Способ радиоиммунологического определения тестостерона в сыворотке крови человека Советский патент 1990 года по МПК G01N33/534 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения тестостерона8 и может быть использовано для выявления нарушений функ- ций половых желез и надпочечников. | Цель изобретения - упрощение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

В анализе используют инкубационную среду следующего состава, мас.%:

1151-тестостерон

Антитела к

тестостерону

Вторые антитела

ТРИС

НС1

Полиэтиленгликоль

Дистиллированная

вода

Анализируемые образцы сыворотки крови инкубируют при комнатной температуре в течение 2 ч в инкубационной

(0,5-1,0) IO 3

(2-3) -10 0,045-0,9 1,0-1,5 0,07-0,08

6,2-8,0 Остальное

-(:

янк-. о.%:

пеой

IO 3

-(:

среде. Затем центрифугируют и проводят радиометрию осадков.

Пример 1. Обозначают по две пробирки для подсчета общей активности (Т), калибровочных проб (№ 1-12) и для анализируемого образца (JP 13 и 14). Отбирают из каждого флакона с калибровочной пробой по 0,05 мл сыворотки и вносят в ряд пробирок (№ 1-12). В пробирки (№ 13 и 14) вносят по 0,05 мл сыворотки крови. Во все пробирки вносят по О,1 мл раствора I-тестостерона. Во все пробирки, кроме Т, вносят по 1,0 мл смеси антисыворотка - вторые антитела - полиотиленгликоль. Инкубируют все пробирки при комнатной температуре (18-+25 С) в течение 2 ч, Все пробирки, кроме Т, центрифугируют при комнатной температуре в центрифуге с горизонтальным ротором при ускорении 1500-2000 в течение 20 мин. Суперна- тант удаляют.) Измеряют скорость счета в каждой пробирке.

i

(Л

ел

о со

Далее проводят расчеты. Находят среднее арифметическое значение скоростей счета fijI-тестостерона для каждой пары пробирок. Рассчитывают величину В/В0 (%) для каждой пары пробирок калибровочного графика и неизвестной пробы, где В0 - средняя скорость счета в пробирках, содержащих пробу Онмоль-л (№ ,,2); В - средняя скорость счета в пробирках, содержащих калибровочные, или неизвестные пробы (№ 13-14). В полулогарифмичес ких координатах строят для калибровочных проб граф ик зависимости В/В0 от концентрации тестостерона в этих пробах (нмоль/л)„ Для неизвестной пробы на основании соответствующего значения В/В (%) по калибровочному графику определяют концентрацию тес- тостерона. В пробирках № 13 и 14 значение В/Во (%) составило 50, что соответствует концентрации тестостерона 8 нмоль/л.

Таким образом, предлагаемьй способ является более простым по сравнению с известным при сохранении чувствительности „

Формула изобретения Способ радиоиммунологического оп- ределения тестостерона в сыворотке крови человека, включающий инкубирование анализируемой пробы с антителами к тестостерону 1tf 1-тестостероном, вторыми антителами, полиэтиленгли- колем, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, при радиоиммунологическом анализе инкубацию сыворотки крови с антителами к тестостерону, вторыми антителами и полиэтиленгликолем проводят одно- этапно.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления нарушений функций половых желез и надпочечников. Цель изобретения - упрощение способа - достигается путем одновременной инкубации исследуемых образцов с антителами к тестостерону, вторыми антителами и полиэтиленгликолем.