Способ получения пептидов Советский патент 1990 года по МПК C07K5/62 C07K5/65 A61K38/05 

Изобретение относится к способу получения пептидов новых биологи чески активных соединений, которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения - способ получения новых пептидов, малотоксиЧных, обладающих высокой антигипертензив ной активностью, более устойчивых in vitro.к гидролизу.

Используются следующие сокраще ния: АСЕ . ангиотензинконвертирую щий фермент, Ala - Ь-аланин, Arg - Ь аргинин, Asp - Ь- аспарагиновая кис лота. Бок трет бутилоксикарбонил, Бпок 2-(4 бифенил)2 пропилокси карбонил, Бз - бензоил, Кбо бензил оксикарбонил, Ддок ,L Димeтил 3,5 диметилоксикарбонил, Гли гли

церин. His - L-гистидин, 111 - L-изо- лейцин. Leu - L-лейцин, Phe - L-фе- нилаланин, Фпок - 2-фенилизопропил- оксикарбонил, Pro - L-пролин, ДРго - Ь-3,4-дегидропролин, Ser - Ь сернн, Тгр - L-триптофан, Туг - Ь тирозин, Val - L-валин.

Системы растворителей для хроматографии в тонком слое силикагеля (по объему):

R.J (I) метанол - хлорО(Ьорм 1:1; 4 бензол - вода н-бута-

НОЛ 9:1:9;

уксусная кислота - вода

R

R

(3) (4)

н-бутанол 26:24 :150; н-бутанол - пиридин - уксусная кислотл вода, 15:10:3:12;

05. О

со

4

сд ел

см

I - (5) - н--бу ганол - уксус.нля кислота этилацетат вода

, (6) хлороформ метанол - уксусная кислота 2:1: : 0,003;

-4 н-бутаноц уксусная кислота - вода 4:1:1;

К (8) этилацетат уксусная кислота 38:2.

ЯМР-С тектры получены при 60 МГц,,

значения концентрация с ингиблрующей активностью по

отношению к лревращающему антиотен- син фермеrtту

Система испытания: 1 мл инкуби :руемой смеси, содержащей -0,6 мл бо :ратного буфера, 0,2 мл 17,5 мноль бензоил С1у-Н1э-Ьеи в боратном буфе ре, соединения в боратном буфере и ;раствор фермента, инкубирование при Б течение 60 MHHi,

Гэоратный буфер: 0, 1 М раствор бор ной кислотыj содержащий Oje М NaCl и 0,1 М , содержащий 0,8 М - NaCl, сме1ливают и доводят до рН 8,3. АСЕ порошок легкого кролика в ацетоне. Определения: УФ поглощение при 228 нм после экстрагирования бензоил : С1у этиладетатом,

; П р и М е ре Ш 3(К трет бутил :оксикарбонил Ь фенилаланилтио)2-В ; метилпропаноил Ь пролин«

К раствору 2,65 г , ГЬе в ;20 МП ТГФ при 20°С добавляют 1,95 г 1 },Н карбонилдиимидазола- (КДИ) в 20 мл ТГФ и результирующий раствор перемешивают при 10°С в течение 1;Ч Затем добавляют 2,17 г М Смеркапто 2 В -метилпропаноил)Ъ Пролина при и перемешивают 10 мин при той же температуре и еще 50 мин перемеши вают при комнатной температуре. Раст воритепь отгоняют при пониженном

К1давлении при 30 С и к остаткз добав ляют 200 мл AcOEt и 50 мл воды.Сйесь доводят до рН 1,5 добавлением 2 н раствора НС1 при перемешивании и . охлаждении на ледяной ванне.

Органический слой дважды пpo fывa- ют насьпценным раствором NaCl и орга - л- ческий растворитель от1 оняют на центробежном испарителе после осупе - ния над безводным MgSO(

Остаток ОЧИП1ЭЮТ с пс моюью хрома - .cor рафии в колоь-ке на Ю (2 см к X 5) см), что дает 4,49 г (97-;) N (М рет бутилокси;сарбонил Ь

Q

5

0

5 о

г О с

,,

1{)еннлаланилтио) -2 П метил ропаноя. L-пролина, R (1) 0,6; К, (2) 0,76, 0,82; RJ (3) 0,68, 0,72; аминокислотный анализ: рН 1,00, Pro 1,00.

К раствору 1,0 г указанного соеди нения в 2,1 мл анизола при перемешивании и охлаждении на ледялой ванне добавляют 1,61 МП трифторуксусной кислоты (ТФУК) и перемешивают I ч при комнатной температуре. Растворитель отгоняют при пониженном давлении и 30°С, к остатку добавляют эфирный раствор НС1 и результирующий осадок несколько раз промывают диэти- ловым эфиром.

К суспензии указанного осадка в 15 мл AcOEt при перемешивании и охлаждении на ледяной ванне добавляют 0,793 мл N-этилморфолина и 0,243 мл бензоилхлорида. Реакционную смесь перемешивают 1 ч при комнатной температуре. После добавления 2 мл воды к смеси ее рН доводят до 1,0 добавлением 2 .н раствора НС1 при перемешивании и охлаждении на ледяной ванне.

Органический слой дважды промывают насьш1енным раствором NaCl, а органический растворитель отгоняют на центробежном испарителе после осуше- ния над безводным .

Остаток очищают хроматографией в колонке на SiO (2 см х 33 см), что дает 800 мг (81,0%) продукта в виде масла.

В указанных условиях получают следующие соединения

N (N бeнзoил-L-фенилаланно тио)-2-В Метилпропаноил -L-пролин; мол. М. ; (LDx -116,8 ; R (1) 0,52; R (2) 0,7; R .(3) 0,56; R (4) 0,61; R (5) 0,75; R (6) 0,56; R (7) 0,74.

ЯМР u (CDCl, + ): 1,19 (ЗЫ, шир.д., СНз); 1,5-2,4 (4Н,:м., Cjje); 2,5-3,3 (5Н,:м., СИ. и СН); 3,3-3,8 (2Н,:м., СНг); 4,0-4,4 (1Н,:м., CJi); 4,8-5,2 (1Н,:м., СН); - 7,23 (5Н,:с., ароматические jj); 7,,9 (5Н,:м., ароматические Н); 3,4 X .

N (3-Ь-фенш1аланилтио) имлпропанг ш - -пролин: Rf (1) 0,51j Ri (4) 0,52; R| (5) 0,51; Ц (8) J3,l. .

. (N -бeнзoил D фeнилaлaнил.- ги о } 2НЗ Метилпропа iiovunl Ь -пр-г л нн т

I:ol. 25,1 ; R, (6) 0,56; R, (7) 0,74;

ЯМР 8 (CDCl3 + CDjOD): 1,19 (3H, шир.д., CH,); 1,5-2,4 (4H, м., СНг); 2,5-3,3 (5Н, м., CH и 3,3-3,8 (2Н,:м., CHg); 4Го-4,4 (1Н, м., СД); 4,8-5,2 (Ш,;м., СН); 7,23 (5Н, :с,, ароматические Н); 7,2 7,9 (5Н,:м,, ароматические Н),

(N -бензоил-Ь-фенилаланил- тиo)-пpoпaнoилJ-L-пpoлин: R (1) 0,58; RI (2) 0,78; R, (3) 0,59; Ч (4) 0,59.

Н (Ы -бензоил-Ь-фенилаланил- тио)пропаноилJ-L-3,4-дигидропролин: R (2) 0,73; R (3) 0,59; Rj (4) 0,615; R (5) 0,73.

(Ы -бензоил-и-аланилтио)-I-2-D-мeтилпpoпaнoилJ-L-пpoлин:WD -103°; R, (6) 0,58; Rr (7) 0,75;

ЯМРО (CDCl): 1,19 (3H, шир.д., CH,); 1,48 (3H, д., CJs); 1,7-2,4 (4H, M,, CHj.); 2,5-3,2 (3H, м., CJ и QHj); 3,25-3,8 (2H,:м., CH); 4,2-4,7 (1Н,:м., CH); 4,89 (IH, кв., CH); 7,06 (IH, д., NH) ; 7,3-8,0 (5H,;M., ароматические Д); 10,21 (IH, с., COOH).

(1 Г ;-бензоил-В-триптофилтио)- -2-В-метилпропанош13-Ь-пролин: ИР -33, Rr (6) 0,56; R, (7) 0,73;

ЯМР Ь (CDjOD): 1,1 (ЗН, шир.д., Cji,); 1,65-2,3 (4Н,:м., CJi2.); 2,6- 3,1 (ЗН,:м., СНг); 3,2-3,7 (4Н, м«, СЯ и СН2); 4,05-4,35 (1Н, м., Cli); 4,8-5,1 (1Н, м., CJ); 6,88-7,82 (10Н,:м., ароматичес сие Н).

(N -бензоил-0-лейцилтио)-2- -В-метилпропаноилЗ пролин: LtviJ-p RI (6) 0,58; R 7) 0,82;

ЯМР и (СВзОВ): 0,99 С6Н, шир.д., СНз); 1,22 (ЗН, шир.д., СНз); 1,5- 2,4 (7Н, м., СН и СНг); 2,5-3,15 (ЗН, м., СД и СНг,); 3,4-3,9 (2Н,-:м., ОНг); 4,1-4,45 (1Н, м., СН); 4,6-5,0 (1Н, м., QH); 7,5-8,1 (5Н,:м., ароматические Н).

1ч - р-(N -трет-бутоксикарбонил- -Ь-аланилтио)-2-В-метилпропаноилЗ- -L-пролин: .р -62,5°; Кг (6) 0,59 Rr (7) 0,73;

ЯМР U (CDCl): 1,2 (ЗН, шир.д., CJij); 1,24 (9Н, с., СН,); 1,39 (ЗН, д., СНз); 1.7-2,А (4Н, м., qij); 2,5- 3,3 (ЗН, м., СН и СНз); 3,3-3,9

(2Н,:т., СНр; 4,1-4,9 (2Н, м., Ш) ; 7,85(1Н, с., СООН).

N (1 -ацетил-и фенилаланилтио) -2-В:7мет1тпропаноил1-Ь-пролин: мол, 5 вес 406; R (1) 0,47; R (2) 0,65; Rf (3) 0,45; R (5) 0,64; R (6) 0,54; R (7) 0,59; аминокислотный анализ: Phe 1,00, Pro 0,89;

Q ЯМР (CDCl): 1,17 (3H, шир.д.,. СНз); 1,75-2,35 (4Н,:м., СН); 1,91 (ЗН,:с., CH,); 2,55-3,25 (5Н, м., Cji и CEj); 3,4-3,8 (2Н, :м., CHj.); 4,1-4,6 (1Н, м., CjJ); 4,6-5,0 (Ш,

5 м., СН); 6,63 (1Н, д., NH); 6,82 (1Н, с., COOj) ; 7,17 (5Н, шир.с., ароматические Н)

и -LЗ-(N -циклoпeнтилкapбoшiл- -L-фенилаланилтио)-2-D-метилпропа-

0 ноил -1-пролин: Rj- (1) 0,48; Rf (2) 0,73 ; R (3) 0,62; R. (5) 0,72.

(N -циклопентилкарбонил- -Ь-лизил-Ъ-Фенилаланилтио)2-В-ме- тилпропаноил7-Ь-пролин: Rr (3) 0,16;

5 R () 0,52; R| (5) 1,58.

N - 3-1ч-пиро-Ь-глютамил-Ь-фенил- ал анилти:.)-2-В-метил11ропаноил -Ь- пролин: R. (I) 0,43, 0,45; R.f (2) 0,63; R.f (3) 0,48; Rf (5) 0,75; ами0 НОКИСЛОТНЫЙ анализ: Giu 0,99, Phe 1,00, Pro 1,07.

(N -адетил-Ь-фенилаланил- тио)пропаноил -Ь-пролин: ,4 ;

i

N (N -ацетил-D-аланилтио)-2-

-2-В-метилпропаноил31-Ь-пролин:| р(|

6

N (N -пропаноил-В-аланилтио)-2-В-метилпропаноил -пролии:;: 0МД)62.

N - 3-(N -бутаноил- В-а;1анилтио) - -2-В-метилпропансил -L-пролин: .-j

«R7 q

(

N - 3-(N -цйклопентилкарбонил-D-

1

5 -аланилтио)-2-В-мeтилпpoпaнoилJ-L- пролин:C(3.D 7,2°; R. (6) 0,62; R (7) 0,74;

ЯМР i (СВС1з - СВзОВ): 1,2 (ЗН, шир.д., СНз); 1.38 (ЗН, д., СН2); 0 1,5-2,4 (12Н, м.; СН); 2,4-3,2

(4Н, м., СН и СН); 3,3-3,8 (2Н,-м., СН2)4,2-4,8 (2Н, м., Q.O.

N - 3-(N -пpoпaнo ш-j) pиптoфил- тиo)-2-В-метилпропаниил (Ь-пролин: 5 U(ID 28,6°; R.f (6) (Г, К, (7) 0,75;

ЯМР 5 (CBjOB): 1,02 (3IU Те, СНз); 1,08 (ЗН, шир.д., СИ:,); I,S -2,5 (4Н, .м., СНг); 2,2 .(2Н, кв,, Cii,) ; 2,5

.3,1 (ЗН,:м., CliH СН); 3,1-3,9 (4Н, .м., СН); 4,4,5 (Тн, м,, СН); 4,7- 5,0 (1Н,;м., СН);.6,95-7,8 (5Н,:м., ароматические Н)„

N З-Си -ацетил 1 лейцилтио)-2 В метилпропаною1 Ь пролин: , - - 29,5°; R (6) 0,55; R.(7) 0,59.

N ацетил-В валилтио)-2 - В- метилпропаноил 1 Ъ Пролин: Гсх т - 73,8°. - Проведены биологические испытания Соединений, полученных в условиях предлагаемого способа.

Проведены предварительные испытания на крысах, сравнивающие противо- гипертонические характеристики кап- оприла и четырех соединений по изобретению.

В табл,1 показан средний процент (%) ингибирования индуцированного по- вьшенного давления, вызванного введением 0,4 ммоль/кг каждого из указанных соединений.

Из приведенных данных видно, что йесмотря на колебания эффективности в зависимости от времени и конкретного использования предлагаемого соединения проявляются эффекты, которые сопоставимы с эффектом каптоприла при выбранном уровне дозировки. Причем столь высокие уровни дозировки каптоприла сопровождаются сравнительно высокой частотой появления неже лательных побочных эффектов у чело- ;века - это обусловливает много меньший уровень дозировки при реальном клиническом лечении людей.

30

35

;В. Инкубационная смесь: 1 мл 5%- ного гомогената печени-крыс (0,1 М калий-фосфатный буфер, рН 7,4) +1 мл испытуемого соединения 2 х в том же фосфатном буферном растворе. Метод анализа: 100 мкл отбирают из инкубационной смеси, затем добавляют шесть капель, 1,0 н НС1 и 5 мл этил- ацетата. После механического перемешивания в течение 10 мин и центрифугирования в течение 10 мин упаривают отобранный этилацетатный слой. Остаток растворяют с помощью 1 мл воды, затем добавляют 0,5 мл 0,4 М фосфатного буфера (рН 6,85) и 5 мкл 5 X X 10 М БИФМ и оставляют стоять в течение 40 мин при 0°С. Измерение

Предлагаемые соединения существен- проводят на линии возбуждения 310 нм

0

5

5

0

5

в условиях сильно гидролитической среды и сравнительно длительной сохраняемостью. Представленные данные in vitro демонстрируют характерную стабильность многих из этих соединений в условиях разлагающихся сред плазменных и тканевых гомргенатов (табл. 2)о

Использованные методики гидролиза in vitro. .

:А. ИнкубациЪнная смесь: 1 мл 10%-, ного гомогената печени крыс (0,1 М калий-фосфатньй буфер, рН 7,4) + 1 мп испытуемого соединения 2 х в том же фосфатном буферном растворе. Метод анализа: 100 мкл отбирают из инкубационной смеси, депротеинизиру ют добавлением 200 мкл этанола и центрифугируют. На жидкостную хроматографию высокого давления направляют 20 мкл надосадочной жидкости.

;В. Инкубационная смесь: 1 мл 5%- ного гомогената печени-крыс (0,1 М калий-фосфатный буфер, рН 7,4) +1 мл испытуемого соединения 2 х в том же фосфатном буферном растворе. Метод анализа: 100 мкл отбирают из инкубационной смеси, затем добавляют шесть капель, 1,0 н НС1 и 5 мл этил- ацетата. После механического перемешивания в течение 10 мин и центрифугирования в течение 10 мин упаривают отобранный этилацетатный слой. Остаток растворяют с помощью 1 мл воды, затем добавляют 0,5 мл 0,4 М фосфатного буфера (рН 6,85) и 5 мкл 5 X X 10 М БИФМ и оставляют стоять в течение 40 мин при 0°С. Измерение

проводят на линии возбуждения 310 нм

Изобретение касается пептидов, в частности получения пептидов общей ф-лы R-(A)-S-CH₂-CHR₁-C(O)-R₂, где R-бензоил, циклопентакарбонил, ацетил, пропаноил, бутаноил или водород, A = L-и D-фенилаланил, D-аланин, D-триптофан, D-лейцин

R₁=CH₃

R₂=L-пролил, обладающих антигипертензивной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных и устойчивых к гидролизу (IN VIRTO)пептидов. Синтез ведут реакцией соединения H-(A)-S-CH₂-CHR₁-C(O)-R₂ с R-галогенидом при указанных значениях A, R, R₁ и R₂. Новые пептиды в сравнении с каптоприлом активны при концентрации в 2,5 раза меньшей и, более длительном действием. 4 табл.

но более стабильны, чем каптоприл. как в биологических средах, так и в прочих условиях. Это доказывается их стойкостью к немедленному гидролизу

N

0 БИФМ

С.0,154 М фосфатньй буфер (рН 7,5) 2,5% 105.000Х g надосадочная жидкость 10 мМ целевое соединение

37 °С,

Всего:2,1 мл

О, 30, 60,4120, 180 мин 100 мкл инкубационной смеси яетанол 200 мкл I

встряхива}гае и центрифугирование 10 л надосадочной жидкости ЖХВД

и линии испускания 365 нм (предел: 0,14 г каптоприла),

БИФМ: (2-бeнзимидaзoиJ фе- нил З-малеимид О

n+HS-RФлюоресценция

1,5 мл

0,5

0,1

У

Условия ЖХВД: колонка Бондапак С18, смесь растворителей 0,1 гидроокись тетраметиламмония- детек тор; 220 нм, расход 1 мл/мин,

D.Инкубационная смесь: 1 мл крысиной плазмы (0,1 М калий фосфатный буфер, рН 7,4) + 1 мл раствора испы туемого соединения (400 мкг/мл того же буфера). Метод анализа: 100 мкл отбирают из реакционной смеси, зате депротеинизируют добавлением 200 мк EtOH и центрифугируют, 20 л надоса- дочной жидкости направляют на ЖХВД.

E.Инкубационная смесь: 1 мл 20%

.ного гомогената кишечника крыс (0,1 калий осфатный буфер рН 7,4) + 1 м раствора испытуемого соединения (400 г/мл того же буфера). Метод анализа: 100 мкл отбирают из реакционной смеси, затем депротеинизи руют добавлением 200 мкл EtOH и цен рифугируют, 20 мкл надосадочной жидкости направляют на ЖХВД

F.Инкубационная смесь: 1 мл 20%- ного гомогената крысиной печени (0,1 М калий-фосфатный буфер, рН 7,4) + 1 мл раствора испытуемого соединения (400 г/мл того же буфера). Метод анализа: 100 мкл отбирают из peaкциoннoй смеси,- затем депротеинизируют добавлением 200 мкл EtOH и центрифугируют, 20 мкл надосадочной жидкости направляют на ЖХВД,

Характерная стабильность этих соединений подтверждается данными in vivo, демонстрирующими, что в большинстве случаев существенньй процент исходного соединения остается в кровотоке в течение многих минут после введения крысам.

Внутривенное введение. Двум крысам расы 5D делают внутривенную инъецию 36 мг (Ы-бензоил-Ь фенилала нш1Тио)-2-В-метилпропанойл1-Ъ-про- лина (Bz-L-Ehe-SQ) и (N-бензоил-р-фенилаланилтио)-2-В-метилпро- паноил -Ь-пролина (Bz-L-Phe-SQ) в 0,5 МП 0,1 М NaHCOj. Крысы имеют массу каждая 360 г и голодают в чение 21-ч до инъекции. Концентра- ции в плазме введенных инъекций соединений -и их гидролитов, бензоил- -D-фенилаланина (Bz-EbPhe) и бензоил -L-фенилаланина (Bz-L-Phie) измеряют с помощью жидкостной хроматографии (табл, 3).

Оральное введение. 100 мг К,3-(бензоил -Ь -фешшаланилтио)-2

0

5

9455

10

1)-метилпропаноил1-Ь-пролина на килограмм массы тела вводят орально крысам массой 350 г, голодавшим в течение ночи, Испытательньш раствор содержит 20 мг (бензоил-Ь-фе- нилаланилтио)-2-В-метилпропаноил - L-пролина в 1%-ном водном растворе гуммиарабика. Пробы отбирают периодически с помощью интактного кровообращения в энтерогепатической системе Концентрации (бeнзoил-L-фeнил- аланилтио)-2-D-метилпропаноил -L-про- лина и его гидролита, бензоил-Ь-фе- нилаланина в плазме из воротной вены и в токе желчи измеряют с помощью жидкостной хроматографии (табл,4),

В указанных условиях каптоприл быстро разлагается до своего дисульфида и других метаболитов, которые неактивны как ингибиторы. По прощест- вии 60 мин инкубирования с плазмой крыс, человека, обезьяны и собак количество леизменного S-каптоприла

30

35

составляет соответственно 0,7, 10 и 25%, основной продукт дисульфид, Надосадочная фракция 9000 х g гомогената печени, почек и кишечника крыс почти полностью переводит кап- топрил в его дисульфид и другие продукты в течение 120 мин.

По крайней мере, одно из соединений по изобретению (К-циклопен- тил кар б о нил-В-ал анилтио)-2-В-ме тил- пропаноил -Ь-пролин (cpc-B-aLa-SQ) демонстрирует не снижающуюся эффективность «а протяжении 90-180 мин после орального введения (табл, 1).

дд Каптоприл достигает пиковой эффективности к 90 мин, а затем она. падает. По прошествии 180 мин (Ы-цикло- пентилкарбонил-В-аланилтио)-2-В-ме- тил -Ь-пролин более эффективный ин45 гибитор без каких-либо признаков ослабления его реакции.

Хотя ни одно из указанных соединений еще не испытывалось на людях, подобное испытание проведено на со-

Q единении, близком аналоге, N(3-(N- -циклогексилкарбонил Е)аланилтио)-2- -метилпропанонл Ь Г1ро.пниа (chc-В- - аЬа- 2- В) метилпропанонл Ь-пролина, Это соединение идентлчпо (N- -циклопентШ1карбонил-В ал,чнилтио)- -2-метилпропанош1-Ь пролиновому соединению, с исключением, что в концевом кольце присутствует дополнительная СН2 грулпа.

5

Сравнительные исследования на здоровых людях показали, что действие 40 мг (0,096 ммоль) (Ы Цикло гексилкарбонил В аланилтио) 2 0 ме тилпропаноил Ь пролина продолжается ; oльшe, чем действие 100 мг (0,46 ммоля) каптоприла.

Полученные результаты подтвержда фт большую продолжительность дейст ия сложнотиоэфирных соединений кап i oпpилa с ациламинокислотами по срав йению с самим кантоприлом. Кроме того, эти соединения более удобны в Обращении, чем каптоприл, благодаря Своей более высокой химической ста Ьильности. Срок хранения каптоприла Необычно короток, его.период полураспада в водных растворах составля ет приблизительно 30 мин. Сухой по рошок также разлагается более, чем -на 50%, спустя три недели при 85 С«

Соединения по изобретению, не имея свободной меркаптогруппы, огра нически более стабильны. Растворы этих соединений могут храниться бр лее длительное время. Например, 1 мг/мл (Ы бензоил--Ъ фенилала нилтио)2 В-кетилпропаноил | Ь -про- . лина в 1:1 .метанол/водном раствори теле не дают никаких признаков раз ложения по проишествии шести часов хранения. Кроме того, соединения по :изобретению не требуется смешивать

N 3(Ы Циклопентан

карбонил 1 -аланилтио),

2 В метил пропаноил1

Ъ-пролин

(N TpeT 6yTmi

оксикарбонил 1)аланил

тио)2 В метил Пропанош{ 1.пролин

N З- (К Ацетил 1)л ей

цилтио))метилпрО

паноил Ъ Пролин

N 3(В-Аланилтио 2

В метил-пропаноил1

L-пролин

Каптоприл

12 15 21 35 42 42 42

7 11 12 22 26

15

9 12 17 31 31 34 21

14 28 35 41 36 31 26 12 23- 46 56 58 48 37

0

5

0

с восстановителем в порошковом виде, чтобы избежать протекания реакций ди меризации, которым подвержен капто прил. Таким образом, соединения, по лученные в условиях предлагаемого способа, активны, малотоксичны и бо лее устойчивы при хранении, чем каптоприл.

Формула изобретения Способ получения пептидов формулы

R-(A)-S-CH2-CH-C-R2 Rl

где R - бензоил, циклопентакарбонил, ацетил, пропаноил, бутаноил, водород;

А - L и D - Phe, D - Ala, D - Trp, D- Leu;

5

0

(

CH

3i

Ry L-пролил,

отлича.ющийся тем, что осуществляют взаимодействие соединения формулы

О H-(AbS-CH2-CH-cC

Rt

с К-галогенидом,

значения А, R, R, R 2 имеют указан

ные значения.

Таблица 1

7 11 12 22 26

15

9 12 17 31 31 34 21

14 28 35 41 36 31 26 12 23- 46 56 58 48 37

Испытуемое сое,щ1не)ше

(..,(THo)- 2 Ь метилпрО 1анонлТ Ь П1ро «

ЛИН

N- З-(К-Адетил-и-феннлалпнил

тии) -2 В Мотдшпропа1юшП Ь

пролин

N (Ы Циклопентанкарбонил)- 2-П метилпропаношГ)

ЛИН

N З(Н -ЯензоилНУ фешшала

н1штио)) -метилпропаношГ

L пpoлин

(N Бeнзoил D-фeнилaлa- )2 l мeтилпpoпa oил Ь- пролин

N-- 3 ( е и 3 о пл - е йцил тя о ) 2 -1 -ме гилпропанош17|- Ь при

ЛИН

N-{j}(N IIpoпaнoнл D тpиnтo- филтиo) 2 D мeтилrlponaнoшI Ъ пролин

(Ы БутнлоксПКарбонил

1 -аланилтио)2 0 метил

пропаношГ -Ь пролин

N ГЗ(К-Ацетнл 0 лейдил

тио)- 2 В метшп ропаноил Ь ПрОЛИН

N ( а НИЛ т но 2 D -M е тил

пропаноил) Ь Пролин

N 3(Н Ацетил-1 изолейцил

тио )21) - метил пропаноил Ь пролин

Т а б л II ц а 2

Методика

Время инкубирования, мин

г... -p..-...-.,..-,. . . „.

10 I 30 60 80 120 80

28 18 28 18

25

14

6756

8593

9592- 52

73

92

25

80 10

А А

А А

В В А D Е А D Е

83 -3123 - 95,087,0 86,8 88,6

9694

9897

105,199,6 97,0 92,1

6552 -

А

А С

В С

99,4 93,5 92,1 82,4 Таблица 3

Отбор проб из

Испытуемое соединение

я

3(Бензоил Ь фенилаланил

tHO) 2-1 метилпропаноил 1

Ь- пролин

N 3(Вензоил Ь фенилаланил тио) 2- 1)метилпропаноил |

Ь- пролин

Бензоил Ъ енилаланин

Таблица 4

Стабильность соединений к гидро лизу при оральном введении, моль/мл, при времени, мин

15

л;

30

120

0,010 0,312

0,002 0,054

0,677 0,786

0,102 0,164