Штамм гриба РеNIсILLIUм SоLIтUм "бежевый" - продуцент солизима Советский патент 1990 года по МПК C12N9/20 C12N9/20 C12R1/80 

Изобретение относится к области получения ферментов с помощью микроорганизмов и может быть использовано в медицинской промышленности при производстве липолитического фермента солизима.

Цель изобретения - получение нового штамма Penicillium solitum с повышенной липолитической активностью.

Штамм P.solitum бежевый ВНИИА-317 А получен путем ступенчатого отбора из популяции штамма ЛИАТ-080, подвергнутого воздействию ультрафиолетовых лучей в дозе 3000 эрг/мм2.

Полученный штамм P.solitum бежевый ВНИИА-317 А имеет следующие

культуральные морфологические и фи- зиолого-биохимические характеристики и липолнтические свойства.

Морфолого-культуральные признаки.

На модифицированной среде Райстри- ка колонии 3,9-4,1 см в диаметре, войлочные, радиально-складчатые, бежевого цвета. Центр приподнят. Зона роста белая шириной 1-2 мм. Край волнистый. Обратная сторона коричневого цвета, радиально-складча- тая.

На среде Чапека с глюкозой колонии 4,0-4,2 см в диаметре бежевого цвета, переходящего к краю колонии в более темный. От слегка приподнятого более пушистого центра отходят радиСП

С&

ел

00 00 4

алъные складки. Зона роста беловатого цвета 1-2 мм Край волнистый. Обратная сторона темно-коричневого цвета, радиально-складчатая.

На среде Чапека с кукурузным экстрактом колонии 3,5-3,7 см в диаметре, бледно-песочного цвета, войлоч- но-пушистые, центр слегка приподнят. Край волнистый темно-песочного цвета сильно радиально-складчатый, Зона |роста белая, 1-2 мм. Обратная сторона темно-каштанового ивета, но-складчатая.

На сусле-агаре колонии 342-3,6 см в диаметре, войлочные, беловатого цвета с единичными складками. Центр приподнят, пушистый, более темного цвета. Край колонии сильна радиально складчатый. Зона роста 1-2 мм бело- ватого цвета. Обратная сторона коричневого цвета, радиально-складчатая.

Физиолого-биохимиче ские признаки. Аэроб. Температурный оптимум био- синтеза (25±1)°С. Максимум накопления фермента на 6-е сутки роста.

Молоко пептонизируг.т. На ломтиках картофеля растет хорошо. На клетчатке рост слабый. Крахмал гидролизует, Желатину не разжижает, Сероводород н образует Нитраты в нитриды восстанавливает. Реакция на инверсию сахарозы отрицательная. Пигменты мела- ноидного типа не образует.

Штамм растет на среде с глицерином, глюкозой, арабинозой, сахарозой ксилозой, инозитом, манннтом, фруктозой и рамнозой в качестве единственного источника углерода.

Обладает высокой лнполитической активностью при росте на жидких и твердых питательных средах.

Пример 1. Культуру штамма Penicillium solitum бежевый № 317 на кусочке агаризованной модифицированной среды Райстрика вносят в ка- чалочные колбы, содержащие 100 мл ферментационной среды следующего состава, %:

мука

1,0 0,8Ь в,6 0,025 0,1

СаС03

Подсолнечное

масло

,

0

Биосинтез при (25tl)°C на качалке при 180-200 об/мин в течение 6 сут. Активность культуральной жидкости 35000 ЛЕ/мл.

Штамм продуктивнее по липолитичес- кой активности производственного. штамма 1 М на 52%.

Пример 2. Проверка нового штамма продуцента солизима в полупроизводственных условиях. Биосинтез ведут по схеме: флаконы с зерновым субстратом посевной аппарат - - ферментер. Выращивание посевной культуры и ферментацию проводят для посевных аппаратов на следующие среды, %:

Соевая мука1,0

Сахарный песок1,0

К2НР040,85

КС10,1

MgS040,025

NaN030,6

СаС03О,1 Подсолнечное

масло0,5

ПропинолО

,1

0

5

Для ферментера - на среде,

Соевая мука1,0

0,85 0,025 0,6

К2НР04

MgS04

NaN03

Подсолнечное

масло

АС-60

0,5 0,1

Ферментацию ведут в аппарате 500 л, коэффициент загрузки 0,5 при (25±1)°С, постоянной работе мешалки 120 об/мин, ступенчатой аэрации от 0,5 до 1,0 об/об/мин в течение 4 сут.

Активность штамма в полупроизводственных условиях составляет 22710 ЛЕ/мл, превышает по активности производственный штамм на 27,5%.

Формула изобретения

Штамм Penicillium solitum бежевый ВНИИА-317 А - продуцент солизима.

Изобретение относится к получению ферментов с помощью микроорганизмов, в частности к получению липолитического фермента медицинского назначения - солизима. Цель изобретения - получение штамма PENICILLIUM SOLITUM ВНИИА 37А с повышенной липолитической активностью. Изобретение заключается в том, что в качестве продуцента солизима используют штамм PENICILLIUM SOLITUM "бежевый" 317А, полученный путем ступенчатого отбора из популяции штамма PENICILLIUM SOLITUM ЛИАТ-080 после ультрафиолетового облучения. В лабораторных условиях на среде, содержащей соевую муку, минеральные соли и подсолнечное масло, штамм проявляет липолитическую активность 35000 ЛЕ/мл. В полупроизводственных условиях активность штамма составляет 22710 ЛЕ/мл.