Способ получения производных тиолактам-N-уксусной кислоты или их солей с щелочными металлами Советский патент 1990 года по МПК C07D265/36 A61K31/538 A61K31/5415 A61P7/02 C07D279/16 

Изобретение относится к способу получения новых производных тиолак- там-К-уксусной кислоты или их солей с щелочными металлами, которые обладают высокой активностью ингибирова- ния альдозоредуктазы и агрегации

тромбоцитов и могут найти применение в медицине.

Целью изобретения является создание новых соединений в ряду производных тиолактам-М-уксусной кислоты, проявляющих повышенную активность

О4

ингибирования альдозоредуктазы и агрегации тромбоцитов

Их получают щелочным гидролизом соответствующего эфира тиолактама N-уксусной кислоты в среде растворителя, такого как метанол, этанол, пропанол, 2-пропанол, 2-метоксиэта- нол, диоксан, тетрагидрофуран, диме- токсиэтан, ацетонитрил или ацетон при 10-60° С с последующей,, при необходимости, обработкой реакционной смеси минеральной или карбоновой кислотой с выделением целевого продукта в свободном виде или в виде его |5 разбавляют водой, подкисляют 2 н.

20

25

30

35

соли с щелочным металлом.

Пример 1. Получение 3,ди- гидро-2-изопропил-3 тиоксо-2Н-1 , t- -бeнзoкcaзин-i -yкcycнoй кислоты.

(1)К раствору 2-изопропил 2Н-1,k -бензоксазин-3(Н)-она (19,1 г) в И,М-диметилформамиде (200 мл) добавляют гидрид натрия (60%-ный в масле 4,0 г) и перемешивают при комнатной температуре 30 мин и к реакционной смеси по каплям добавляют раствор метилового эфира бромуксусной кислоты (10 мл) в NjN-диметилформамиде

(200 мл ) при охлаждении льдом. После перемешивания при охлаждении льдом в течение часа реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилаце- татом. Экстракт промывают водой, сушат (MgS04) и выпаривают досуха. Получают метиловый эфир 3, --дигидро-2- -изопропил-3 оксо 2Н-1,4-бeнзoкcaзин- - t-yкcycнoй кислоты в виде масла. Выход 26,0 г (98,9%).

(2)Смесь метилового эфира гидро-2-изопропил-3-оксо-2Н-1,4-бенз- оксазин-4 уксусной кислоты (26,0 г), пентасульфида фосфора (,А г) и толуола (250 мл) нагревают с обратным холодильником 3 ч. После охлаждения нерастворимое вещество отфильтровывают, а растворитель выпаривают. К остатку добавляют изопропиловый эфир (200 мл) и нерастворимое вещество удаляют фильтрацией. Растворитель выпаривают, к остатку добавляют гек- сан и получают кристаллы метилового эфира 3 Дигидро-2-изолропил 3-ти- оксо-2Н-194-бензоксазин-4™уксусной

кислоты.

хлористоводородной кислотой и экст рагируют этилацетатом. Экстракт пр мывают водой, сушат (сернокислый магний) и растворитель выпаривают. остатку добавляют гексан и получаю кристаллы 3,-дигидро-2-изопропил- -3-ТИОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-А-укс рной кислоты.

Выход 12,6.г (79,2%). Перекрист лизацией из смеси изопропиловый эф гексан получают желтые призмы (тем пература плавления 99-100°С). Выхо 11,2 г (70,6%).

Найдено,%: С 58,85; Н 5,69; N 5

С|3 fl

Вычислено,%: С 58,85, Н 5,60/ N 5,28.

Пример 2. Получение 6-фто 3 ДИгидро-2-изопропил-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, как и в прим ре 1, из исходного соединения 6-фт -2-изопропил-2Н-1,-бензоксазин-З (Н)-она получают 6-фтор 3,-дигид ро-2-изопропил-3-тиоксо-2Н-1,-бен оксазин- -уксусяУЮ кислоту в виде светло-желтых призм (перекристалли зацией из смеси изопропиловый эфир гексан), температура плавления 132 133°С.

Общий выход 60,0%.

Найдено,%: С 55J3J Н Ц,98; N4,

Cl} H14FN03S

, Вычислено,%: С 55, Hj H ,98; 50 N ..

Пример 3° Получение 8-хло -35А-дигидро 2-изопропил-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин- -уксусной кислоты.

40

45

Выход 22,5 г (80р6%), Перекристал-55 лизацией из изопропилового спирта получают желтые призмы (температура плавления 60-61°С).

Найдено,3: С 59,98; Н 6,18; N4,96.

C)4HnNO S

Вычислено,: С6QJ9; H6.13; N 5,01.

(3) К раствору метилового эфира 3,-дигидро-2-изопропил-3 тиоксо- -2Н-1,-бензоксазин- -уксусной кислоты (16,7 г) в смеси метанол-диоксан (2:3, 150 мл) по каплям добавляют 2 н. гидроокись натрия (60 мл) в течение 10 мин при перемешивании. После окончания добавки перемешивание продолжают еще 15 мин, затем смесь

0

5

0

5

5

хлористоводородной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Экстракт промывают водой, сушат (сернокислый магний) и растворитель выпаривают. К остатку добавляют гексан и получают кристаллы 3,-дигидро-2-изопропил- -3-ТИОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-А-уксус- рной кислоты.

Выход 12,6.г (79,2%). Перекристат - лизацией из смеси изопропиловый эфир- гексан получают желтые призмы (температура плавления 99-100°С). Выход 11,2 г (70,6%).

Найдено,%: С 58,85; Н 5,69; N 5,30.

С|3 fl

Вычислено,%: С 58,85, Н 5,60/ N 5,28.

Пример 2. Получение 6-фтор- 3 ДИгидро-2-изопропил-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, как и в примере 1, из исходного соединения 6-фтор- -2-изопропил-2Н-1,-бензоксазин-З (Н)-она получают 6-фтор 3,-дигид-. ро-2-изопропил-3-тиоксо-2Н-1,-бенз- оксазин- -уксусяУЮ кислоту в виде светло-желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир- гексан), температура плавления 132- 133°С.

Общий выход 60,0%.

Найдено,%: С 55J3J Н Ц,98; N4,95.

Cl} H14FN03S

, Вычислено,%: С 55, Hj H ,98; 0 N ..

Пример 3° Получение 8-хлор- -35А-дигидро 2-изопропил-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин- -уксусной кислоты.

Таким же способом, как и в примере 1, из исходного соединения 8-хлор-| -Зр йигидро-2-изопропил-2Н-1,-бенз- оксазин 3 (Н)-она получают 8-хлор0

5

-3,4-дигидро-2-изопропил-3 тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусную кислоту в виде светло-желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропи- ловый эфир-гексан), температура плав15

ления 144-145°С, Найдено,: С

N

C,,H,4ClNOj Вычислено, : 4,67. Пример

Общий выход 69,5. 52,40; H 4,6{ N 4,6

С 52,09{ Н 4,71,

4. Получение 8-фтор- -3,4-дигидро-2-изопропил-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же образом, как и в примере 1, из исходного соединения 8-фтор-2- -изопропил-2Н-1,4-бензоксазин -3(4Н)- -она получают 8-фтор-3,4-дигидро-2- -изопропил-3 тиоксо-2Н-1 , 4-бензокса- 31 -4-уксусную кислоту в виде светло желтых призм (перекристаллизована из смеси изопропиловый эфир-гексан), температура плавления 125 127°С. Общий выход 70,7%.

Найдено,: С 55,36; Н 5,05; N4,96

C hUFNO S

Вычислено,; С 55,11, Н 4,98; N 4,94.

Пример 5. Получение 3,4-ди- гидро-2-изопропил-8-метокси-3 тиок- со-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же образом, что и в примере 1, из исходного соединения 2-изопро- пил-8-метокси-2Н-1,4-бeнзoкcaзин- -3(4H)-oнa получают 3 4-дигидро-2- -изопропил-8-метокси-З-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусную кис- .лоту в виде светло-желтых призм (перекристаллизацией из изопропило- вого эфира), температура плавления 159-1бО°С. Общий выход 69,9%.

Найдено,: С 56,99; Н 5,83; N4,73

Сц

Вычислено,: С 56,93; Н 5,80; N 4,74.

Пример. 6. Получение 3,4-ди- гидро-2-йэопропил-8-метил-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же образом, как и в примере 1, из исходного соединения 2-изопро- пил-8-метил-2Н-1,4-бензоксазин-З(4Н)- -она получают 3,4-дигидро-2-изопро- пил-8-метил-3-тиоксо-2Н-1,4-бензокса- зин-4-уксусную кислоту в виде желтых игл (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир-гексан), температуов538895

63,

10

- е- - о- з 20

ра плавления 148-149°С 71,7%.

Найдено,: С

С (4 Н п N0,3 Вычислено, N 5,01.

Пример

Общи и выход

бо,зо; н 6,18; N5,01, С 60,19/ н 6,13;

7. Получение 3,4-ди- гидро-2,8-диизопропил-3-тиоксо-2Н-1,4- -бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же образом, как и в примере 1, из исходного соединения 2,8- -диизопропил-2Н-1,4-бензоксазин-З(4Н)- -она получают 3,4-дигидро-2,8-диизо- 15 пропил-3 тиоксо-2Н-1,4-бензоксазин- -4-уксусную кислоту в виде желтых призм (перекристаллизована из смеси изопропиловый эфир-гексан), температура плавления 128-129°С. Общий выход 68,2.

Найдено,: С 57,11; Н 5,98, N4,71.

5

5

0

5

0

С14Н„Н048 Вычислено,: С N 4,74.

56,93; Н 5,80,

Пример 8. Получение 3,4- -дигидро-2-изопропил-3 тиоксо-2Н-1,4- -бензтиазин-4-уксусной кислоты.

(1)Раствор 2-изопропил-2Н-1,4- -бензтиазин-3(4Н)-она (62,1 г) в

Q М,Н-диметилформамиде (150 мл) по каплям добавляют к перемешиваемой суспензии гидрида натрия (60 в масле, 12,0 г) в Ы,М-диметилформамиде (180 мл). Смесь перемешивают 30 мин и в нее по каплям добавляют раствор метилового эфира бромуксусной кислоты (30 мл) в Ы,Ы-диметилформамиде (60мл) при охлаждении льдом Смесь перемешивают еще один час при охлаждении льдом, переливают в 1 л воды со льдом и экстрагируют этилацетатом. Слой этилацетата промывают, сушат (MgSCb) и концентрируют. Остаток кристаллизуют из гексана и получают метиловый эфир 3 4-дигидро-2-изопропил- -3-ОКСО-2Н-1,4-бензтиазин-4-уксусной кислоты в виде кристаллов. Выход составил 60,3 (72,0). Перекристаллизацией из смеси 2-пропанол-гексан получают бесцветные призмы, температура плавления 81-82°С.

Найдено,: С 60,30, Н 6,13,р N 5,04.

CHH17N°iS

Вычислено,: С 60,19, Н 6,13, N 5,01.

(2)Смесь метилового эфира 3,4-ди- гидро-2-изопропил-3-оксо-2Н-1,4-бенз- тиазон-4-уксусной кислоты (50 г), толуола (450 мл) и пентасульфида фос5

7153889

фора (79,5 г) нагревают с обратным холодильником 5,5 ч при перемешивании. После охлаждения нерастворимое вещество удаляют фильтрацией, а растворитель выпаривают. К остатку добавляют изопропиловый эфир (300 мл) и нерастворимое вещество удаляют фильтрацией. Фильтрат концентрируют, а остаток кристаллизуют из 2-пропанола ю и получают метиловый эфир 3,4-дигид- ро-2-изопропил-3-тиоксо-2Н-1,4-бенз- тиазин-А-уксусной кислоты в виде кристаллов. Выход 27,0 г (51,0%). Перекристаллизацией из 2-пропанола полу- мают желтые призмы, температура плавления 9 9-100 С.

Найдено,-/;: С 57,05/ Н 5,87 N 4,73,

СКН NO±S

Вычислено,: С 56,92; Н 5,80 N 4,74.

(3) Метиловый эфир 354--дигидро- -2-изопропил-3-тиоксо-2Н-I,4-бенз- тиазин-4-уксусной кислоты растворяют в смеси метанолдиоксан (в отношении 1:2 по объему, 210 мл) и к раствору по каплям добавляют 2 н. гидроокись натрия (70 мл) с перемешиванием. Смесь перемешивают при комнатной тек пературе еще 2 ч, разбавляют водой и подкисляют хлористоводородной кислотой. Кристаллический осадок собирают фильтрацией, перекристаплизовы- вают из смеси 2-пропанол-водэ и получают 3,4-дигидро-2-изопропил-3 ти- OKCO-2H-I, 4 -бензтиазин-4-уксусную кислоту в виде желтых призм. Выход 18,0 г (91,5), температура плавления 175 17баС.

Найдено,%-. С 55,63, Н 5,43; N 4,9

C,bH,5NO«S05

Вычислено,%: С 55,45; Н 5,37; N 4,98.

Пример 9. Получение 8-хлор- -3,4-дигидро-2-изопропил-3 тиоксо- -2Н-1,4-бензтиазин-4-уксусной кислот

Таким же способом, что и в пример 8, из исходного соединения 8-хлор-2 -изопропил-2Н-1,4-бензтиазин-З(4Н)- -она получают 8-хлор 3,4-дигидро-2- -изопропил 3-тиоксо-2Н-1,4-бензтиа- эин-4-уксусную кислоту в виде желтых призм (перекристаллизацией из смеси этанол-вода). Общий выход 63,5%.

Найдено,: С 49,50; Н 4,75; N 494

C.,Hrt ClNO.S

Вычислено,: С 49, Н 4,47 N 4,43.

0

5

0

5

0

5

0

Пример 10. Получение 3,4- -дигидро-2-(1-метилпропил)-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензтиазин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, что и в приме- ре 8, из исходного соединения 2-(1- -метилпропил)-2Н-1,4-бензтиазин-З(4Н) -она (смесь диастереомеров в отношении 1:1 получают 3,-Дигидро-2- (1- -метилпропил)-3 тиоксо-2Н-1,4-бенз- тиазин-А-уксусную кислоту (диастерео- мерная смесь, 1:1) в виде желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир-гексан), температура плавления 137 1380С. Общий выход 43,9%.

НайденоД: С 57,08; Н 5,99, N4,70.

C(4Ht7NCX,S,

Вычислено,%; С 56,92; Н 5,80; N 4,7.

Пример 11 о Получение 8-эток- си-3,4-дигидро-2-изопропил-3 тиоксо- -2Н-1,4-бензоксаэин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 8-эток- си-2-изопропил-2Н-1,4-бензоксазин- -3(4н)-она получают 8-этокси-3,4-ди- гидро-2-изопропил-3 тиоксо-2Н-1,4- -бензоксазин-4-уксусную кислоту в виде желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир-гексан). Температура плавления 138-139°С.

Общий выход 72,4%.

Найдено,: С 58,45; Н 6,23, N4,59.

C,5H19N04S

Вычислено,% С 58,23; Н 6,19, N 4,53.

Пример 12. Получение 8-этил- 3,4-дигидро-2-изопропил-3-тиоксо- -1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 8-этил- -2-изопропил-2Н-1,4-бензоксазин-З(4Н) -она получают 8-этил-3,4-дигидро-2- -ИЗОПРОПИЛ-3-ТИОКСО-2Н-1,4-бензокса- зин-4-уксусную кислоту в виде желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир-гексан).

Температура плавления 117-118°С.

Общий выход составил 73,1%.

Найдено,$: С 61,55, Н 6,55; N4,81.

С,5Н N0,8

вычислено,%: С 61,41; Н 6,53,н4,77.

Пример 13. Получение 3,ДИ- гидро-2-(1-метилпропил)-3 тиоксо-2Н- -1,4 бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 2-(1-ме- тилпролил)-2Н-1,4-бензоксазин-З(4Н)- -она (смесь диастереоизомеров в отношении 1:1) получают 3 4-дигидро-2- -(1-метилпропил) -3 тиоксо-2Н-1 ,4-бенз- оксазин-4-уксусную кислоту (смесь ди- астереомеров 1:1) в виде желтых призм

Таким же способом, что и в при ре 1, из исходного соединения 2-и пропил-6-метокси-2Н-1,4-бензокса -3(4Н)-она получают 3,4-дигидро-изопропил-6-метокси-3 тиоксо-2Н-бензоксазин-4-уксусную кислоту де желтых призм (перекристаллизац из смеси изопропиловый зфир-гекса

(перекристаллизацией из смеси изопро- JQ температура плавления 140-141°С.

лиловый эфир-гексан), температура плавления

Выход 44,8%.

Пример 14. Получение гидро-2-изопропил-6-метил-3 тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, что и в примере 1 , из исходного соединения 2-изо- пропил-6-метил 2Н-1,4-бензоксазин- 3(4Н)-она получают 3 4-дигидро-2- -изопропил-6-метил-3 тиоксо-2Н-1,4- -бензоксазин-4 уксусную кислоту в виде желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир-гексан), температура плавления 144-145°С.

Общий выход 76j7%.

Пример 15. Получение 3 4-ди- гидро-2-изопропил 7 метил-3-тиоксо- -2Н-1,4-бензоксэзин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 2-изо- пропил-7 метил-2Н-1,4-бензоксазин-3 (4Н)-она получают 3 4-дигидро 2-изо- пропил-7-метил-3-тиоксо-2Н 1,4-бензокса зин-4 -уксусную кислоту в виде желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир-гексан),температура плавления 146-147°С.

Общий выход 72,2%.

Пример 16. Получение 7 Фтор- -3,4 дигидро-2-изопропил-3-тиоксо-2М- -1,Ц-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

15

25

30

Общий выход 77,

Пример 18. Получение 8-т -бутил-3,-Дигидро-2-изопропил-3ОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусно кислоты.

Таким же способом, что и в при ре 1, из исходного соединения 8-т -бутил-2-изопропил-2Н-1,4-бензокс зин-3(Н)-она получают 8-трет-бут 20 3,-Дигидро-2-изопропил-3-тиоксо -1,-бензоксазин-А-уксусную кисло в виде светло-желтых призм (перек сталлизацией из изопропилового эф ра), температура плавления 188-18

Общий выход 68,9%.

Пример 19. Получение 8-ц логексил-3,-дигидро-2-изопропил-тиоксо-2Н-1,-бензокса эй н-k-уксу ной кислоты.

Таким же способом, что и в при ре 1, из исходного соединения 8-ц логексил 3,-Дигидро-2-изопропил- -2Н-1,-бензоксазин-З(Н)-она пол чают 8-циклогексил-3,-дигидро-2- изопропил-3 тиоксо-2Н-1,k-бензок зин- -уксусную кислоту в виде све ло-желтых призм (перекристаллизац ей из этанола). Температура плавл ния 16 -165°C./

40

Общий выход 81,7%.

Пример 20. Смесь 3,4-диг ро-2,8-диизопропил-3-тиоксо-2Н-1, -бензоксазин-4-уксусной кислоты (6,14 г), (З)-метилового эфира мо ной кислоты (8,32 г), 4-диметилам нопиридина (1,22 г), дициклогекси карбодиимида (4,9 г) и дихлормет (80 мл) перемешивают при комнатно температуре 18 ч. Осадок отфильтр вывают, а фильтрат концентрируют. таток хроматографируют на силикаг ле (400 г) с использованием в качестве элюента смеси гексан-этило эфир (в отношении 95i5 по объему

35

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 7 Фтор- -2-и зопропил-2Н-1,h-бензокса зи н-3(Н)- она получают 7 фтор-3,-дигидро-2- изопропил-3°тиоксо-2Н-1,4-бензокса- зин- -уксусную кислоту в виде желтых 50 призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир-гексан), температура плавления 113-Н4вС.

Выход 62,k%.

Пример 20. Смесь 3,4-дигид- ро-2,8-диизопропил-3-тиоксо-2Н-1,4- -бензоксазин-4-уксусной кислоты (6,14 г), (З)-метилового эфира молочной кислоты (8,32 г), 4-диметилами- нопиридина (1,22 г), дициклогексил- карбодиимида (4,9 г) и дихлорметана (80 мл) перемешивают при комнатной температуре 18 ч. Осадок отфильтровывают, а фильтрат концентрируют. Остаток хроматографируют на силикаге- ле (400 г) с использованием в качестве элюента смеси гексан-этиловый эфир (в отношении 95i5 по объему)

Пример 17. Получение 4, и получают два соединения: (З)-метиТидро-2-изопропил-6-метокси-3-тиок-СО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

новый эфир2- Ј(R)-3,4- дигидро-2,8-ди- изопропил-3-тиоксо-2Н-1,4-бензокса- зин-4-ил ацетоксипропионовой кислоты

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 2-изо- пропил-6-метокси-2Н-1,4-бензоксазин- -3(4Н)-она получают 3,4-дигидро2- -изопропил-6-метокси-3 тиоксо-2Н-1,4- -бензоксазин-4-уксусную кислоту в ви- де желтых призм (перекристаллизацией из смеси изопропиловый зфир-гексан),

температура плавления 140-141°С.

5

5

0

0

Общий выход 77,

Пример 18. Получение 8-трет- -бутил-3,-Дигидро-2-изопропил-3ти- ОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 8-трет- -бутил-2-изопропил-2Н-1,4-бензокса зин-3(Н)-она получают 8-трет-бутил- 0 3,-Дигидро-2-изопропил-3-тиоксо-2Н- -1,-бензоксазин-А-уксусную кислоту в виде светло-желтых призм (перекристаллизацией из изопропилового эфира), температура плавления 188-189°С,

Общий выход 68,9%.

Пример 19. Получение 8-цик- логексил-3,-дигидро-2-изопропил3- -тиоксо-2Н-1,-бензокса эй н-k-уксус- ной кислоты.

Таким же способом, что и в примере 1, из исходного соединения 8-цик- логексил 3,-Дигидро-2-изопропил- -2Н-1,-бензоксазин-З(Н)-она получают 8-циклогексил-3,-дигидро-2- изопропил-3 тиоксо-2Н-1,k-бензокса- зин- -уксусную кислоту в виде светло-желтых призм (перекристаллизацией из этанола). Температура плавления 16 -165°C./

0

Общий выход 81,7%.

Пример 20. Смесь 3,4-дигид- ро-2,8-диизопропил-3-тиоксо-2Н-1,4- -бензоксазин-4-уксусной кислоты (6,14 г), (З)-метилового эфира молочной кислоты (8,32 г), 4-диметилами- нопиридина (1,22 г), дициклогексил- карбодиимида (4,9 г) и дихлорметана (80 мл) перемешивают при комнатной температуре 18 ч. Осадок отфильтровывают, а фильтрат концентрируют. Остаток хроматографируют на силикаге- ле (400 г) с использованием в качестве элюента смеси гексан-этиловый эфир (в отношении 95i5 по объему)

5

и получают два соединения: (З)-метиновый эфир2- Ј(R)-3,4- дигидро-2,8-ди- изопропил-3-тиоксо-2Н-1,4-бензокса- зин-4-ил ацетоксипропионовой кислоты

в виде масла,

11 выход

1538895

1,55 г +

10

20

25

б1,2°(с 0,35, метанол). D

Спектр ЯМР (СДС1з) S : 0,97 (ЗН, , I 7,5 Гц), 1,07 (ЗН, д, ,5 Гц) 1,20 (ЗН, д, ,5 Гц), 1,27 (ЗН, д, ,5 Гц), 1,55 (ЗН, д., ,5 Гц), 2,35 (1Н, секстет, ,5 Гц), 3,43 (1Н, квинтет, ,5 Гц), 3,77 (ЗН, с), ,73 ОН, д, Гц), 4,87 (1Н, д, ,5 Гц), 5,23 (1Н, кв., ,5 Гц), 5,93 (1Н, д, Гц), 6,71-7,08 (ЗН, мультиплет) и (S)-метиловый эфир 2- С(3)-3,4-дигидро-2,8-диизопропил-3- -ТИОКСО-2Н-1-, 4-бензоксазин-4-ил аце-

токсипропионовой кислоты в виде маса. Выход 1,2 г leUj1-5- 78° (,4, метанол) .

Спектр ЯМР (СДС1)Ј: 0,98 (ЗН, д, ,5 Гц), 1,05 (ЗН, д, ,5 Гц), 1,18 (ЗН, д, ,5 Гц), 1,30 (ЗН,д, ,5 Гц),1,48 (ЗН, д, ,5 Гц), 2,45 (1Н, секстет, ,5 Гц), 3,25- 3,58 (1Н, м), 3,73 (ЗН, с), 4,7 (1Н, д, ,5 Гц), 5,00 (1Н, д, Гц), 5,18 (1Н, кв., ,5 Гц), 5,60 (1И, д, Гц), 6,73-7,05 (ЗН, м).

Пример 21. Получение (R)- (+)-3,4-дигидро-2,8-диизопропил- -3-ТИОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксус ной кислоты.

Перемешиваемый раствор (S)-метилового эфира 2-(К)-3,4-дигидро-2,8- -диизопропил-3-тиоксо-2Н-1,4-бемзок- сазин-4-ил1-ацетоксипропионовой кислоты в смеси диоксана (10 мл) и метанола (10 мл) обрабаты- вают 2 н. гидроокисью натрия (10 мл) при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь подкисляют хлористоводородной кислотой,, разбав™ ляют водой и экстрагируют этилацета- гом. Этилацетатный слой промывают водой, сушат над сернокислым магнием и концентрируют. Остаток обрабатывают гексаном и получают 0,12 г кристаллов (1)3 4-дигидро 2,8-диизо пропил-3-тиоксо-2Н-1,4-бензокса зин -4-уксусной кислоты, которая образуется в результате слабой рацемизации продукта. Маточный раствор концентрируют, а остаток растворяют в гекса- не.Если раствор выдерживают,то получают (К)-(+)-3,4-дигидро-2,8 Диизо пропил-3-тиоксо-2Н-1,4-бензоксазин- -4-уксусную кислоту в виде кристаллов (0,55 г), температура плавления 110С с

пз ( пл

35

40

55

11ГС, нол).

f

107,2 (с 0,45, мета30 п ( п 1 (

50

12

0

0

5

НайденоД: С 62,79; Н 6,99; N4,52,

Вычислено,%: С 62,51, Н 6,89, N 4,56.

Пример 22. Получение ,(S)-(- ) ,4-дигидро-2,8-диизопропил-3-тиок- СО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты.

(З)-метиловый эфир 2-(S)-3,4- дигидро-2,8-диизопропил-3-тиоксо 2Н-1,4-бензоксазин-Ц-ил ацетокси- пропионовой кислоты (1,1 г) гидроли- зуют и обрабатывают таким же спосо- юом, что и в примере 21, и получают (8)-(-)-3,4-дигидро-2,8-диизопропил- 3-ТИОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксус- ную кислоту (0,53 г), температура плавления 109-110°С./ /го-105а (с . 0,48, метанол).

Найдено,% С 62,86; Н 6,935 N4,55,

C 6H2iN03S

Вычислено,%: С 62,51, Н 6,89, N 4,56.

Пример

5

0

5

23. Получение (S)- -(-)-3,4-дигидро-2,8-диизопропил-3 -ТИОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксус- ной кислоты.

(1) К раствору (5)-2,8-диизопро- 0 пил-2Н-1,4-бензоксазин 3-(4Н)-она (4,66 г) в диметилформамиде (60 мл) по частям добавляют 60%-ный гидрид натрия в масле (0,84 г). Смесь перемешивают при комнатной температуре 10 мин и в нее добавляют раствор метилового эфира бромуксусной кислоты (2,0 мл) в диметилформамиде (6,0 мл). Реакционную массу перемешивают при комнатной температуре 30 мин, разбавляют водой и экстрагируют этил- ацетатом. Этилацетатный слой промывают водой, сушат (сернокислым магнием) и концентрируют. Остаток кристаллизуют из гексана и получают (S)- -метиловый эфир 3 4-дигидро-2,8-ди- изопропил-3-оксо-2Н-1,4-бензоксазин- -4-уксусной кислоты в виде кристаллов (4,95 г). Перекристаллизация из гексана дает бесцветные иглы, тем0

пература плавления 67-68°С +

Г

D

+ з,7° (с 0.95, метанол).

Найдено,%: С 66,90; Н 7,69; N4,56,

Ct H2iN04

Вычислено,%: С 66,86; Н 7,59; N 4,59.

(2) Смесь (З)-метилового эфира 3,4-дигидро-2,8-диизопропил-3-оксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты (3,05 г), 2,4-бис(метилтио)-1,3,2,4-дитиадифосфетан-2,4-бисуль- фида (метиловый реактив Дэви) (2,84 г) и толуола (60 мл) перемешивают при 50°С в течение 6k ч. Нерастворимое вещество отфильтровывают, а фильтрат концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (100 г) с использованием смеси гексан-этиловый эфир (в отношении 85:15 по объему) в качестве подвижной фазы и получают (S)-метиловый эфир 3,4-дигидро-2,8-диизопропил-3- -ТИОКСО-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной

10

16,5 Гц), 6,87-7,07 (ЗН, мульти- плет).

Пример 26. Метиловый эфир 3,4-дигидро-2,8-диизопропил-3 тиоксо -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кисло ты (4,75 г) гидролизуют 2 н. NaOH (15,5 мл) в условиях, приведенных в табл. 1, с получением 3,4-дигидро- -2,8-диизопропил-3-тиоксо-2Н-1, 4- бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Зависимость выхода от условий про ведения синтеза приведена в табл.1.

кислоты в виде масла (3,00 г).

(3) Полученное на стадии (2) масло растворяют в смеси диоксана (9мл) и метанола (9 мл) и в раствор добавляют 2 н. гидроокись натрия (9,3 мл).

15

Результаты биологических испытаний.

1 . Ингибирование альдозоредуктазы (исследование in vitro).

Частично очищенную альдозоредук- Смесь перемешивают при комнатной тем- 20 тазу плаценты человека использовали пературе 45 мин, разбавляют водой,для определения эффекта ингибироваподкисляют хлористоводородной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Этил- ацетатный слой промывают водой, сушат (MgSOjj) и концентрируют. Остаток 25 центах ингибирования, представлены

ния альдозоредуктазы. Ингибирующие активности каждого соединения при и при 10 М, выраженные в прообрабатывают гексаном и получают ра- цемизированное соединение (+)-3,4- -дигидро-2,8-диизопропил-3 тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусную кислоту (0,8 г). Маточный раствор концент- 30 рируют, остаток кристаллизуют из гек- сана и получают (5)-(-)-3,4-дигидро- -2,8-диизопропил-3 тиоксо-2Н-1,4-бeнз- oкcaзин-4-yкcycнyю кислоту (1,28 г, 41,7%), температура плавления 109 .

101,1° (с 0,71, метанол).

Пример 25. Получение соли щелочного металла целевого продукта.

К раствору 3,4-дигидро-2,8-диизо- пропил-3-ТИОКСО-2Н-1,4-бензокса зи н- -4-уксусной кислоты (307 мг) в СН3ОН (2,0 мл) добавляют NaOCH3 (28% в СН3, 1,8 мл), после чего растворитель удаляют выпариванием. Полученный таким образом остаток обрабатывают (СгН5)гО с образованием 3,4-дигидро- -2,8-диизопропил 3-тиоксо-2Н-1,4- -бензоксазин-4-ацетата натрия в виде бледно-желтых кристаллов (253 мг,

35

40

45

7б,9%). Температура плавления 250- 254°С.

Спектр ЯМР (ДМСО-о): 0,90 (ЗН, Гц), 1,05 (ЗН, дублет, 1 6 Гц), 1,13 (ЗН, дублет, Гц), 1,22 (ЗН, дублет, Гц), 2,30 (1Н, секстет, Гц), 3,33 (1Н, квинтет, Гц, 4,45 (1Н, дублет, ,5 Гц), 4,71 (ТН, Гц), 5,18 (1Н, дублет, I50

55

в табл. 20

2. Ингибирование накопления сорбита в тканях у крыс с экспериментально вызванным диабетом.

Крыс линии Spraque-Dawley содержали на голодной диете 18 ч (самцы в возрасте недель, по пяти зверьков в группе), после чего они получали инъекцию 70 мг/кг стрептозоцина в каудальную вену под анестезией эфиром и таким образом получали крыс, больных диабетом. Сразу же после инъекции стрептозоцина эти крысы получали перорально испытуемое соединение из расчета 50 мг/кг и 30 мг/кг в форме 5%-ной суспензии аравийской камеди два раза в день (в 10 ч утра и в 5 ч вечера) в течение двух дней. В это время крысы получали СЕ-2 диету и воду по потребности. На третий день утром (в 9 ч утра) крыс умерщвляли (обезглавливание и венесекция) и тотчас изолировали седалищные нервы, из которых экстрагировали сорбит. Результаты выражены в процентах от значения для необрабо- (танной контрольной группы, принятого за 100%, и показаны в табл 2.

Как показано в табл. 2, полученные соединения оказались одинаково эффективными или даже несколько менее эффективными в ингибировании альдозоредуктазы in vitro, чем контрольные соединения, однако их ингибиру

16,5 Гц), 6,87-7,07 (ЗН, мульти- плет).

Пример 26. Метиловый эфир 3,4-дигидро-2,8-диизопропил-3 тиоксо- -2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусной кислоты (4,75 г) гидролизуют 2 н. NaOH (15,5 мл) в условиях, приведенных в табл. 1, с получением 3,4-дигидро- -2,8-диизопропил-3-тиоксо-2Н-1, 4- бензоксазин-4-уксусной кислоты.

Зависимость выхода от условий проведения синтеза приведена в табл.1.

15

центах ингибирования, представлены

ния альдозоредуктазы. Ингибирующие активности каждого соединения при и при 10 М, выраженные в про30

35

40

5

0

5

в табл. 20

2. Ингибирование накопления сорбита в тканях у крыс с экспериментально вызванным диабетом.

Крыс линии Spraque-Dawley содержали на голодной диете 18 ч (самцы в возрасте недель, по пяти зверьков в группе), после чего они получали инъекцию 70 мг/кг стрептозоцина в каудальную вену под анестезией эфиром и таким образом получали крыс, больных диабетом. Сразу же после инъекции стрептозоцина эти крысы получали перорально испытуемое соединение из расчета 50 мг/кг и 30 мг/кг в форме 5%-ной суспензии аравийской камеди два раза в день (в 10 ч утра и в 5 ч вечера) в течение двух дней. В это время крысы получали СЕ-2 диету и воду по потребности. На третий день утром (в 9 ч утра) крыс умерщвляли (обезглавливание и венесекция) и тотчас изолировали седалищные нервы, из которых экстрагировали сорбит. Результаты выражены в процентах от значения для необрабо- (танной контрольной группы, принятого за 100%, и показаны в табл 2.

Как показано в табл. 2, полученные соединения оказались одинаково эффективными или даже несколько менее эффективными в ингибировании альдозоредуктазы in vitro, чем контрольные соединения, однако их ингибирующая активность накопления сорбита in vivo превосходила активность инги- бирования накопления сорбита контрольными соединениями. Различие становится особенно очевидным, если сравнить соединение 2 с соединением А, и соединения 9 и 11 с соединениями В и С, являющимися парными соединениями,, у которых имеются сравнимые заместители. Лечение больных диабетом обычно требует длительного периода и поэтому следует ожидать, что соединения согласно изобретению, проявляющие блестящий эффект в малых дозах, вляются полезными в качестве лекарственных средств.

3. Ингибирующее действие на агрегацию тромбоцитов.

Влияние 3 -дигидро 2,8 диизопро- пил 3 тиоксо-2Н-1,h-бензоксазин-4-уксусной кислоты на агрегацию тромбоцитов испытывали с использованием промытых кровяных пластинок крыс.

(1) Методы.

Кровь крыс отбирали в пластиковый шприц, заполненный на одну десятую объема 3,8%-ным лимонокислым натрием, из брюшной аорты 6-7 недельных самцср крыс линии Spraque Dawley под общич наркозом. Богатую тромбоцитами плазму получали центрифугированием крови при 150 х оборотах в течение 15 мин при комнатной температуре. Чтобы при готовить промытые тромбоциты, богатую тромбоцитами плазму центрифугировали при 1500 Ј у оборотах в течение 10 мин, а осажденные кровяные пластинки ресуспендировали в растворе Тирода. Количество тромбоцитов, использованных в эксперименте, составляло 7x10 клеток/мм4. Агрегацию тромбоцитов измеряли нефеломегричес- ким методом с использованием агре- гометра (Nikko Bioscience модели PAR-4M).

Испытуемое соединение растворяли в 10 мкл воды и добавляли к 250 мкл суспензии чистых тромбоцитов и инкубировали при 37°С три минуты, после чего добавляли 10 мкл агрегирующего средства (5ГОЮ мкл/мл коллагена, Nikk Bioscience, или 10 мкмоль аденозинди- фосфата (АДФ)5 Shigma, Ts Louis, Mo при конечной концентрации). Процент ингибирования агрегации тромбоцитов испытуемым соединением вычисляли де лением полученного значения агрега0

5

0

5

0

5

ции на величину, наблюдаемую в контрольной серии, и умноженную на 100.

(2) Результаты.

Испытуемое соединение ингибиро- вало агрегацию чистых тромбоцитов, обусловленную либо коллагеном, или аденозиндифосфатом в зависимости от дозы (табл.,3). Его ингибирующее действие было более сильным, чем действие индометацина в ингибировании вызва ной аденозиндифосфатом агрегации тромбоцитов.

I Изучение ингибирующего действия на агрегацию тромбоцитов приведено в табл. 3k. Острая токсичность.

Острую токсичность 3,-дигидро- -2,8-диизопропил-3 тиоксо-2Н-1 , J}- -бeнзQKcaзин- -yкcycнoй кислоты испытывали на мышах и крысах.

(1)Методы.

Различные дозы испытываемого сое динения, суспендированного в 5% растворе аравийской камеди, вводили п%- рорально самцам мышей линии 1CR (в возрасте k недель) и самцам крыс линии Вистар (в возрасте 5 недель) и наблюдали смертность в течение 14 дней. Каждая группа насчитывала 5 зверьков.t

(2)Результаты.

Летальная доза ЛДеоДля мышей i860 мг/кг, для крыс 2830 мг/кг.

Таким образом, полученные соединения малотоксичны и обладают высокой активностью ингибирования альдо- зоредуктазы и агрегации тромбоцитов.

Формула изобретения

Способ получения производных ти- олактам-К-уксусной кислоты общей формулы

ч

S

где X - атом кислорода или серы} R, - атом водорода или галогена, С1-С4-алкил, С ,-С2-алкокси- группа или циклогексил; R,- в 6- или 7 положенни бензольного кольца и означает атом водорода или галогена, метил или метоксигруппу, причем

17

R, и Лг не могут иметь одновременно значения, отличные от атома водорода; R3 - атом водорода или метил, или их солей с щелочными металлами, отлича ющи йся тем, что, соединение общей формулы

1538

ЧЧу. СН2СООЯ

X, R,, R2 и Кг имеют указанные

значения;

R4 - низший ал кил, свободный или замещенный низшей карбал- коксигруппой,

ое, сои

53889518

подвергают щелочному гидролизу в среде растворителя такого, как метанол, этанол, пропанол, 2-пропанол, 2-ме- токсиэтанол, диоксан, тетрагидрофу- ран, диметоксиэтан, ацетонитрил или ацетон, при 10-60 С с последующей, если необходимо, обработкой реакционной смеси минеральной или карбоновой

tO кислотой и целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде его соли с щелочным металлом.

Приоритет по признакам: 17.0.86 при R, - циклогексил, X,

15 RЈ и кз имеют указанные значения.

20.06.86 при R, - атом водорода или галогена, С, -С 4- -а л кил, алкоксигруппа; X, R имеют указанные значения.

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к способу получения производных тиолактам-N-уксусной кислоты или их солей с щелочными металлами общей ф-лы: @ , где X=0 или S, R₁=H, галоген, C₁-C₄-алкил, C₁-C₂-алкоксигруппа, циклогесил, R₂=H, галоген, CH₃-, CH₃O, причем R₁ и R₂ не могут одновременно иметь значения, отличные от атома водорода, R₃=H₂CH₃, которые способны ингибировать альдоредуктазу и агрегировать тромбоциты, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут щелочным гидролизом R₄-эфира тиолактам-N-уксусной кислоты, где R₄ - низший алкил, свободный или замещенный низшей карбалкоксигруппой, в среде растворителя метанол, этанол, пропанол, 2-пропанол, 2-метоксиэтанол, диоксан, тетрагидрофуран, диметоксиэтан, ацетонитрил или ацетон при 10-60°С. В случае необходимости реакционную смесь обрабатывают минеральной или карбоновой кислотой и выделяют целевой продукт в свободном виде или в виде нужной соли. Новые соединения малотоксичны LD₅₀*981000 мг/кг и обладают активностью, лучшей, чем у индометацина, при ингибировании вызванной аденозиндифофатом агрегации тромбоцитов, а также при ингибировании альдозоредуктазы, что может быт

Таблица 1

Примечание:

1)критерий Стыодента:

х р « 0,05

к р 0,02

р 0,01

ПЛ1

р 0,001

2)А - 6-фтор 3,-дигидро-3-тиоксо-2Н-1,4-бензоксазин-4-уксусная кислота В - 3 -Дигидро-3-тиоксо-2Н-1 -бензтиазин- -уксусная кислота

С - 3,-Дигидро-2-метил 3-тиоксо 2Н-1,4-бензтиазин- -уксусная кислота.

Таблица 3

Таблица 2