Способ получения производных 6-метиленандроста-1,4-диен-3,17-диона Советский патент 1990 года по МПК C07J1/00 

ы

Изобретение касается стероидных замещенных, в частности получения производных 6-метиленандроста-1,4-диен-3,17-диона общей фор-лы I, где R₁-H или C₁-C₄-алкил, R₂-C₁-C₄-алкил, которые обладают способностью ингибировать ароматазу, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут дегидрированием соединения ф-лы II с помощью дегидрирующего агента в среде органического растворителя (диоксана) при кипении. Новые вещества пригодны для лечения и профилактики различных эстрогензависимых заболеваний, т.е. эндометриального, яичкового и панкреатического рака молочной железы, гинекомастии, эндрометриоза, преждевременного полового созревания, мужского бесплодия, ассоциируемого с олигоспермией, и др. Токсичность LD₅₀*98800 мг/кг. Ингибирование ароматазы при 30 мг/кг составляет 23-71% против 7% для 4-гидрокси-4-ен-3,17-диона. 1 табл.

Изобретение относится к способу получения новых производных 6 метиленандроста-1,4-диен-З,17-диона общей формулы

Ri

О

.

где R,, - водород или алкил;

Ra - С -С -алкил,

обладающих фармакологическими свойствами.

Цель изобретения - получение новых производных андроста-1,4-диен 3,17-диона, обладающих способностью в большей степени ингибировать аро- матозу в сравнении с известными структурными аналогами.

Пример 1. Смесь ацетата натрия (l г), хлороформа (30 мл), формальдегида диэтилового ацеталя (30 мл, 0,24 моль), хлорида фосфори- ла (3,8 мл, 0,04 моль) и 1 , 7оЈ-ди метиландрост-4 ен-3,17-дион (0,849 гэ 2,7 ммоль) перемешивают при температуре кипения в течение 5 ч, т.е. до исчезновения исходного вещества. Суспензию охлаждают и при интенсивном перемешивании добавляют по каплям насыщенный раствор карбоната натрия до тех пор пока рН водного слоя не стал щелочным. Отделяют органический слой, промывают до нейтральности и высушивают сульфатом натрия. После концентрации при пониженном давлении очищают маслянистый остаток силикаге- левой хроматографией с использованием смеси гексана и этилацетата в качестве элюента. Таким образом, получают чистый 1/3,7сЈ-диметшт 6-метиленандрост- 4-ен-3,1 7-дион с 60% выходом (0,530 г/

0,530 г 1Ј, 7о(-диметшт-6-метилен- андрост-4-ен-З,17-диона и 0,59 г ди- хлордицианбензохинона нагревают с обратным холодильником в 20 мл безводного диоксана. около 15 ч. Реагирующую смесь фильтруют, удаляют в вакууме растворитель, остаток раство- ряют в этилацетате, органический слой промывают водой, высушивают над сульфатом натрия и растворитель выпаривают в вакууме. Сырой продукт подвергают силикагелевой хроматографии с использованием 40% смеси гексана и этилацетата в качестве элюента, что дает 0,42 г чистого 1 , 7с -диметил-6- метиленандроста-1,4-диен-З,17-диона.

5

0

5

0

Q

5

0

5

5

Найдено,%: С 81,35; Н 38,09.

Сеа Н е80г

Вычислено,%: С 81, 44; Н 28,22.

ЯМР , млн.д.: 0,90 (ЗН.д); 0,93 (ЗН,с); 1,15 (ЗН,с); 2,3 (ЗН, шир.с)) 4,98 (2Н,м); 6,10 (1Н,д); 6,25 ( 1Н,д); 7,10 (1Н,д).

ИК-спектр, (КВг), 3080(-СНй); 1730 (17-оксо); 1650 (3-оксо), 1620, 1590 (сопряжение: двойные связи).

Масс-спектр (m/Z) 324.

В соответствии с описанной методикой и начиная с соответствующего соединения, можно получить 7-метил-6- метиленандроста-1,4-диен-З,17-дион.

ЯМРЈ, млн.д.: 0,91 (ЗН,д); 0,94 (ЗН,с); 1,16 (ЗН,с);,4,97 (2Н,м); 6,14 (1Н,д); 6,27 (1Н,д); 7,08 (1Н,д). I

ИК-спектр, (КВг), см 1 : 3070 (CHt); 1735 (17-оксо); 1655 (3-оксо);.1625, 1595 (сопряжение: двойные связи). Масс-спектр 330. Пример 2. Таблетки каждая весом по 0,150 г и содержащая 25 мг активного вещества производят следующим образом.

Состав (для 10000 таблеток), г: 7о(-Метш1-6 метилен- андроста-1,4-диен- 3,17-дион252

Лактоза800

Кукурузный крахмал 415 Порошок талька30

Стеарат магния5

Смешивают 7о(-метил-6-метиленанд- роста-1,4-диен-З,17-дион, лактозу, половину кукурузного крахмала, Смесь пропускают через сито размером 0,5 мм меш. Кукурузный крахмал (10 г) суспендируют в теплой воде (90 мл), и полученную пасту используют для гранулирования порошка. Гранулйт высушивают, дробят на сите с размером 1,4 мм меш, затем добавляют оставшееся количество крахмала, талька и стеарата магния, тщательно перемешивают и изготавливают таблетки.

Приме р 3. Капсулы каждая по 0,2000 г и содержащая 20 мг активного вещества получают следующим образом.

Состав для 500 капсул, г: 7о(-Ме тил- 6-метиле н- андроста-1,4-диен-З,17- дион О

Лактоза80

Кукурузный крахмал 5

Стеарат магния5

Этот состав заключают в капсулу, состоящую из двух твердых желатиновых капсул с дозой по 0,200 г каждая капсула.

Предлагаемые соединения являются ингибиторами биотрансформации мужских половых гормонов в фолликулин, т.е. они являются стероидными ингибиторами ароматазы.

Ингибирование ароматазы предлагаемыми соединениями определяли, например, in vivo (активность яичниковой ароматаэы) на крысах. Активность предлагаемых соединений: 7-метил-6- метиленандроста-1,4-диен-1,17-дион и 1,3Ј-диметил-6-метиленандроста-1,4- диен-1,17-дион, сравнивают с активностью хорошо известного ингибитора ароматазы, 4-гидроксиандрост-4-ен 3,17-дион и с активностью 7оЈ-метил- 6-метилен-1,2 -циклопропаноандрост- 4-ен-3,17-дион в соответствии со еле дующей методикой.

Взрослых самок крыс дважды обра- атывали подкожно с применением 100 международных единиц гонадотропина сыворотки беременной кобылы (PMSG) при 4-дневном интервале для того, чтобы повысить активность яичниковой ароматазы в соответствии с методикой Brodie. Через три дня после второй обработки PMSG группам из 6 животных в каждой вводили перорально носитель (0,5% метилцеллюлоза) или ингибитор в количестве 30 мг/кг. Животных убивали через 24 ч, микросомы выделяли из яичников и их ароматаза активность определялась с использованием метода, аналогичного описанному

Инкубации осуществляли в течение 30 мин в 1 мл инкубационного объема, содержащего 0,1 мг микросомных белков, 100 нМ 4- 4Н андростендиона и 100 мкМ WADPH. Затем вычисляли % ингибирования контрольной ароматаза- активности.

Ингибирование ароматазы яичника крыс in vivo показано в таблице.

В силу их способности ингибиро- вать ароматазу и, следовательно, снижать уровни эстрогена, новые соединения пригодны в лечении и предупреждении различных эстроген-зависимых болезней, т.е. эндометриально- го, яичникового и панкреатического раков молочной железы, гинекомастии,

10

15

20

25

5494856

доброкачественной опухоли молочной железы, эндометриоза, поликистозной яичниковой болезни и преждевременного полового созревания. Другим применением предлагаемых соединений является терапевтическое и/или профилактическое лечение простатической гиперплазии, болезни эстроген-зависимой ткани стромы. Новые соединения могут также найти использование для . лечения мужского бесплодия, ассоциируемого с олигоспермией, и для регулирования женской фертильности, в силу их способности ингибировать овуляцию и нидацию яйцеклетки.

В свете их высокого терапевтического индекса предлагаемые соединения могут использоваться безопасно в медицине. Например, приблизительная острая токсичность (LDjo ) предлагаемых соединений у мыши, определенная однократным введением возрастающих дозировок и измеренная на седьмой день после лечения, составляет, незначительную величину.

Например, значение LD50 для предлагаемых соединений: 7-метил-6-мети- лен-1 ,4-диен-3,1 7-дион- и 1, 7о(-диме- тил-6-метилен-1,4-диен-З,17-дион составляет выше 800 мг/кг при перораль- ном введении мыши.

30

Формула изобретенияСпособ получения производных 6- метиленандроста-1,4-диен-З,17-диона общей формулы

И, Ш °

где R,, - водород или С -С -алкил;

RO. - С,-С -алкил, отличающийся тем, что проводят дегидрирование соединения общей формулы

Rl

где R и Ra имеют указанные значения, обработкой дегидрирующим агентом в орСоединение

4-Гидрок сиандро ст4-ен-З,17-дион7

7аС-Метил-6-метилен1,2 -циклопропанандрост-4-ен-З,17дион23

7-Метил-6-метилен1,4-диен-З,I7-дион 71

1, 7р(-Диметил-6-метилен-1,4-диен-З,17дион40

ганическом растворителе при температуре дефлегмации.

Ингибирова- ние аромата- зы при 30 мг/кг, перорально,