СО
С
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСОРБЕНТА (ВАРИАНТЫ) | 1997 |
|
RU2138813C1 |
Способ получения сорбента для иммобилизации липолитических ферментов | 1987 |
|
SU1510859A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСОРБЕНТА | 2000 |
|
RU2192013C2 |
Способ получения сорбентов для выделения липид-зависимых белков | 1986 |
|
SU1409319A1 |
Способ получения биоспецифических адсорбентов для выделения фибронектина и коллагеназ | 1986 |
|
SU1419717A1 |
Способ получения биоспецифического сорбента | 1982 |
|
SU1057514A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСОРБЕНТА | 1995 |
|
RU2102134C1 |
Биоспецифический сорбент для аффинной хроматографии трипсина | 1978 |
|
SU777041A1 |
СПОСОБ КОНЦЕНТРИРОВАНИЯ ВИРУСА | 1997 |
|
RU2130069C1 |
Способ получения модифицированного кремнеземного носителя для иммобилизации биоспецифических лигандов | 1987 |
|
SU1477439A1 |
Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения сорбента для биоспецифических процессов. Целью изобретения является сокращение времени получения сорбента повышение его стабильности. Цель достигается тем, что в качестве модификатора полимерного носителя, содержащего амино- или амидогруппы, используют водный раствор триоксиметил- фосфина (ТОМФ) в концентрации 1-10%. а процесс модификации осуществляют при 20-60°С в течение 0,5-2 ч. Присоединение лиганда, содержащего амино- или амидогруппы, проводят при 20-37°С в течение 1-2 ч. Предлагаемый способ расширяет ассортимент сорбентов, используемых в биохимии, иммунохимии, диагностике и профилактике инфекционных заболеваний.
Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения сорбента для биоспецифических процессов.
Целью изобретения является повышение стабильности сорбента, а также сокращение времени его получения.
П р и м е р 1. Получение иммуноглобули- нового сорбента.
В пробирку с 1 мл набухших полиакри- ламидных гранул добавляют 10 мл 5%-ного водного раствора ТОМФ и инкубируют при 60°С в течение 1 ч при непрерывном перемешивании. После этого гранулы 3-кратно промывают 10 мл дистиллированной воды, добавляют 10 мл раствора иммуноглобулинов в 0,1 М фосфатном буфере рН 7,2 (ФБР) с концентрацией 0,2 мг/мл и выдерживают при 37°С в течение 1 ч при постоянном перемешивании. Сорбент 3-кратно отмывают 10 мл ФБР и заливают на 2 ч 10 мл 1 М раствора этзноламина (или 1 %-ного раствора альбумина). После промывания ФБР сорбент пригоден для использования.
П р и м е р 2. Модификацию аминогрупп гранул носителя осуществляют аналогично примеру 1, однако ТОМФ используют в 10%-ной концентрации и инкубируют при 60°С в течение 0,5 ч.
Обработку модифицированного сорбента раствором белка проводят при 37°С в течение 1 ч. Промывание сорбента на всех этапах его приготовления и связывание непрореагировавших групп модификатора осуществляют согласно примеру 1.
Примерз, (низший предел). К 1 мл набухших в воде гранул носителя добавляют 100 мл 1 %-ного водного раствора ТОМФ. процесс модификации осуществляют при 20°С в течение 2 ч. После промывания сорбента согласно примеру 1 проводят связывание иммуноглобулинов путем инкубации гранул с 10 мл 0,02 %-ного белкового раствоо
Јк CJ
о VI со
pa в ФБР при 20°С в течение 2 ч при постоянном перемешивании. Промывание сорбента и обработку раствором этаноламина осуществляют аналогично примеру 1.
П р и м е р 4. Приготовление антигенного магносорбента.
Магнитные полиакриламидные гранулы, полученные по известной методике, в объеме 1 мл обрабатывают 10 мл 10%-ного раствора ТОМФ при 60°С в течение 1 ч при постоянном перемешивании. После промывания ФБР с использованием магнитной мешалки модифицированный сорбент инкубируют с 2 мг фракции 1 чумного микроба, растворенной в 5 мл ФБР, рН 7,2 при 37°С в течение 1 ч. Промывание гранул ФБР осуществляют на магнитной мешалке с трехкратной сменой буфера. Обработку этанол- амином (или инертным белком) осуществляют согласно примеру 1.
Таким образом, предлагаемый способ получения сорбента с помощью триоксиме- тилфосфина позволяет получать новый тип сорбентов с лигандом, иммобилизованным
на носителе посредством метилольных групп, связанных с фосфором. Сорбенты на основе ТОМФ могут быть получены в течение более короткого времени (1-2 ч против
3-6 ч по известному способу) более стабильны по сравнению с сорбентами на основе глутарового альдегида, так как не окисляются кислородом воздуха.
Предлагаемый способ расширяет ассортимент сорбентов, используемых в биохимии, иммунохимии, диагностике и профилактике инфекционных заболеваний. Формула изобретения Способ получения сорбента путем обработки полимерного носителя, содержащего амино- или амидогруппы, модификатором и последующего присоединения лиганда, о т- личающийся тем, что, с целью повышения стабильности сорбента, а также сокрэщения времени его получения, в качестве модификатора используют водный раствор триоксиметилфосфина с концентрацией 1- 10%, а процесс модифицирования ведут при 20-60°С в течение 0,5-2 ч.
Weston P D | |||
et al | |||
Proteins conpled то polyacrylamide beads using glytaraldehyde | |||
- Biochem | |||
Biophys | |||
Pes | |||
Comm., 1971, №45, p | |||
Безбалансовый стрелочный перевод | 1924 |
|
SU1574A1 |
Авторы
Даты
1991-04-23—Публикация
1989-02-13—Подача