СУКЦИНАТ 3,5-ДИАМИНО-1,2,4-ТИАДИАЗОЛА, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1996 года по МПК C07D285/08 A61K31/41 

Изобретение относится к производным 1,2,4-тиадиазола, конкретно к сукцинату 3,5-диамино-1,2,4-4тиадиазола формулы I

который благодаря высокой противогипоксической активности может быть использован в медицине в качестве антигипоксанта.

Предлагается сукцинат 3,5-диамино-1,2,4-тиадиазола, обладающий высокий противогипоксической активностью в условиях ишемии печени, а также повышенной стабильностью при хранении.

П р и м е р 1. Смешивают в измельченном состоянии эквимолярный. количества основания 3, 5-диамино-12, 4-тиадиазола и янтарной кислоты с 10-кратным по массе количеством безводного этилового спирта, кипятят с обратным холодильником 20 мин и выпаривают под вакуумом досуха. Получают с количественным выходом сукцинат 3,5-диамино1,2,4-тиадиазола в виде блестящих белых кристаллов, т. пл. 150^oС. По данным ТСХ на силуфоле полученное вещество не содержит каких-либо примесей; R_f 0,56 (элюент вода гексан, 20:1, проявитель раствор нитропруссида Na, феррицианида Na и едкого натра).

В результате потенциометрического титрования раствора исследуемого вещества в воде, а также в 70%-ном водном спирте водным раствором едкого кали найдено: Э 116,7. Вычислено для предлагаемой структуры: Э 117. В предлагаемой структуре имеются две группы с достаточно высокой кислотностью: СООН и NH₄ ⁺, и скачок рН получается после добавления 2 моль щелочи.

Полученный сукцинат отличается от исходного основания не только температурой плавления (основание плавится при 171^oС), но и по данным дериватографии. Так, нагревание соединения I сопровождается несколькими эндо- и экзомаксимумами. Эндомаксимум при 145^oС связан с его плавлением. Термограмма исходного основания резко отличается наличием преимущественных экзомаксимумов, что позволяет предположить разложение образца с выделением газообразных продуктов и, следовательно, его меньшую термическую стабильность. Эндомаксимум в точке 165^oС характеризует плавление диаминотиадиазола.

Найдено, С 30,61; Н 4,19; N 23,97.

C₆H₁₀N₄O₄
Вычислено, С 30,77; Н 4,30; N 23,92. ИК-спектр в КВг, ν, см^-1 3550, 3440, 3310, 3225 (NH): 2950, 2475, 2340 (⁺NH); 1820 пл, 1710 (СО); 1620; 1550 (6NН); 1430, 1420, 1310, 1180 1000, 1000, 980, 880, 840, 790,730, 700, 630, 580, 540, 460. На спектрограмме фиксированы дополнительные полосы поглощения в области 2475 и 1700 см^-1, имеющие уширенный контур, что соответствует валентным колебаниям групп ⁺NН и СО соответственно. Спектр ПМР, 100 МГц, d м.д. в Д₂О 3,93 с (NН), в ДМФА-d₇ 8,26 с 5 (NH), 10,00 c (NH).

Полученное вещество I не изменяетеcя при хранении в кристаллическом состоянии в течение 2 лет и в этом отношении превосходит гидрохлорид 3,5-диамино-1,2,4-тиадиазола (II).

П р и м е р 2. Вещество I синтезируют по методике, указанной в примере 1, но вместо спирта в качестве растворителя берут воду. Реакцию проводят при перемешивании при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь выпаривают досуха под вакуумом при 20^oС и получают с количественным выходом вещество, идентичное образцу, полученному в примере 1. Таким образом, соединение I получается и в таких условиях, при которых исключено ацилирование диаминотиадиазола янтарной кислотой. При таких же условиях взаимодействие диаминотиадиазола с уксусной кислотой не приводит к получению ацетильного производного, описанного в литературе, в результате обработки диаминотиадиазола уксусным ангидридом. Противогипоксические свойства вещества I. Сравнение противогипоксических свойств проводили на двух моделях. Первая из них гипобарическая гипоксическая гипоксия, создаваемая "подъемом" животных в барокамере. Белых мышей-самцов массой 18-22 г спустя 45-60 мин после внутрибрюшинного введения водных растворов испытуемых препаратов "поднимали" в барокамере по методике, предложенной Л.В.Пастушенковьм (1966), т.е. 5 км за 1-ю мин, далее со скоростью подъема 1 км/мин до 11 км, где делалась "площадка" длительностью 45 мин. Учитывали число выживших животных. Результаты опытов представлены в табл. 1. Дозы соединений I и II взяты в эквимолярных по содержанию 3,5- -диамина-1,2,4-тиадиазола отношениях.

В табл. 1 приведены отношения числа выживших животных к числу животных, взятых в опыт. В столбцах "о" отношения для соответствующих доз препаратов, в столбцах "к" для контроля.

Активность препаратов I и II в дозах, больших 40 мг/кг, не повышаясь. Во всех случаях использования веществ различия с соответствующим контролем по точному методу Фишера были достоверны при Р меньше 0,05. Также достоверными были отличия (при Р 0,03) эффективности соединения II в дозе 10 мг/кг от эффективности этого же препарата в других дозах, а также от эффективности других препаратов в любых дозах. Других достоверных отличий в активности препаратов не выявлено.

При экспериментальной проверке наличия антигипоксического действия янтарной кислоты, забуференной до рН 6,5-7,0, получены следующие данные: в дозе 40 кг/кг янтарной кислоты выжило в барокамере 0 животных из 20; в дозе 200 мг/кг выжило 3 животных из 20, а в контроле 2 животных из 20. Различия между всеми тремя группами недостоверны при Р>0,5. Доза 40 мг/кг взята исходя из массовых соотношений сукцината и 3,5-диамино-1,2,4-тиадиазола (мол.м. янтарной кислоты 118,1, а аминотиадиазола 116,1, т.е. в препарате они находятся практически в равных массовых соотношениях). Доза 200 мг/кг рекомендуется как оптимальная для защиты сердца при асфиксии. Таким образом, антигипоксическая активность в изученных дозах у сукцината весьма слаба, практически отсутствует.

Другая использованная модель циркуляторная гипоксия органа на примере ишемии печени. У наркотизированного кролика после лапоротомии пережимали гепато-дуоденальную связку на 90 мин. Препараты вводили животному в оптимальных защитных по отношению к гипоксии дозах за 2 ч до пережатия связки. После снятия зажима со связки животным вводили внутрипортально 10 мл 6%-ного раствора натрия гидрокарбоната, внутривенно 20 мл полиглюкина, а в течение 3 4 ч после окончания манипуляций 100 150 мл гемодеза. Регистрировали выживаемость по срокам, мочевину, аммиак, активность трансаминазаланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы в исходном состоянии и сразу после снятия зажима со связки. Результаты представлены в табл. 2.

Любой из показателей в контроле достоверен при Р меньше 0,05 и отличается от показателя в опыте. Различия биохимических показателей для препаратов II и I недостоверны. Различия в выживаемости между препаратами II и I достоверны при Р 0,035 по точному методу Фишера.

Предлагаемый препарат I достоверно более активен при ишемии печени, чем прототип вещество II.

Токсичность и терапевтическая широта препаратов. Острую токсичность всех веществ определяли по Беренсу при внутрибрюшинном введении. Терапевтический индекс рассчитывали как отношение ЛД₅₀ к оптимальной терапевтической дозе. Данные представлены в табл. 3. Все дозы указаны в эквимолярных по основанию количествах.

Таким образом, соединение I обладает лучшим противогипоксическим действием при циркуляторной гипоксии, проявляет это действие в меньших эффективных дозировках и не уступает по терапевтической широте и безопасности применения известному соединению. ТТТ1 ТТТ2

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к сукцинату 3,5-диамино-1,2,4-тиадизола, который проявляет противогипоксическую активность. Цель - выявление более активных соединений, обладающих повышенной стабильностью. Получение ведут реакцией эквимолярных количеств основания 3,5-диамино-1,2, 4-тиадиазола и янтарной кислоты с 10-кратным по массе количеством безводного этилового спирта. Выход количественный, т. пл. 150^oC, брутто- ф-ла С₆Н₁₀N₄O₄. Новое соединение более активно при ишемии печени по сравнению с известным соединением. З табл.

Сукцинат 3,5-диамино-1,2,4-тиадиазола формулы

обладающий противогипоксической активностью.