Способ количественного определения 1-метил-4-(N-метилпирролидил-1)- -карболин гидрохлорида Советский патент 1981 года по МПК G01N21/64 

1 мл полученного состава прибавляют 9 мл дистшшированнсЛ воды и 3 капли концентрированной азотной кислоты, перегмешивают и флуориметируют по отношению к стандартному водному раствору с сод жанием 5 мгк/мл бревиколлина гидрохлор ода к 10 мл которого гфибавлено 3 капли ксжцентрированной азотной кислоты, и флуориметрируют одновремен но с- испытуемыми растворами. Результаты определения бревиколлина гидрохлорида в 1%-ном растворе представ лены в табл. 1. Пример 2. Определение бревиколлина гидрохлорида в крови и моче. К 1 мл плазмы крови или 1 мл мочи прибавляют 2 капли ОД н.раствора едкоГ натра и 10 мл эфира и экстраг1фуют в течение 2 мин. Эфирный слой спивают в выпарительную чашку. Экстракцию повторяют дважды. Эфир отгоняют на водяной бане. К остатку прибавляют 10мл дистиллированной воды, 3 кацли кониентриро шной азотной кислоты, перемешивают и флуориметрируют по отношению стандартных растворов с содержанием 0,5:1:3 или 5мкг/мл бреви коллина гидрохлорида. Для этого к 1О мл 8 94 стандартного раствора прибавляют 3 капли концентрированной азотной кислоты и флуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами. В искусственных смесях, при содержании более ОД мкг/мл бревиколлина гидрохлорида, си определяется полностью (100%). Спектр возбуждения флуоресценции полученного раствора находится в области 28О -.430 нм с максимумом 380 нм, а спектр излучения флуоресценции находится в области 400-520 нм с максимумом 44О нм. Прямолинейная зависимость между интенсивностью флуоресценции и концентрацией бревиколлина гидрохлорида находится от 0,О1.до 8 мкг/мл (табл. 2 и 3). Интенсивность флуоресценции не изменяется в течение 2ч. В лекарственной форме сопутствующие ингредиенты не влияют на интенсивность флуоресценции. При содержании 0,1мкг/мп бревиколлин гидрохлорид в крови или моче открьшается полностью (1ОО%), т.е. компоненты крови и мочи не влияют на интенсивность флуоресценции. Чувствительность известного метода 0,5 мкг/мл, предлагаемого - О,01кмг-мл.

Флусриметрйческое определение бревиколлина гидрохлорида в 1%-«ом растворе (на исследование взято По 0,3 мл 1%-ного раствора).

0,0098 О,О098 О,О1ОО О,О098 О,ОО96 0,ОО96 О,0098 О,ОО98 0,ОО96 О,ОО98

Таблица I

0,О097 2. Ю

.-

IlO

.-4

0,ОО97 Ila

8598896

Завйснмосгь ингенснвносги фпуоресценцив бреви- коплина гидрохлорида ( мкг/мл) ог конпентрач-, ции азогмой кислоты,

Количество капель концентрированной азотной кислоты

I

2;

3 4

5 Зависимость интенсивности флуоресценции от в растворе азотной кислоты

Таблица 2

Относительная интенсивность флуоресценции

62 85 90 90 76 t Таблица 3 концентрации бреваколлнна гвдрохлорида .