Способ определения бутеналя в биосредах Советский патент 1991 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, в частности к биохимическому исследованию биологических жидкостей животных и человека, и может быть использовано при проведении экспериментальных исследований.

Цель изобретения - повышение чувствительности и ускорение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Исследуемую пробу (сыворотку крови или мочу) в количестве 0,5 мл помещают в пенициллиновые флаконы, добавляют 0,1 г сухого N32S04 и 1 мкл раствора внутреннего стандарта (3-метилбутанола) в концентрации 10 мг/мл, пробу закрывают резиновой пробкой и герметизируют. Подготовленную пробу термостатируют при 120°С в течение 5 мин, отбирают шприцем 5 мл паровой фазы и вводят в испаритель газового хроматографа. Разделение осуществляют на стеклянной колонке длиной 2 м и внутренним диаметром 3 мм, заполненной сорбентом (10% карбовакса 20 М на инертоне AW

зернением 0,16-0,20 мм). Оптимальные условия газохроматографического анализа: Температура, °С

термостата колонки80

испарителя180

Скорость потока, мл/мин газа-носителя (азота)35

воздуха400

водорода40

Скорость движения ленты, см/мин0,5

Шкала электрометра 50 . Время удерживания бутеналя, мин, с6,35

П р и м е р 1 . Через 30 мин после введения бутеналя исследуемую пробу (сыворотку крови) в количестве 0,5 мл помещают в пенициллиновые флаконы, добавляют 0,1 г Na2SO j и 1 мл внутреннего стандарта (3-метилбутанола), закрывают резиновыми пробками, герметизируют. Подготовленные пробы термостатируют при 120°С в течение 5 мин, отбирают 5 мл паровой фазы и вводят

с/

С

в испаритель хроматографа. Рассчитанная по данным хроматограммы концентрация бутеналя в исследуемой сыворотке крови составляет 1,31;0.17 мкг/мл.

П р и м е р 2. По указанной методике готовят пробу, содержащую мочу экспериментального животного через 60 мин после введения бутеналя. Добавляют 0,1 г NaaSCM и 1 мкл внутреннего стандарта. Пробу тер- мостатируют при 120°С в течение 5 мин, отбирают 5 мл паровой фазы и вводят в испаритель хроматографа. Рассчитанная по данным хроматограммы концентрация бутеналя в исследуемой моче составляет 0,34±0,08 мкг/мл.

По данным экспериментальных исследований на животных, проведенных в НИИ общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сы- сина АМН СССР, использование предлагаемого способа определения бутеналя в биосредах обеспечивает по сравнению с известным способом нижний предел обнаружения бутеналя в сыворотке крови на уровне 0,1 мкг/мл, в моче 0,05 мкг/мл при 20 мкг/мл в прототипе. Суммарная погреш0

5

0

5

ность метода не превышает 22%. Длительность анализа от отбора биосред до получения пиков на хроматограмме не превышает 30 мин при нескольких часах в прототипе. Данный способ позволяет использовать отечественные приборы - газовые хроматографы. Предлагаемый способ не требует дорогостоящих и труднодоступных реактивов.

Формула изобретения

Способ определения бутеналя в биосредах путем проведения газохроматографиче- ского анализа равновесной газовой фазы, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, к биопробе добавляют 0,1 г сухого сульфата натрия и 3-метилбутанол, пробу термостатируют при t 120°C в течение 5 мин и вводят газовую фазу в хроматограф с пламенно-ионизационным детектором с колонной, заполненной 10% карбоваксом 20 М на инертоне AW и определяют содержание бутеналя по калибровочному графику.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения бутеналя в биосредах. Целью способа является ускорение и повыи-ение чувствительности. Способ включает отбор пробы биожидкости, добавление 0,1 г сухого Na2SO i и 1 мкл 3-метилбутанола, пробу тер- мостатируют при 120°С в течение 5 мин, отбирают 5 мл газовой фазы и вводят в хроматограф с пламенно-ионизационным детектором и колонкой с 10% карбоваксом 20 М на инертоне AW (0,16-0,20 мм). Чувствительность способа при исследовании сыворотки крови 0,1 мкг/мл, мочи 0,05 мкг/мл, суммарная погрешность не превышает 22%. Время анализа 30 мин.