Способ получения производных 9-(2-пропоксиметил)гуанина Советский патент 1990 года по МПК C07D473/18 A61K31/522 A61P31/12 

Изобретение относится к способу получения производных 9(2-пропокси- метил)гуанина, обладающих противовирусным действием.

Цель изобретения - способ получения производных 9(2-пропоксиметил)гуанина, обладающих более высокой противовирусной активностью.

Пример 1. 9(1, 3-Диацетилок- си-2-пропоксиметил)гуанин.

Смесь 3,00 г 9-0 ,3-Диокси-2-про- поксиметил)гуанина, 300 мг 4-диметил- аминопиридина и 100 мл ангидрида уксусной кислоты интенсивно перемешивают в течение 3 сут при комнатной температуре. Ангидрид уксусной кислоты удаляют упариванием при пониженном давлении, а остаток перекрис- таллизовывают из метанола, получают

3,62 г (91%) 9(1,3-Диацетилокси-2- пропоксиметил) гуанина с т.пл. 237 23У°С.

11 р и м е р 2. N - (4-метоксифенил- дифенилметил)-9(1,3 Диацетокси-2- -пропоксиметил)гуанин.

Раствор 3,3 г 9(1.З-Диацетокси-2- -пропоксиметил)гуанина, 7,0 г 4-ме- токсифенилдифенилметилхлорида, 7,0 мл триэтиламина и 300 мг 4-диметиламино- пиридина в 50 мл сухого диметилформа- мида нагревают с перемешиванием с помощью магнитной мешалки при 50°С в течение 15 ч. Затем добавляют 5 мл метанола, раствор концентрируют при пониженном давлении до получения коричневого масла, которое хроматогра- фируют на силикагеле с элюированием смесью метанола и метиленхлорида

fcn ел

Юэ

О

3155

(1:12), полумают маслянистый продукт. Указанное масло перекристаллизовывают из этилацетата и гексана, получают 5,42 г (65%) (4-метоксифенилдифе- нилметил)-9(1,3 Диацетокси-2-пропок- симетил)гуанина с т.пл. 139 141°С.

4-Метоксифенилдифенилметилхлорид можно заменить трифенилметилхлоридом, в результате чего получают соответствукщие трифенилметилзащищенные соединения.

-(4-Метоксифенилдифенилметил)-9(1,3 Диокси 2 пР°поксиметил)гУанин«

Раствор 4,0 -(4-метоксифенилди- фенилметил),3 Диацетокси-2-про- поксиметил)гуанина в 100 мл метанола и 20 мл концентрированной гидроокиси аммоний перемешивают с помощью магнитной мешалки при 22 С в течение 16 ч, y а затем при 50°С в течение 2,5 ч. Затем добавляют еще 10 мл гидроокиси аммония и полученный раствор перемешивают еще 2,5 ч при 50°С. Затем раствор концентрируют при пониженном дав- 2 лении и полученный твердый остаток перекристаллизовывают из метанола и этилацетата, получают 3,5 г (98%) -(4-метоксифенилдифенилметил) -9 (1, З-диокси-2-пропоксиметил)гуанина с 3 т.пл. 148-151°С.

-(4-Метоксифенилдифенилметил) Э (1,З-Ди-п-октаноилокси-2-пропоксиме- тил)гуанин.

К перемешиваемому с помощью магнитной мешалки раствору 1,05 г N -(4-ме- токсифенилдифенилметил)9-(1,3 диок- си-2-пропоксиметил)гуанина и 2$ мг 4-диметиламинопиридина в 30 мл сухого пиридина по каплям добавляют раст- вор 1,2 г 1 -октаноилхлорида в 10 мл метиленхлорида. Через 15 ч добавляют 1,5 мл воды и полученный раствор концентрируют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на силикате- ле с элюированием с помощью смеси метанола и метиленхлорида (1:9), получают белое твердое вещество, которое перекристаллизовывают из этилацетата- гексана, выход (4-метоксифенилди- фенилметил)-9(1,3-ди-п-октаноилок- си-2-пропоксиметил)гуанина с т.пл. 180-18ГС составляет 8%.

Аналогично этерифицируют следующие соединения:

2- (4-метоксифенилдифенилметилами- но)-6-метокси-9(1,3 н-бутаноилокси-2- -пропоксиметил)пурин;

Q

5

2-(-метоксифенилдифенилметилами- но)-6-тио 9- 1,3-ди(2,2-диметилпро- паноилокси)-2-пропоксиметил1пурин;

2-(4-метоксифенилДифенилметилами- но)-б-тио-9- l,(н-октаноилокси)- -2-пропоксимети)пурин;

2- (4-метоксифенилдифенилметила ми- но)-6-тио-у- 1,3-ди(1-дамантилкарбок- си)-2-пропоксиметил пурин;

2- ( -мет оксифенилдифенил метила ми- но )-6-метилтио-9- 1,3-(н-гептаноилок- си)-2-пропоксиметил пурин;

2,6-ди(Ц-метоксифенилдифенилметил- амино)-9 l,(н-деканоилокси)-про- поксиметил пурин;

2,6-ди(-метоксифенилдифенилметил- амино)-9 1,(н-октаноилокси)-2- -пропоксиметил пурин;

2,6-ди(-метоксифенипдифенилметил- амино)-9 1,(2,2-диметилпропано- илокси)-2-пропоксиметил пурин;

2,6-ди(-метоксифенилдифенилметил амино),(1-аламантилкарбок- tn)-2-пропоксиметил пурин;

2-метиламино-6-(-метоксифенилди- фенилметиламино),(н-тетра- деканоилокси)2-пропоксиметил пурин;

2-(-метоксифенилдифенилметилами- но)-6-метиламино-9 1,(н-гексаде- каноилокси)-2-пропоксиметил1пурин;

6-хлор 2-(ч-метоксифенилдифенилме- тиламино),3-ди(н-октадеканоилок- си)-2-пропоксиметил)пурин;

2-(4-метоксифенилдифенилметилами- но)-9- l,3-ди(н-октаноилокси)-2-про- локсиметил пурин;

2-(4-метоксифенилдифенилметилами- но)-9 (2,2-диметилпропаноилок- си)-2-пропоксиметил1пурин;

2-(4-метоксифенилдифенилметил- амино) -9 l , (.1 -адамантилкарбок- си)-2-пропоксиметил1пурин;

6-(-метоксифенилдифенилметил- амино)-9 l ,(н-додеканоилокси)-2- -пропоксиметил)пурин;

N -(А-метоксифенилдифенилметил)Э

(1,3-дипропаноилокси-2-пропоксиметил) гуанин;

N -(4-метоксифенилдифенилметил)-9 ,(н-бутаноилокси)-2-пропоксиметил гуанин;

N1-(-метоксифенилдифенилметил)-9 (2-метилпропаноилокси)-2-пропоксиметил гуанин;

N1-(Ц-метоксифенилдифенилметил)9 1 ,3(н-пентаноилокси)-2-пропоксиме- тил гуанин;

w -(-метоксифенилдифенилметил)9

51553012

(2,2-диметилпропаноилокси)-2- метанола -пропоксиметил } гуанин;

N -(А-метоксифенилдифенилметил)9 D 3(н-гексаноилокси)-2-пропоксиме- тил гуанин;

N - (-метоксифенилдифенилметил) -1}- U (н-гептаноилокси)-2-пропоксиметил гуанин;

N1- С -метоксифенилдифенилметил)- ю 9 (н-деканоилокси)-2-пропоксиметил гуанин;

N - С -метоксифенилдифенилметил)- (н-додеканоилокси)-2-про- поксиметил гуанин;15

N -(А-метоксифенилдифенилметил)- 9 l,3-ди(н-тетрадеканоилокси)-2-пропоксиметил гуанин;

N -(А-метоксифенилдифенилметил)Э ,(н-гексадеканоилокси)-2-про- 20 поксиметил гуанин;

N - (-метилфенилдифенилметил) -9- D,(н-октадеканоилокси)-2-пропоксиметил | гуанин;

1 .

Затем добавляют диэтиловы эфир до прекращения осаждения вещес ва. Полученный продукт фильтруют, п мывают диэтиловым эфиром, высушиваю на воздухе и перекристаллизовывают, получают гидрохлорид ,3-ди(н-ок ноилокси)-2-пропоксиметил гуанина.

Аналогично основания других соединений могут быть переведены в соот ветствующие соли хлористо-водородной бромисто-водородной, серной, фосфорной, уксусной, пропионовой, гликоле- вой, пировиноградной, щавелевой, мал новой, янтарной, яблочной, малеиново фумаровой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансуль фоновой, этансульфоновой, п-толуол- сульфоновой кислот.

Пример. 1,0г гидрохлорида ,3-Ди(н-октаноилокси)-2-пропокси метил -гуанина в 50 мл диэтилового зфира перемешивают с двукратным стех

N -С -метоксифенилдифенилметил)-9 25 ометрическим избытком разбавленного

30

40

U (н-ейкозаноилокси)-2-пропок- симетил гуанин;

N -(Ъ-метоксифенилдифенилметил)-3- (1-адамантилкарбокси)-2-про- поксиметил)гуанин, т.пл. 201-203 0, выход 73%;

N -(-метоксифенилдифенилметил)- 9 1,(бензилоксиацетилокси)-2- -пропоксиметил гуанин;

N -(А-метоксифенилдифенилметил)9 U,(3 бензилоксипропаноил)-2-про- поксиметил гуанин.

,(н-октаноилокси)-2-про- поксиметил)гуанин.

Раствор 0,9б9 г N -(4-метоксифе- нилдифенилметил),(н-октаноилокси) -2-пропоксиметил) гуанина в 0 мл ледяной уксусной кислоты и 10 мл воды перемешивают при 75°С в течение 3 ч. Затем полученный раствор 45 концентрируют и остаток хроматографи- руют на силикагеле с элюированием с помощью смеси метанола и метиленхлори да (1:15), получают белое твердое вещество. Полученный продукт перекристаллизовывают из метанола, выход 0,385 г (6U) ,3-ди (н-октаноилокси)-2-пропоксиметил 1 гуанина с. т.пл. 165-1664.

П р и м е р 3. Двукратный стехио- метрический избыток хлористого водорода в метаноле добавляют к раствору 1,0 г ,(н-октаноилокси) -2-пропоксиметил1 гуанина в 20 мл

водного раствора карбоната калия до полного растворения соли. Затем орга нический слой отделяют, промывают ег два раза водой, сушат сульфатом маг- ния и упаривают, получают ( -октаноилокси)-2-пропоксиметил гуани в виде свободного основания.

П р и м е р 5. Получение лекарственных форм 9 (2,2-диметилпро 35 паноил)-окси-2-пропоксиметил гуанина Форма для местного применения: Действующее соединение0,2-2 г

Спан2 г

Твин 602 г

Минеральное масло5 г

Вазелин10 г

Метилпарабен0,15 г

Пропилпарабен0,05 г

БОА (бутилированный оксианисол)0,01 г

ВодаДо 100 мл

Все компоненты (за исключением во ды) при перемешивании нагревают до 60°С, затем к однородной массе при 60°С добавляют воду в количестве, до таточном для получения 100 г крема и охлаждают.

Раствор для внутрибрюшинного и внутримышечного введения:

Действующее соединение0,5 г

Пропиленгликолы20 г

Полиэтиленгликоль20 г

Твин 801 г

Хлорид натрия (и,) До 100 мл

50

55

метанола

Затем добавляют диэтиловый эфир до прекращения осаждения вещества. Полученный продукт фильтруют, промывают диэтиловым эфиром, высушивают на воздухе и перекристаллизовывают, получают гидрохлорид ,3-ди(н-окта- ноилокси)-2-пропоксиметил гуанина.

Аналогично основания других соединений могут быть переведены в соответствующие соли хлористо-водородной, бромисто-водородной, серной, фосфорной, уксусной, пропионовой, гликоле- вой, пировиноградной, щавелевой, малоновой, янтарной, яблочной, малеиновой, фумаровой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансуль- фоновой, этансульфоновой, п-толуол- сульфоновой кислот.

Пример. 1,0г гидрохлорида ,3-Ди(н-октаноилокси)-2-пропокси- метил -гуанина в 50 мл диэтилового зфира перемешивают с двукратным стехи0

0

5

водного раствора карбоната калия до полного растворения соли. Затем органический слой отделяют, промывают его два раза водой, сушат сульфатом маг- ния и упаривают, получают (н- -октаноилокси)-2-пропоксиметил гуанин в виде свободного основания.

П р и м е р 5. Получение лекарственных форм 9 (2,2-диметилпро- 5 паноил)-окси-2-пропоксиметил гуанина . Форма для местного применения: Действующее соединение0,2-2 г

Спан2 г

Твин 602 г

Минеральное масло5 г

Вазелин10 г

Метилпарабен0,15 г

Пропилпарабен0,05 г

БОА (бутилированный оксианисол)0,01 г

ВодаДо 100 мл

Все компоненты (за исключением воды) при перемешивании нагревают до 60°С, затем к однородной массе при 60°С добавляют воду в количестве, достаточном для получения 100 г крема и охлаждают.

Раствор для внутрибрюшинного и внутримышечного введения:

Действующее соединение0,5 г

Пропиленгликолы20 г

Полиэтиленгликоль20 г

Твин 801 г

Хлорид натрия (и,) До 100 мл

0

5

Действующее вещество растворяют в пропиленгликоле, полиэтиленгликоле 400 и твине 80. Затем при перемешивании добавляют раствор хлорида натрия до 100 мл, полученный раствор фильтруют через пористый фильтр (0,2 мк) и разливают в стерильных условиях.

Раствор для внутривенного введения:10

Действующее соединение 0,1 г

Полисорбат 800,1 г

Пропиленгликоль или

полиэтиленгликолъ ЬОО 3,0 г

ВодаДо 100 мл i$

Действующее вещество добавляют к смеси полисорбата и 80 и пропиленгли- коля или полиэтиленгликоля ЦОО в 20 мл воды и перемешивают. Получен- , ный раствор разбавляют водой до 100 мл и фильтруют через пористый фильтр )0,2 мк). Таблетки, мае.ч.:

Действующее соединение 200 25 Стеарат магния3

Крахмал30

Лактоза116

Поливинилпирролидон 3 Ингредиенты смешивают и гранули- зо руют с помощью метанола как растворителя. Гранулы высушивают и таблетиру- ют в таблетки с содержанием действу- ющего вещества 200 мг.

П р и м е р 6. Противовирусные свойства соединений.

Для заражения использовали вирус Herpes simplex 2 штамм G, выращенных на клеточных культурах НЕр-2. Вирус в течение 1 ч наносят на клеточныед

культуры, а затем на клетки помещают свежую среду и инкубируйт при 35°С до заражения всех клеток. Далее клеточную взвесь замораживают при -70°С, оттаивают и центрифугируют для удале- ния остатков клеток. Надосадочную жидкость делят на порции и хранят при -70°С. Разбавлением Ю Ътой жидкости получают 50%-ную инфекционную дозу клеточной культуры (CCID50 с НЕр-2) Q и разбавлением получают дозу 50%-ной летательности ( ) при тесте на иммунитет у мышей.

Группы по 20 мышей-самок штамма Swiss Webster весом 15-17 г заражались внутрибрюшинным введением 0,2 мл препарата, содержащего 1/10 LDSe/ /мышь. Мыши, загаженные вирусами в дозе 10° LDBO, служат контро35

5

о

Q

5

лем вирулентнЪсти. Введение испытуемых соединений начинают через 6 ч после заражения мышей. Мышей разделяют на группы по 20 грызунов, которым вводит соединение в растворе хлористого натрия (подкожно) из расчета 20 мг/кг. Группе из 20 мышей (контрольная) вводят только раствор хлористого натрия. Введение соединений повторяют через 2, 48, 72 и 96 ч после заражения.

Противовирусное действие предлагаемых соединений у мышей, зараженных вирусом HSV-2, приведено в табл. 1.

Пример. Испытание на острую токсичность у мышей.

Группам 5 мышей-самцов Swiss-Webster (Simonsen) весом 25 г каждая подкожно вводят соединения, приведенные в табл. 2. Испытуемое вещество вводят лишь на первый день опыта. Затем в течение 21 сут определяют чис- jjp павших животных.

П р и м е р 8. Концентрация в плазме при оральном введении.

Мышей-самцов весом г помещают в клетки со свободным доступом к корму и воде. Накануне введения медикамента корм убирают и мышей больше не кормят до истечения 3 ч после введения медикамента.

Испытуемую дозу каждого соединения вводят орально. Все оральные дозы взвешивают в носителе, состоящем из к карбоксиметилцеллюлозы натрия (0,5$), хлористого натрия (0,9%), твин 80 (0,4%), бензилового спирта (0,9%) и воды (97,3%). Каждое соединение вводят через желудочный зонд в объеме дозы, эквивалентной 30 мг/кг предлагаемого соединения.

Концентрация в плазме каждого соединения в пересчете на предлагаемое соединение, взятом в качестве эталона, приведена в табл. 3. Формула изобретен и. я

Способ получения производных 9(2- -пропоксиметил)гуанина общей формулы

-снгосн-снгосон

ityOCOR

где к - С(-С,,-алкил или 1-адамантил, отличающийся тем, что соединение общей формулы

7HN

N-CHrOCHCH-iOCOR

1553012 0

где R имеет указанные значения;

У - тритилзащитная группа, подвергают взаимодействию с ледяной 5 уксусной кислотой.

Изобретение касается гетероциклических соединений и, в частности, способа получения производных 9-(2-пропоксиметил)гуанина формулы [R(O)COCH₂]₂CH - O - CH₂-N-CH=N-C=C-N=C(NH₂)-NH-C=O, где R-C₁-C₁₉-алкил или 1-адамантил, обладающих противовирусным действием. Цель изобретения - создание новых более активных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией соединения формулы [R(O)C-O-CH₂]₂CH-O-CH₂-N-CH=N-C=C-N-C(NHY)-NH-C=O, где R - указано выше

Y - тритилзащитная группа, с ледяной уксусной кислотой. Противовирусная активность новых веществ находится на уровне или выше активности известного вещества при токсичности ЛД *98 3320 - 4544 мг/кг. 3 табл.

iN-yQ-

Табли

ZN К -CH2OCH-CH2OCOR CH2OCOR

Введение осуществляют ежедневно в течение b сут. Заражение вирусами HSV-2 (штамма G) путем внутрибрюшииного введения.

Увеличение выживаемости по сравнению с контрольными мышами, обработанными только SSV, во всех случаях оказываются статистически показательным. Средство, содействующее суспендированию (SSV). стандартное отклонение. Соединение по .

Таблица 1

11

-АЛ

HiN-VSf1553012

Таблица 2

CH CH-CH OCOR 5н2ОСОЯ