Изобретение относится к органической химии, конкретно к новому производному и-В-ксилофуранозиладенина- 6-М-бензоил-9-(2 -0-ацетил-з -дезокси-3 -хлор-й-В-ксилофуранозил)аденину формулы I
ИНВй
6:
но
ОАс
ЗЗг
Ac СН5С - II О
являющемуся промежуточным соединением, в синтезе нового 2,5-олигоаденилата - динатриевой соли аденилил (2-5) аде пилил(2 -5 )-9-(2,3-ангидро-$-В- -рибофуранозил)аденина формулы II
Ade
w.
. . И - +
НО О-р-ОКа
Ade
Vr
но оо
II - +
0-Р-01Яа
IAde
°тч
V
Ade
КН2 -
II
WA
которая проявляет фиторостостимули- рующую активность (способствует повышению урожайности озимой пшеницы) и может найти применение в сельском хозяйстве в качестве экологически чистого стимулятора роста растений нового поколения, так как он состоит из компонентов, являющихся участниками естественных биохимических про
цессов в растениях и живых организма
Цель изобретения - новое производное -В-ксилофуранозиладенина, структура которого позволяет получить новый биологически активный аденилил-(2-5 )аденилил(2-5 )-9- -(2,3 -ангидро- -В-рибофуранозил) аденин (динатриевую соль)(II), обладающий фиторостостимулирующей активностью.
Пример 1. 6-Ы-Бензоил-9-(2- О-ацетил-3 -дезокси-3 -хлор- J-D- ксилофуранозил)аденин (I).
Смесь 0,86 г (3,01 ммоль) 3 -дезокси-3 -хлор-А-В-ксилофуранозиладе- нина (IV), 17 мл гексаметилдисила- зана и 0,03 г хлористого аммония кипятят с обратным холодильником до полного растворения и упаривают до
0
15
0
25
30
35
40
45
,-п
суха. Остаток растворяют в 17 мл пиридина, раствор охлаждают до 0°С, и добавляют к нему 0,73 мл (0,85 г, 6,02 ммоль) хлористого бензоила. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 2 ч, охлаждают до О С добавляют к ней 4,8 мл воды и спустя 5 мин - 6,4 мл 25%-ного водного раствора аммиака. Через 10 мин раствор упаривают досуха, остаток хроматографируют на колонке с силикагелем Л 40/100 (100 см3). Продукты реакции элюируют хлороформом, затем смесью хлороформ - метанол в градиенте концентрации метанола в хлороформе 0-2 об.%. Фракции, содержащие продукт реакции, объединяют, упаривают досуха, остаток кристаллизуют из горячего спирта. Получают 0,6 г (58%) 6-М-бензоил-З -дезокси-3 -хлор-Д-В-ксилофуранозиладени- на (V). Т.пл. 118-120°С. УФ-спектр,
макс нм (lg. E): 232 плеч° (411 262 плечо (4,07), 282 (4,29).
К раствору 0,54 г (1,39 ммоль) соединения V в 20 мл пиридина добавляют 0,6, г (2,08 ммоль) монометокси- тритилхлорида и перемешивают реакционную смесь 20 мин, добавляют к ней 1 мл метанола и через 5 мин упаривают досуха. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелемЛ 40/ЮС (100 см3). Продукты реакции элюируют хлороформом. Фракции, содержащие продукт реакции, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл хлороформа и высаждают при перемешивании в 150 мл гексана. Выпавший остаток отфильтровывают. Еолучают 0,9 г (98%) 6-М-бензоил-5 -0-монометоксиit
тритил-3 -дезокси-3 -хлор-р-В-ксило- фуранозиладенина (VI). Т.пл. 122- 125°С. УФ-спектр, нм (lg Е) : ,232 (4,66), 282 (4,36).
Смесь 0,69 г (1,04 ммоль) тритиль- ного производного VI, 0,05 г диме- тиламинопиридина в 5 мл уксусного ангидрида перемешивают Зч, добавляют 50 мл спирта и упаривают. Остаток растворяют в 30 мл 2%-ного раствора n-толуолсульфокислоты в смеси хлористый метилен:метанол 7:3. Через 5 мин к раствору добавляют 150 мл хлороформа и обрабатывают его фосфатным буфером с рН 7,0 (2x100 мл). Хлороформный раствор отделяют, сушат безводным сульфатом натрия и упари31573833
вают. Остаток хроматографируют наРастворяют 50 мг (0,036 мысль) соколонке с силикагелем Л 40/100единения VIII в 3 мл 2%-ного раствора
(120 см3). Продукты элюируют хлоро- n-толуолсульфокислоты в смеси хло- формом, а затем смесью хлороформ:метанол - 9:1. Фракции, содержащие соединение I, объединяют и упаривают.
ристый метилен:метанол 7:3. Через
15 мин раствор разбавляют хлороформом до 30 мл и встряхивают с фосфатным буфером, рН 7,0 (2МО мл). Органический слой отделяют, сушат над
Остаток кристаллизуют из спирта. Получают 0,4 г (89%) 6-Н-бензоил-9-(2 15 мин раствор разбавляют хлороформом до 30 мл и встряхивают с фосфатным буфером, рН 7,0 (2МО мл). Органический слой отделяют, сушат над
-0-ацетил-З1 -дезокси-3 -хлор-/ г-В-кси- IQ безводным сульфатом натрия и упарилофуранозил)аденина (I) . Т.пл. 92- 95°С. УФ-спектр,, нм (lg E):
233 (4,33), 280(4.20).
ПМР-спектр (ДМСО-dg) §, м.д. от ТМС: 11,26 с (1НХ NH), 8,79 и 8,64 с (1Н, Н-2, Н-8),8,10-7,52 м (5Н, Bz) 6,34 д 1Н, Н-1 ), 5,92 дд (1Н, Н-2/) 4,94 дд (1Н, Н-3Г), 4-,52 м (IH.H-A11), 3,83 м (2Н, Н-5 , 5), 2,13 с (ЗН, Ас).
Найдено,.: С 54,00; Н 4,18; N 16,18, С1 8,15.
,BN5OsCl (431,85).
Вычислено,%: С 53,84} Н 4,20, N 16,21, С1 8,20.
Использование соединения I в синтезе биологически активного 2,5-олиго- аденилата (II) иллюстрируется примером 2 синтеза.
П р и м е р 2. Аденилил(2 -5 ) аденилил(2-5 )-9-(2 ,3 -ангидро-0- -D-рибофуранозил)аденин (динатрие- вая соль) (II).
К смеси 40 мг (0,092 ммоль) нук- леозида I и 119 мг (0,11 ммоль) 6- -М-бензоил-9-(2 -п-нитрофенилэтил- фосфо-3 -бензоил-5 -монометокситри- тил-(2 -Б-рибофуранозил)аденина (VII) в 1 мл пиридина добавляют 47 мг (0,66 ммоль) тетразола и 67 мг (0,22 ммоль) триизопропилбензолсуль- фохлорида, перемешивают 20 ч, добаввают досуха. Остаток хроматографируют на силикагеле Л 40/100 (20 см3), как описано для соединения VIII. Получают 40 мг (90%) детритилированно- 15 го димера IX.
УФ-спектр, A«citC6 нм (lg E): 234 (4,60), 281 (4,70).
Конденсируют 200 мг (0,179 ммоль) димера IX и 270 мг (0,25 ммоль) ди20 эфира VII в 1,8 мл пиридина в присутствии 105 мг (1,5 ммоль) тетразола и 152 мг (0,5 ммоль) триизопро- пилбензолсульфохлорица в течение 20 ч. Реакционную смесь обрабатывают
25 и хроматографируют на силикагеле Л 40/100 (150 см3), -как описано для соединения VIII. Получают 270 мг (62,7%) блокированного тримера X.
УФ-спектр, ft#a« нм (1В Е 231
30 (4,85), 277 (4,31).
Растворяют 270 мг (0,13 ммоль) тримера X в 7 мл 2%-ного раствора n-толуолсульфокислоты в смеси хлористый метилен:метанол 7:3. Через 10 мин разбавляют хлороформом до 100 мл и встряхивают с фосфатным буфером, рН 7,0 ( мл). Органический слой отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают до1
4Q суха. Остаток растворяют в 60 мл 0,5 М раствора 1,5-диазобицикло- (5,4,0)-ундец-5-ена (ДБУ), выдержи- вают 20 ч, добавляют 30 мл 1М раствора уксусной кислоты в пиридине и
35
on i дс упаривают раствор досуха. Остаток
ляют 30 мл хлороформа и встряхивают с45 и v/о 1С %
л. л. с; , ,, т л /о.or, упаривают с пиридином С-5Х1Ь млКраст- фосфатным буфером, рН 7,0 (2X20 мл).
воряют в 30 мл концентрированного водного раствора аммиака, выдерживают раствор 20 ч и упаривают досуха.
воряют в 30 мл концентрированного водного раствора аммиака, выдерживают раствор 20 ч и упаривают досуха
Органический слой отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия, упаривают, остаток хроматографируют на. г,
/тс 1 Остаток хроматографируют на ДЕАЕсиликагеле (75 см). Колонку элюируют 50 нгп А Аппмв Г1,п „„3ч..1Гпсмесью хлороформ-метанол в градиенте концентрации последнего 1-10%. Фракции, содержащие продукт реакции,объцеллюлозе в НС03-форме (150 см3).Колонку элюируют раствором триэтилам- монийбикарбоната в градиенте концентрации 0,02-0,2 М. Фракции, содержащие продукт реакции объединяют и лиофи- лизируют. Получают 65,6 мг (45,6%) аденилил(2 -5 )аденилил(2 -5f)-9-(2 3 -ангидроНЗ-Д-рибофуранозил)аденина (II) в виде триэтиламмониевой соли.
единяют, упаривают досуха. Получают 80 мг (62,5%) блокированного димера VIII.
УФ-спектр,Ъ«ам, нм (lg E):234 (4,67), 281 (4,66).
n-толуолсульфокислоты в смеси хло-
ристый метилен:метанол 7:3. Через
n-толуолсульфокислоты в смеси хло-
15 мин раствор разбавляют хлороформом до 30 мл и встряхивают с фосфатным буфером, рН 7,0 (2МО мл). Органический слой отделяют, сушат над
безводным сульфатом натрия и упаривают досуха. Остаток хроматографируют на силикагеле Л 40/100 (20 см3), как описано для соединения VIII. Получают 40 мг (90%) детритилированно- го димера IX.
УФ-спектр, A«citC6 нм (lg E): 234 (4,60), 281 (4,70).
Конденсируют 200 мг (0,179 ммоль) димера IX и 270 мг (0,25 ммоль) ди0 эфира VII в 1,8 мл пиридина в присутствии 105 мг (1,5 ммоль) тетразола и 152 мг (0,5 ммоль) триизопро- пилбензолсульфохлорица в течение 20 ч. Реакционную смесь обрабатывают
5 и хроматографируют на силикагеле Л 40/100 (150 см3), -как описано для соединения VIII. Получают 270 мг (62,7%) блокированного тримера X.
УФ-спектр, ft#a« нм (1В Е 231
0 (4,85), 277 (4,31).
Растворяют 270 мг (0,13 ммоль) тримера X в 7 мл 2%-ного раствора n-толуолсульфокислоты в смеси хлористый метилен:метанол 7:3. Через 10 мин разбавляют хлороформом до 100 мл и встряхивают с фосфатным буфером, рН 7,0 ( мл). Органический слой отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают до1
Q суха. Остаток растворяют в 60 мл 0,5 М раствора 1,5-диазобицикло- (5,4,0)-ундец-5-ена (ДБУ), выдержи- вают 20 ч, добавляют 30 мл 1М раствора уксусной кислоты в пиридине и
5
упаривают с пиридином С-5Х1Ь млКраст-
воряют в 30 мл концентрированного водного раствора аммиака, выдерживают раствор 20 ч и упаривают досуха.
. г,
нгп А Аппмв Г1,п „„3ч..1Гп
целлюлозе в НС03-форме (150 см3).Колонку элюируют раствором триэтилам- монийбикарбоната в градиенте концентрации 0,02-0,2 М. Фракции, содержащие продукт реакции объединяют и лиофи- лизируют. Получают 65,6 мг (45,6%) v аденилил(2 -5 )аденилил(2 -5f)-9-(2 , 3 -ангидроНЗ-Д-рибофуранозил)аденина (II) в виде триэтиламмониевой соли.
1573833
Для удобства в работе соединение переводят из триэтиламмониевой в натри- )евую соль действием на раствор триэтиламмониевой соли в метаноле раствором натрия йодистого в ацетоне.
8
УФ-спектр, ft™;;, нм (lg E): 259
ПМР-спектр (ДаО),о , м.д.: внутренний стандарт - тре-бутиловый спирт: 6,93, 6,86, 6,85, 6,61, 6,59, 6,46. синглеты по 1Н (Н-2, Н-8), 4,88 с (1Н, Н-1 ), 4,88 д (1Н, Н-1, -1Лг - 4,2 Гц), 4,50 д (1Н, Н-Г, J, -, 2,4 Гц).
Изучено влияние динатриевой соли аденилил-(2 -5 )аденилил(2-5)-9- -(2,3 -ангидро-Р)-Д-рибофуранозил) аденина на урожайность озимой пшеницы сортов Киянка и Одесская-66. Посевы пшеницы на рембдоминизирован- ных делянках по 25 м2 (в четырех повторах) опрыскивали раствором 2,5- олигоаденидатов в концентрациях 0,25, 0,025, 0,0025 и 0,00025 мг/л. Для обработки одной делянки брали по 1 л раствора соответствующей концентрации что в пересчете расхода 2,5-олигоаде- нилата на 1 га посевов составило 100, 10, 1 и 0,01 мг соответственно. Посевы опрыскивали на VIII этапе органогенеза (конец колошения - начало цветения). В качестве контроля использовали воду, а в качестве стандарта - раствор суммарной дрожжевой РНК в концентрациях 0,5, 0,25, 0,125, 0,900025 г/л, что в пересчете расхода РНК на 1 га составило 200, 100, 50 и 0,1 г соответственно.
Сравнительные результаты дисперсионного анализа проведенных испытаний представлены в таблице.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что ис10
приводит к повышению урожайности пше ницы сорта Киянка с 63,9 до 75,0 ц/га, раствора РНК в концентрации 0,25 г/л эта прибавка составляла 3,8 ц, или 5,9%. Урожайность пшеницы сорта Одесская-66 при обработке1 ее посевов раствором 2,5-олигоаденилата в концентрации 0,25 мг/л вырастает 53,2 до 62,2 ц (прибавка 9 ц или 16,9%), а при использовании раствора РНК в концентрации раствора РНК в 0,125 г/л эта прибавка составляет 2 или 3,8%.
о Формула изобретения
6-Н-Бензол-9-(2 -О-ацетил-3 -де- зокси-3 -хлор- -Д-ксилофуранозил) 20 аденин формулы
14НВЕ
15
25
30
35
40
to
°т
т
в
АО
в качестве промежуточного соединени в сйнтезе динатриевой соли аденилил
- 2 -5 )аденилил(2-5)-9-(2,з -ан гидро-р-Д-рибофуранозилЬденина, об
f « ъ-топпсх 9
пользование 2,5-олигоаденилата в оп- ладающей фиторостостимулирующей актимальной концентрации 0,025 мг/л
тивностью.
8
приводит к повышению урожайности пшеницы сорта Киянка с 63,9 до 75,0 ц/га, раствора РНК в концентрации 0,25 г/л эта прибавка составляла 3,8 ц, или 5,9%. Урожайность пшеницы сорта Одесская-66 при обработке1 ее посевов раствором 2,5-олигоаденилата в концентрации 0,25 мг/л вырастает с 53,2 до 62,2 ц (прибавка 9 ц или 16,9%), а при использовании раствора РНК в концентрации раствора РНК в 0,125 г/л эта прибавка составляет 2ц, или 3,8%.
о Формула изобретения
6-Н-Бензол-9-(2 -О-ацетил-3 -де- зокси-3 -хлор- -Д-ксилофуранозил) 0 аденин формулы
14НВЕ
5
25
to
°т
т
в
35
АО
в качестве промежуточного соединения в сйнтезе динатриевой соли аденилил
- 2 -5 )аденилил(2-5)-9-(2,з -ан- гидро-р-Д-рибофуранозилЬденина, обf « ъ-топпсх 9
ладающей фиторостостимулирующей акладающей фи
тивностью.
Изобретение относится к саха- рам, в частности к 6-М-бензоил-9-(2 - О-ацетил-3 -дезокси-3 -хлор-й-В-кси- лофуранозил аденину ф-лы TWBZ to,, °т$ где Вг II О О в качестве промежуточного соединения в синтезе динатриевой соли аденилил- -(2-5)аденилил(2-5)-9-(2,3 Г-ан- гидро-Л-В-рибофуранозил)аденина, которая проявляет фиторостостимулирую- щую активность. Цель - выявление соединений, обладающих указанной активностью. Получение ведут из 3-дезокси- -3-хлор-й-В-ксилофуранозиладенина путем ряда его последовательных превращений, включающих силилировавие, бензоилирование 6-NH2-группы, моно- метсгкситритилирование 5 -ОН-группы, ацетилирование 2 -ОН-группы и удаление монометокситритильной защиты. Использование 2,5 -олигоаденилата в концентрации 0,0025 мг/л приводит к повышению урожайности пшеницы сорта Киянка с 63,9 до 75,0 ц/га. 1 табл.
, Влияние динатриевой соли аденилил-(2-5 )аденилил1 (2 -5 )-9-(2 ,3 -ангидро-$-Д-рибофуранозил)аденина соединения II на урожайность озимой пшеницы сортов Киянка и Одесская-66
Контроль РНК
Вода
200
100
50
+ 1,7 +3,8 +2,1
+2,7 +5,9 +3,3
| Способ предпосевной обработки семян сельскохозяйственных растений | 1981 |
|
SU954015A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| тi | |||
