Способ получения замещенных андроста - 1,4-диен-3,17-дионов Советский патент 1989 года по МПК C07J1/00 

Изобретение относится к способу получения новых стероидных производ- ньк, а именно замещенных андроста- -1,4-диен-З,17-дионОв.общей формулы

R, СИ,

где R, - галоген,

которые, помимо сильного ингибирующего действия на ароматазу в лаборат орных условиях, обладают также высокой эффективностью действия в живом организме по сравнению с известными структурными аналогами.

Цель изобретения - получение новых стероидных производных ряда ан- дростана, обладающих преимуществами в фармакологическом отношении перед известными соединениями подобной структуры.

Пример 1. а). Раствор 4,5- -эпокси-6-метиленандрост-1-ен-3,17- -диона (1,0 г) в ледяной уксусной кислоте (10 мп) обрабатывают газообю со

см

3130

разн1,1М хлористым водородом в течение 30 мин при . Осадок отделяют- фильтрацией, промывают диэтиловым простым эфиром, сушат и подвергают хроматографии на силикагеле, используя смесь гексан-этилацетат с тем, чтобы получить в результате 0,8 г чистого А-хлор-6-метиленандроста- -1,4-диен-З, 1 7--диона, т.пл. 148-150 Г

Найдено, %: С 72,40; Н 6,91 С1 10,53.

С,Н,,

Вычислено, %: С 72,61; Н 7,01, С1 10,72.

ЯМР S , долей на миллион; 0,84 (ЗН, синглет), 1,24 (ЗН, синглет)I 5,13 (1Н, синглет); 5,43 (1Н, синглет); 6,37 (1Н, дублет); 7,08 (1Н, дублет) .

МС (M/Z): 330.

в) Следуя описанной процедуре и исходя из соответствующего 4,5-эпокс производного и используя соответствующую галоидоводородную кислоту, были получены соединения 4-бром-6-метилен андроста-1,4-диен-З,17-диона.

Найдено, %:С 63,90; Н 6,03; Вг 21,15.

.

Вычислено, Z: С 64,00; Н 6,18; Вг 21,29.

Пример 2. Раствор 4,5-эпок- си-6-метиленавдрост-1-ен-3,17-диона (1,0 г) в диэтиловом простом эфире (100 мп) обрабатывают трифторидом этерата бора (1,4 мп) в течение 3 ч при 0°С. Затем раствор промывают 5%-ным раствором карбоната натрия, водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают под вакуумом. Остаток растворяют в пиридине (20 кп) и при О добавляют 0,4 мл тионил хлорида. Спустя 5 мин добавляют воду и продукт изолируют при помощи простого эфира. Эфирные экстракты промывают 2N раствором хлористоводородной кислоты, водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают. Полученный в результате неочищенный продукт подвергают хроматографии на силикагеле, используя смесь гексан-зтилацетат в качестве элюента, в результате чего получают 0,6 г чистого 4-фтор-6-метиленандрос та - 1,4-диен-З,17-диона.

Найдено, %: С 76,30; Н 7,35;

F 5,91;

5

0

5 0

0

5

Выстелено, Z: С 76,40/ Н 7,37; F 6,04.

И р и м е р 3. 6-Метиленандрост- -4-ен-З,17-дион (5 г) растворяют в 200 мл метанола и охлаждают до 0°С. Затем добавляют охлажденную льдом

36% HjO (17 мл) и 2% NaOH (9 нп). Смесь перемеишвают 1 ч, затем выдерживают при в течение 20 ч и сливают в 1400 мл ледяной воды при энергичном перемешивании, продукт отделяют фильтрацией, промывают водой и сушат, в результате чего получают 4,2 г (80%) 4,5-эпокси-6-ме- тилендроста-3 , 17-диона/ oi М-эпоксид- ной смесиД;

ЯМРS , долей на миллион: 0,90 (ЗН, синглет); 0,97 (ЗН, синглет), 3,52 (1Н, синглет); 4,92 (1Н, пшрокий), 5,06 (1Н, широкий).

4,5-Эпокси-6-метиленандроста-3,17- -дион (3 г) и дихлордицианобензо- хинон (1,7 г) растворяют в 60 мл безводного диоксана и нагревают до температуры дефлегмации в течение 15 ч. Охлажденный раствор фильтруют через окись алюминия и растворитель выпаривают под вакуумом. Остаток переносят в этилацетат, органический слой промывают водой, сушат и растворитель удаляют под вакуумом. Неочищенный продукт подвергают хроматографии на силикагеле, используя смесь гекса- ацетат 10-40% с тем, чтобы получить в результате 1,5 г чистого 4,5-эпок- си-6-метиленандрост-1-ен-3,17-диона.

ЯМР 8 , долей на миллион: 0,93 (ЗН, синглет); 1,13 (ЗН, синглет); 3,71 (1Н, дублет); 5,03 (2Н, мульти- плет); 5,86 (1Н, дублет); 6,78 (1Н,

дублет).

)

Ингибирование ароматазы в живом организме - на крысах (in vivo).

Взрослых самок крысы дважды обрабатывали подкожным способом при по- моши 100 м.е. гонадотропного гормона сыворотки беременных лошадей (ГСБЛ) с интервалом в 4 дн. с тем, чтобы увеличить активность ароматазы яичников в соответствии с процедурой, описанной в прототипе. Через 3 дн.после второй обработки при помощи ГСБЛ группам по 6 животных в каждой давали стоматическим способом растворитель (0,5%-ный метосел) или ингибитор в концентрации 30 мг/кг. Животных усыпляли, спустя 24 ч микросомы извлекали из яичников и их активность

15

ароматазы определяли с использованием приема, аналогичного тому, что бы описан в а .

Инкубацию осуществляли в течение 30 мин в 1 мл объема инкубации, содержащем О, 1 мг микросомальных протеинов, 100 нМ 4-(Зн) андростендиона и 100 UM NADRH. Ингибирование в процентах активности контролируемой аро матазы рассчитывали на основе полученных данных.

Результаты ингибирования ароматазы человеческой плаценты в лабораторных условиях и ароматазы яичников крысы в живом организме приведены в таблице.

Из таблицы видно, что новое соединение 4-хлор-6-метилвнандроста-1,4- -диен-3,17-дион (FCE 24919) является очень сильным ингибитором ароматазы как при испытании в лабораторных условиях, так и при испытании на живом организме.

При оральном испытании in vivo новое соединение было очень эффективным, что являлось следствием его уникальной стойкости относительно эпа- тического обмена веществ в то время, как соединение 4-ОН-А оказывалось неэффективным.

Основным недостатком терапевтического использования соединения 4-ОН-А в качестве противоопухолевого агента при лечении женщин является необходимость его парентерального применения, так как зто соединение очень интенсивно разлагается после стоматического применения

5

0

Ввиду высокого терапевтического показателя, предложенные соединения можно без опасений применять в медицинских целях. Например, приблизительная острая токсичность () этих соединений при применении к MI.I- шам, определенная в результате разового применения возрастающих доз

|И измеренная на 7-й день после применения, оказалась пренебрежимо

малой. Например, значение LD $(, для описанного соединения (FCE 24919) выше, чем 800 мг/кг при оральном применении на людях.

Формула изобретения

1 . Способ получения замещенных андроста-1,4-диен-З,17-дионов общей формулы

tlljO

«1,Г5

25

И, СИ

2

где R, - галоген, отличающийс единение формулы

тем, что cor

О

35

подвергают взаимодействию с гидрога- логенирующим агентом в среде органи- 4п ческого растворителя при 0-() С.

Изобретение касается стероидных производных , в частности, получения 4-галогензамещенных андроста-1,4-диен-3,17-дионов - биологически активных стероидов. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут обработкой 4,5-эпокси-6-метиленандрост-1-ен-3,17-диона в среде органического растворителя при 0-40°С гидрогалогенидом, например HCL, в среде ледяной CH₃C(O)OH. Брутто=ф-ла

т.пл., °С: а) C₂₀H₂₃CLO₂

148-150

б) C₂₀H₂₃BRO₂

нет

в) C₂₀H₂₃FO₂

нет. Новые вещества оказывают ингибирующее действие ароматазы яичников при дозе 30 мг/кг, например для соединения а оно составляет 57% при токсичности LD₅₀ 800 мг/кг (орально). 1 табл.