Способ определения содержания морфоциклина Советский патент 1992 года по МПК G01N21/64 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения морфоциклина и может быть применено для качественного и количественного определения этого соединения при биохимических, токсикохимических и биофармацевтических исследованиях.

Целью изобретения является повышение чувствительности и избирательности анализа биоматериалов.

Способ осуществляется следующим образом.

К анализируемой пробе биологического материала (кровь, моча, слюна) прибавляют этилацетат, встряхивают, центрифугируют и к аликвотной части слоя этилацетата прибавляют диметил- формамид, магния ацетат и (Ьлуоримет- рируют при во: :)ужде}1ии флуоресценции с максимумом 425 нм, излучении флуоресценции с максимумом 490 нм.

Линейная зависимость между концентрацией морфоциклина и интенсивностью флуоресценции лежит от OjS до 20 мкг/кп (см,табл.1), Оптинапь .ная концентрация раствора ацетата магния составляет 2% (см.табл.2). Экстрация морфоциклина из крови и мочи при его концентрации 20 мкг/мл достигается полная.

Пример 1. Качественное определение морфоциклина препарата.

К 1 - 2 мг препарата прибавляют 4 - 5 мл диметилфсрмамида, I мл 2%-ного раствора ацетата магния,перемешивают и в ультрафиолетовом свете наблюдают желто-зеленую фйуоресцен- цию;

П р и м е р 2. Качественное опре- деление морфоциклина в биоматериале (крови и моче).

о:

К I МП плазмы крови или мочи прибавляют 2 мл буферного раствора с . рН 5-6, 3 МП этилацетата и встряхивают 3 мин. Затем центрифугируют при 3000 об/мин 2 мин. К 1 мп этилацета- та прибавляют 8 мл диметилфо1)мамнда, 5 МП 2%-ного раствора ацетата магния перемешивают и флуориметрируигг. В

НИИ способ для определения морфоцик- лина в биологических жидкостях. Способ обладает также большей избира- тельностью за счет образования внут- рикомплексного соединения морй оцикли- на с катионом Mg в среде . Подобной реакции не дают, все антибиотики, которые могут одновременно назнаультпяА«,„о ---.-.-. ... п ки, которые могут одновременно казн

ГС:: :г„ -- -i- .оль„ь,„ (.р,„™ „.„„„„„,„„„

тую фпуоресцеицию.

Примерз. Количественное определение морфоциклина в крови и моче.

К 1 мл плазмы крови или мочи прибавляют 2 мл буферного раствора с рН 5 - 6,3 мл этилацетата и встряхивают 2 мин , центрифугируют 2 мин при 5000 об/мин. К 1 мл слоя этилацетата прибавляют 3 МП диметилформами- да. 1 мл 2%-ного раствора ацетата магния в ДМФА перемешивают и Лпуо- риметрируют относительно стандартного раствора мор(Ьоциклина, для чего в ряд пробирок прибавляют 0,1, 0,5, 1,00 мл стандартного раствора морфоциклина в диметилформамиде, с содержанием 50 мкг/мл, соответственно

15

20

25

g, t у I PUI

г.7,ного раствора ацетата магния в ди метилформамиде, перемешивают и фпуо- риметрируют одновременно с испытуемыми растворами.

Таким образом, способ позволяет повысить чувствительность определения в 50 раз по сравнению с прототипом, что позволяет использовать дангруппы цедзалоспоринов, группы стреп- томицина, антибиотики-аминогликозиды, антибиотики макролиды, группы лево- мицитина, группы рифампицина,разных групп линкомицин гидрохлорид,ристо- мицин сульфат, фузидин, натрия,поли- миксин сульАат, грамицидин, нистатин, леворин, амфотерицин В) и сульфаниламиды.

Формула изобретения

Способ определения содержания морфоциклина, включающий обработку анализируемой пробы химическим том и измерение оптической характеристики полученного продукта, по величине КОТОРОЙ ПРОВОДЯТ о пре;ел:н е, отличающийся тем, что с . - вительности

8.9, Я,5, 8 мл диметилформамида, мл . « нительности „ 2%-ного раствора ацетата магния в да- ° лов биоматериа Редварительио экстрагиРУ т-из биоматериала этилацетатом, экстракт растворяют в диметилформамиде, в качестве реагента использу- 35 измеряют интен- при

длине волны возбуждения 425 им и дпи- не волны регистрации 490 нм.

Таблица

Зависимость интенсивности флуоресценции внутрикомплексного соединения морфоциклина с магнием от концентрации морфоциклииа

НИИ способ для определения морфоцик- лина в биологических жидкостях. Способ обладает также большей избира- тельностью за счет образования внут- рикомплексного соединения морй оцикли- на с катионом Mg в среде . Подобной реакции не дают, все антибиотики, которые могут одновременно назнаки, которые могут одновременно казн

-i- .оль„ь,„ (.р,„™ „.„„„„„,„„„

-i- .оль„ь,„ (.р,„™ „.„„„„„,„„„

группы цедзалоспоринов, группы стреп- томицина, антибиотики-аминогликозиды, антибиотики макролиды, группы лево- мицитина, группы рифампицина,разных групп линкомицин гидрохлорид,ристо- мицин сульфат, фузидин, натрия,поли- миксин сульАат, грамицидин, нистатин, леворин, амфотерицин В) и сульфаниламиды.

Формула изобретения

Способ определения содержания морфоциклина, включающий обработку анализируемой пробы химическим том и измерение оптической характеристики полученного продукта, по величине КОТОРОЙ ПРОВОДЯТ о пре;ел:н е, отличающийся тем, что с . - вительности

. « нительности „ лов биоматериа

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения морфоциклина, и может быть применено для качественного и количественного определения этого соединения при биохимических, токсикохимических и био- фармацентических исследованиях.Цель - повышение чувствительности и избирательности определения. Способ заключается в экстрагировании анализируемого вещества этилацетатом из биоматериала, прибавлении диметилформами- да и ацетата магния с последующим измерением интенсивности флуоресценции с максимумом возбуждения при 425 нм и излучения при 490 нм. 2 табл. С S

Концентрация, мкг/мл

Относительная интенсивность флуоресценции,%

Таблица Зависимость интенсивиости флуоресценции комплекса мор- фоциклина с магнием от кон- центраш и ацетата магния в, диметилформамиде (кон- .центрация морсЬоциклина 20 мкг/мл).

Концентрация ацетата магния, %

0,1 0,5 1,0 2,0 3,0

Относительная интенсивность флуоресценции,Z

36 73 82 82 82