Способ определения содержания продуктов деградации фибрина в плазме Советский патент 1991 года по МПК G01N33/52 G01N33/48 

щего раствора, до метки 3, получили плазму. В патрон внесли 6,5 мл 0,14 М раствора хлорида натрия, 2,5 мл насыщенного раствора сульфата аммония, смешали и добавили 1 мл исследуемой плазмы, оставили при 3°С на 20 мин. Затем смесь центрифугировали 30 мин с ускорением 8000д. Надосадок перенесли в другой патрон и установили на водяной бане при 37°С на 30 мин, затем центрифугировали при ускорении 8000д 30 мин. Надосадок отбросили, а к осадку доба-. вили 2 мл 0,14 М раствора хлорида натрия, взвесили осадок и вновь центрифугировали 15 мин. Отбросили насадок, опять добавили 2 мл 0,14 М раствора хлорида натрия и центрифугировали 15 мин. Надосадок отбросили, а осадок растворили в 3 мл 1 н. раствора едкого натрия на кипящей водяной бане в течение 5 мин. Раствор охладили при комнатной температуре и определили его све- топропускание при 280 нм, которое оказалось равным 48,0%. Согласно таблице это светопропускание соответствует ПДФ - 11,1%.

Индивидуальная вариабельность, установленная путем определения содержания ПДФ у 18 доноров, равна 9,2 ±1,1, следовательно, ошибка определения (/М) 100

при п 18 составляет 11,9%.

Таким образом предлагаемый способ позволяет повысить точность определения ПДФ в плазме в 2,9 раза по сравнению с прототипом.

Ф ор мул а и зоб рете н и я

Способ определения содержания продуктов деградации фибрина в плазме, включающий обработку плазмы крови сульфатом аммония с последующим центрифугированием, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, фибриноген, осадок, предварительно удаляют центрифугированием с ускорением 8000д, затем продукты деградации фибрина осаждают с тем же ускорением, осадок растворяют в 1 н. растворе едкого натра на кипящей бане, а затем содержание продуктов деградации фибрина определяют спектрофотометрически при 280 нм.

Изобретение относится к медицине, в частности к способам определения компоИзобретение относится к медицине и может быть использовано научно-исследовательскими и клинико-диагностическими лабораториями для изучения состояния ге- мостаза при различных воздействиях, а также у больных. Цель изобретения - повышение точности способа. Поставленная цель достигается тем, что для повышения точности, упрощения и сокращения длительности анализа фибриноген отделяют центрифугированием с ускорением 8000д,ПДФ осаждают с таким же ускорением, растворяют в 1 н растворе едкого натра, а также тем, что для количественного определения ПДФ применяют прямую спектрофотометрию раствора, используя для пересчета эмпирическую таб лицу зависимости содержания в плазме ПДФ в мг.% от светопропускания проб. Содержание ПДФ в плазме определяют следующим образом. В центрифужный патрон вносят 6,5 мл 0,14 М раствора хлорида натрия и 2,5 мл насыщенного раствора сульфата аммония, нентов и продуктов свертывания крови, и позволяет определить содержание продуктов деградации фибрина (ПДФ) в плазме. С целью повышения точности, упрощения и сокращения длительности определения фибриноген предварительно удаляют из плазмы центрифугированием с ускорением 8000 д, затем ПДФ осаждают с таким же ускорением, осадок растворяют в 1 н. растворе едкого натрия и содержание ПДФ определяют спектрофотометрически при 280 нм с последующим пересчетом на мг.%. Применение способа позволит повысить точность определения ПДФ в 2,8 раза по сравнению с прототипом. смешивают и к смеси добавляют 1 мл исследуемой плазмы, которая стабилизирована с помощью 3,8%-ного раствора цитрата натрия, содержащего 1,3% аминокапроновой кислоты, смешивают при 3-5°С в течение 15-20 мин. Центрифугируют 30 мин при 8000д, осадок переносят в другой патрон и выдерживают на водяной бане при 58°С 30 мин, затем центрифугируют 30 мин при 8000д. Надосадок отбросить, осадок два раза промывают 2 мл 0,14 М раствора хлорида натрия, центрифугируют при 8000д по 15 мин каждый раз. После промывания осадок растворяют в 3 мл 1 н раствора едкого натра нагреванием на кипящей водяной бане в течение 5 мин. Раствор охлаждают и определяют при 280 нм светопропускание. С помощью приведенной таблицы находят соответствующуюполученнуюзначению светопоглощения концентрацию ПДФ в исследуемой плазме. ° П р и м е р. У донора взяли кровь в шприц, содержащий 0,3 мл стабилизирую S е Os СЛ О 00 СЛ СЛ

Пересчет показаний спектрофотометра в значениях светопоглощения при 280 нм на концентрацию ПДФ в плазме ( при составлении таблицы учтено трехкратное разведение исследуемого белка в ходе анализа).