрифугировать большие объемы жидкостей, исключения необходимости проведения фильтрования вытяжек позволяет существенно повысить эффектив ность изолирования препаратов группы первичных ароматических аминов из тканей биологического происхождения с 0,18-8,50% до 64,26-91,53%, что повышает чувствительность определения и позволяет проводить определение минимальных количеств препаратов данной группы в биологических тканях, сократить трудоемкость проведения анализа, уменьшив количество существенных операций с 10 до 5о

Формула изобретения

Способ подготовки проб для количественного определения лекарственных средств группы первичных ароматических аминов в ткани печени путем измельчения, обработки раствором кислоты, отделения кислотной вытяжки с дальнейшим определением, отличающийся тем, что, с целью упрощения и повышения чувствительности определения, измельченную ткань трехкратно обрабатывают 1-4 и раствором хлорной кислоты и вытяжки объединяют.

Препарат

Концентрация хлорной кислоты (н,), 0,02 I 0,5 I 1,0 I 2,0 Г 4,0 Степень изолирования, %

Изобретение относится к токсикологической химии и может быть использовано при проведении химико-токсикологических и судебно-химических исследований. Цель - упрощение и повышение чувствительности определения лекарственных средств группы первичных ароматических аминов в печени. Для этого измельченную печень трехкратно обрабатывают раствором хлорной кислоты в концентрации 1-4 н., вытяжки объединяют и определяют содержание исследуемых препаратов фотоэлектроколориметрическим методом.

34,9673,1586,4988,4491,53

56,5476,5686,1890,2391,14 67,2769,9088,4090,8890,60

53,9355,4364,2673,5975,22

35,9859,0875,8775,9984,53

48,0166,81 -,81,7286,0990,08

53,7160,5172,9478,9686,00