Способ определения антигена в биологических жидкостях Советский патент 1989 года по МПК G01N33/53 

Изобретение отпосится к медицине, в частности к серологической диаг- Hcic .

Пель изо трптения - повышение чувствительности издшсации антигена и ускорение способа.

Способ осуществляют следующим образом,

Делак как обычно смыв клеток ста- d)i-trioKOKKa Кован 1 после его роста в течение 24 ч на косяках (5-10 косяков с питательной средой) 0,85%-ным раствором NaClo Затем прогревают 5 - 15 мгс Г в кипящей вo янoй бане и вносят краситель Конго-рот до 0,1 ,0%-чой концентрации на 1-2 мин,после lero взвесь стафилококка 2-3 ра- :;л отмывают 0,85%-ньп раствором аС1

доводят до 20-25 млрд. концентрации и используют в течение 4 мес (срок 1аблюдения) о

Для жадикации антигена используют экстракт фекалий, приготовленный обычным способом. Смешивают на предметном стекле одну каплю исследуемого на антигенэкстракта, одну каплю антимикробной сьшоротки, и добавляют через 2-15 мин одну каплю окрашенной инактивированной взвеси стафилококка. Через 3-10 мин отмечают наличие агглютинации клеток стафилококка. Используют антимикробные сыворотки коммерческие и собственного приготовления и в разведении 1:10 - 1:200,

П р и м е р. При обследовании больных острыми кишечньпчи инфекциями

СЛ

ОР

о со

00 00

проведен поиск антигенов шигелл и эшерихий в фекалиях по известному и предлагаемому способом. По известному способу формалинизированную взвес стафилококка нагружали сьторотками Зонне, эшерихиозными 026, 055, 086, трижды отмьгоали, ресуспендировапи и вносили в лунки планшет в равных объемах с раститрованным экстрактом исследуемых фекалий.

По предлагаемому способу делали смыв стафилококка Кован 1 с пяти косяков с мясопептонным; агаром после 24 ч роста.при З/С 0,85%-ным раст- вором NaCl, инактивировали в кипящей водяной бане в течение 5 мин, доводили по стандарту мутности до 20 млрд, концентрации, вносипи Конго-рот до концентрации 0,5%, вьиерживали 2 мин и дважды отмьгеали 0,85% раствором NaCl, ресуспендировали до 20 млрд.

На предметное стекло наносипи одну каплю экстракта исследуемых фекалий, добавляли одну каплю антимикроб ной сьшоротки (Зонне в разведении 1:150, эшерихиозные в разведении 1:10), вьздерживали 2 мин и вносили

O

5 0

5

одну каплю окрашенного инактивирован- ного стафилококка. Через 6 мин наблюдали агглютинацию (укрупнение частиц) стафилококка. Чувствительность индикации иллюстрируется таблицей.

Таким образом, чувствительность индикации по предлагаемому способу Bbmie, чем по известному, в 2-6 раз при ускорении исследования.

Формула изобретения

Способ определения антигена в биологических жидкостях путем реакции агглютинации с применением специфической антисыворотки и суспензии стафилококка Cowan 1, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, в изучаемый материал добавляют равный объем антисыворотки и через 2-15 мин вносят взвесь -интактных клеток стафилококка Cowan I, прогретую в течение 2-3 мин при и окрашенную О,1%-ным раствором Конго- рот и через 10 мин регистрируют результаты реакции агглютинации.

Изобретение относится к медицине и, в частности, к серологической диагностике. Цель изобретения - повышение чувствительности индикации антигена и ускорение способа. Для индикации антигена в биологических жидкостях смешивают на предметном стекле одну каплю исследуемой на антиген жидкости или экстракта и одну каплю специфической антимикробной сыворотки и через 2-15 мин добавляют одну каплю окрашенной инактивированной взвеси стафиллококка Кован 1, прогретой при 100°С в течение 2-3 мин. Через 10 мин регистрируют результаты реакции агглютинации. 1 табл.

Способ

индикаций

Средняя арифметическая минимальной выявляемой дозы антигена, мкг/мл, специфичности

Зонне

Т

026

т

055

г

086

0,04 ±0,004 0,01 t0,002

0,06± 0,005 0,01 ±0,002

т

055

г

086

0,08 ±0,005 0,04± 0,005 0,03 ±0,004 0,01± 0,002