Штамм лиа-т-080-продуцент липолитического фермента Советский патент 1980 года по МПК C12K1/02 C12D13/10 

liumSolitum Westling ЛИА-Т-080, отобранного и поддерживаемого на модифицированной среде Райстрика следующего состава, г/л: пептон 6, глицерин 15, NaCI 5, KCI 0,5 FeS040,Ol5 CuSO. 0,02, КН2РО, 0,3, MnSO 0,0002 МдЗОд 0,05, агар , 25, рН-6,9 до стерилизации, стерилизация 0,6 ати 30 мин. Штамм депонирован в музее культур Всесоюзного научно-исследователь ского технологического института антибиотиков и ферментов медицинского назначения под номером ЛИА-Т-080. Штамм ЛИА-Т-080 Penicillivm Solitum Westling характеризуется следующими признаками. На среде Чапека с глюкозой на 14 сут. роста при 24с образует колонии диаметром 4,4-4,7 см, бархатис то-войлочные, с приподнятым радиально складчатым центром, синевато-зеленые с коричневым оттенком в центре колонии, зона роста белая шириной 0,51 NM, край волнистый. В центре колонии мелкие капли бесцветного эксудата. Иногда наблюдаются пятна белого аспорогенного мицелия и более светлые пушистые сектора. Обратная сторона темно-песочного цвета с радиаль ными складками в центре. На агаре Чапека с кукурузным экстрактом колонии 5,6-6,0 см, войлочные, с приподнятым пушистым центром зелено-малахитовые с коричневым оттенком в центре, сильнорадиально-, складчатые, .зона роста белая. Ширино 1-1,5 мм, край слегка волнистый, эксудат бесцветный, мелкими каплями Наблюдаются пятна белого асаорогенного мицелия и иногда более светлые пушистые сектора. Обратная сторона к ричневого цвета, радиально-складчата На модифицированной среде Райстри ка колонии 5,6-5,8 см, войлочно-зер нистые, с чуть приподнятым центром,, радиально-складчатые, синевато-зеле с коричневым оттенком в центре коло , зона роста белая, шириной 1,52,0 мм, край ровный. В центре колони капли эксудата розового цвета. Наблюдаются пятна аспорогенного мицелия и иногда сектора с белым опушением. Обратная сторона бледнопесочного цвета, радиально-складчатая. На сусло-агаре колонии 5,2-5,6 .м, войлочные, с приподнятым пушистым центром, синевато-зеленые, с редкими радиальными складками, зона роста белая 1-1,5 мм, край слегка волнистый, эксудат отсутствует. Иногда наблюдаются пятна аспорогенного мицелия и пушистые сектора белого и светлозеленого цвета. Обратная сторона табачно-бурогоцвета, радиально-складчатая. . Микроскопические признаки штам,ма ЛИА-Т-080 одинаковы на приведенных средах. Метулы в группах по 2-3, размером (8,4-12,0) (2,94,1) мкм, встречаются простые, неразветвленные конидиеносцы, стеригмы в количестве 1-5 размером (6,0 8,4) (2,9-3,6) мкм, конидии круглые 3,6-4,8 мкм, оболочка гладкая. Физиологические признаки штамма ЛИА-Т-080. Желатину не разжижает, молоко пептонизирует, на клетчатке рост слабый, крахмал гидролизует, сероводород не образует., нитраты в нитриты восстанавливает. Растет на среде с глицерином, глюкозой, арабйнозой, ксилозой, мднпитом, фруктозой, раффинозой, -сахарозой, инозитом, рамнозой. /Для поддержания и хранения продуцентов лиьазы используют модифицированную среду Райстрика, которая обеспечивает не только увеличение продуктивности культуры, но и большую стабильность ее при хранении. Так, при хранении продуцента липазы на модифицированной среде Райстрир а уровень исходной ферментатив - 1ой активности не менялся в течение 10 мес. вместо 1-2 мес. на среде Чапека с кукурузным экстрактом. В таблице приведена сравнительная характеристика липолИтической активности Penicillium Solitum штаммов ЛИА-Т-062 и ЛИА-Т-080 при их культивировании на двух средах.

ЛИА-Т-062

ЛИА-Т-062

16

ЛИА-Т-080 15

1040

100

1170

112

1670

160 Режим ферментации штамма ЛИА-Т-08 определяется преимущественно услови ми аэрации культуры. Оптимальные условия для биосинтеза фермента достигались при подаче воздуха в количестве .1,0-1,5 объема на объем среды в 1 мин в течение О84 ч процесса культивирования продуцента с последующим снижением до 0,5 0,8 объема на 1 объем среды в 1 мин. Липолитическая активность штамма ЛИА-Т-080 .при указанных условиях выращивания варьировсша в пределах 1370- 1550 ЛЕ/мл на 96-115 ч ферментации и превышала активность штамма ЛИА-Т-062 в среднем на 63%. Формула изобретения Штамм Penicillium solitura Westlin ЛИА-Т-080 - продуцент липолитического фермента. Хранится в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского технологического института антибиотиков и ферментов медицинского назначения под номером ЛИА-Т-080. Культуральные признаки. На среде Чапека с глюкозой колонии 4,4-4,7 см в диаметре, бархатисто-войлочные, с приподнятым радиально-складчатым центром, синевато-зеленые с коричневым оттенком в центре и белым волнистым краем. На среде Чапека с кукурузным экстрактом колонии 5,6-6,0 см в диаметр войлочные, с приподнятым пушистым центром, глубоко-складчатые, зеленомалахитовые с коричневым оттенком в центре и белым, слегка волнистым краем. На модифицированной среде Райстрика колонии 5,6-5,8 см в диаметре, войлочко-зернистые с приподнятым центром, радиально-складчатые, синевато-зеленые с коричневым оттенком в центре и белым ровным краем. Микроскопические признаки.Метулы в группах по 2-3,размером (8,4-12,0)х X (2,9-4,1) мкм,встречаются простые конидиеносцы, стеригмы в количестве 1-5, размером (6,0-8,4)X2,9-3,6)мкм, конидии круглые,диаметром 3,6-4,8мкм оболочка гл1дкая. Физиологические признаки.Желатину не разжижает, молоко пептонизирует, на клетчатке рост слабый,крахмал гидрол изует, сероводород не образует,нитраты в нитриты восстанавливает,растет на среде с глицерином,глюкозой,арабинозой,ксилозой,маннитом,фруктозой, раффинозой,сахарозой,инозитом,рамнозой. Липолитическая активность составляет 1370-1550 ЛБ/мл на 96- 115 ч ферментации. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1.Авторское свилетельство СССР 562571, кл. С 12 К 1/02, опублик. 2.Agricultural and Biologucal Chemistry, vol 30, p. 351, 1966