Способ получения производных стероидов Советский патент 1991 года по МПК C07J21/00 

сл

с

Изобретение относится к производным стероидов общей ф-лы I @ , где R₁ - диалкил C₁ - C₄-аминофенил, которые обладают фармакологическими свойствами. Цель - разработка способа получения указанных соединений. Получение ведут обезвоживанием с одновременным освобождением кетонной функции 3-кеталь, 4, 5-дигидро-5-α гидроксипроизводного соединения ф-лы I. 3 табл.

Изобретение относится к способу получения новых производных стероидов общей формулы

где RI - диалкил-С1 С4-аминофенил, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Цель изобретения - получение новых производных стероидов, имеющих фармакологические преимущества перед известным структурным аналогом подобного действия.

Пример 1. (17R)-11-бета-(4-(димети- ламино(фенил)спиро)эстра-4,9-диен-17,2- оксетан)-3-он.

На первой стадии получают (1,1 -димети- лэтиловый)3,3-(1,2-этандиил)-бис-окси) -(17-бета- гидрокси-19-нор-17-альфа-пре- гна-5(10), 9(11)-диен-21-овой кислоты.

Раствор 568 см диизопропиламидли- тия, титра в 0,51 М, в 1,4 л тетрагидрофурана охлаждают до -73°С, вводят в течение 20 мин при (-73)-(-72)°С 37,3 см3 трет- бутилового эфира уксусной кислоты и перемешивают 1 ч при -73°С. Дают температуре подняться до -60°С, в течение 30 мин вводят 17,38 г 3,3-(1,2-этандиил)цик- лического ацеталя экстра-5(10), 9(11)-диен- 3,17-диона в 260 см3 тетрагидрофурана и затем перемешивают 1 ч 20 мин при -60°С.

Температуру среды доводят до 0°С и в течение 15 мин прибавляют 520 см3 хлористого аммония в насыщенном водном-растворе. Перемешивают 1 ч при комнатной температуре, декантируют и водный слой экстрагируют хлористым метиленом. ОргаО ON СЛ 00 VJ XI

СО

нические слои промывают хлористым натрием s насыщенном водном растворе, Сушат и доводят досуха. Остаток хроматог- рафируют на двуокиси кремния, элюируют Смесь циклогексан-этиловый эфир уксус- Ной кислоты - тризтиламин, взятых в соотношении 95:5:1.

ЯМР-спектр (CDCIa + 1 капля CsDsN), ./млн: 3,97 (Н этилендиокси в 3); 5,6 (Ни); 0,9 (His); 4,55 (ОН); 1,47 (Н, принадлежащий t-Bu).

На второй стадии получают (1,2-этанди- (лл)циклический ацеталь 17,21-дигидрокси- |19-нор-17-альфа-прегна-5(10),9(11}-диен-3- рка.

В инертной атмосфере растворяют 20,3 г полученного на первой стадии продукта в 400 см3 тетрагидрофурана и прибав- )1яют в течение 5 мин при 18-22°С 14,38 г люмогидрата лития. Нагревают 1 ч при 40°С. После охлаждения до 15-20°С при- равляют 600 см3 хлористого метилена, доводят до и медленно прибавляют 330 см3 насыщенного водного раствора бикарбоната натрия.

Полученный осадок отфильтровывают, промывают его, сгущая в хлористом метилене, декантируют фильтрат и водный слой экстрагируют хлористым метиленом. Органические слои промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат досуха, Остаток сгущают в эфире, отсасывают, сушат под уменьшенным давлением и получают 12,47 г целевого продукта.

ЯМР-спектр ( + 1 капля CsDsN), ч./млн: 3,96 (Н этилендиокси); 5,59 (Ни); 0,88 (His); 3,97 (N21); 3,33 (Н, принадлежащие ОН).

На третьей стадии получают (17R)-(1,2- этандиил)циклический ацеталь спиро-(эст- ра-5-{10),9(11}-диен-17,2-о1 сетан)-3-она.

12,47 г полученного на второй стадии продукта растворяют в 250 см3 пиридина. По-немногу прибавляют 24,94 г хлористогб тозила и перемешивают 2 ч при комнатной температуре. Прибавляют лед, воду, экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, органические слои промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и доводят досуха перегонкой с толуолом. 19,80 г полученного тозилата аводят в суспензию в 890 см3 5%- ного этилового едкого кали и перемешива- „ ют с рефлюксом 40 мин. Отгоняют этанол под уменьшенным давлением, прибавляют воду и лед, перемешивают 10 мин, отсасывают осадок, промывают водой до нейтральности, растворяют его в хлористом .метилене, декантируют воду и сушат досуха. Хроматографируют остаток на двуокиси кремния (элюант: циклогексан-этиловый эфир уксусной кислоты - триэтиламин, взятые в соотношении 90:10:1) и выделяют

8,97 г целевого продукта т.пл. 13б°С.

ЯМР-спектр (CDCIa), ч./млн: 3,99 (Н этилендиокси); 5,64 (Ни); 0,76 (Hie); 4,30- 4,50 (H21).

На четвертой стадии получают (17R)0 (1,2-этандиил)циклический ацеталь 5-альфа, 10-альфа-эпокси-спИро-(эстра-5(10), 9(11)- диен-17,2-оксетан)-3-она и его изомер 5-бе- та, 10-бета-эпокси.

8,97 г полученного на третьей стадии

5 продукта растворяют в 180 см3 хлористого метилена, прибавляют 9 см3 гексахлораце- тона, охлаждают до -30°С и вводят в течение 15 мин при -33°С 27 см3 50%-ной перекиси водорода, а затем перемешивают

0 3 ч при 0-2°С. Реакционную смесь вылива- юг на 300 см3 насыщенного раствора бикарбоната натрия, при 15-20°С прибавляют тиосульфата натрия до отсутствия перекиси и декантируют. Водный слой экстрагируют

5 хлористым метиленом, промывают водой органические слои и насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат досуха. Хроматографируют на двуокиси кремния (остаток/элюант: циклогексан - этиловый

0 эфир уксусной кислоты - триэтиламин,

взятые в соотношении 80:20:1) и выделяют

1,82 г продукта 5-бета, 10-бета-эпокси и

5,36 г продукта 5-альфа, 10-альфа-эпокси.

ИК-спектр (), см 1: 975,823 (эпокси

5 альфа); 981, 830 (эпокси бета).

ЯМР-спекгр (СОС1з), ч,/млн: эпокси альфа: 0,76 (Hie), 3,92 (кеталь), 6,09 (Ни), 4,30- 4.66 (Hzi); эпокси бета: 0,75 (Hw), 3,91 (кеталь), 5,92 (Ни), 4,30-4,46 (H21J.

0 На пятой стадии получают(17В)-(1,2-этан- диил)циклический ацеталь 5-альфа-гидро- кси-11-бета-(4-{диметиламино(фенил)спиро)- экстра-9-ен-17, -2-оксетан)-она.

В инертной атмосфере растворяют

5 0,861 г полученного на четвертой стадии эпоксидз 5-альфа-10-альфа а 18 см3 тетрагидрофурана, прибавляют 24 мг монохлорида меди, охлаждают до 0-5°С, в течение 30 мин вводят 8,3 см бромида 4-диметила0 минофенилмагния в растворе (0,87 М в тет- рагидрофуране) и перемешивают 1 ч при этой температуре. Реакционную смесь при 15-20°С выливают на 40 см3 хлорида аммония в насыщенном водном растворе,

5 перемешивают 10 мин, декантируют, водный слой экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты. Органические слои промывают насыщенным раствором хлористого натрия, сушат и доводят досуха. Остаток Хроматографируют на двуокиси кремния

(элюант: циклогексан - ацетат - этилтриэ- тиламин, взятые в соотношении 70:30:1). Выделяют 1 г целевого продукта , т.пл. 178°С.

ЯМР-спектр (CDCIa), ч.млн: 4,00 (Н эти- лендиокси); 2,91 (Н диметиламино); 4,28- 4,45 (Ни и H2i); 0,40 (Hie); 4,31 (ОН).

На шестой стадии получают (17R)-11-бе- та-{4-(диметиламино(фенил)спиро)-эстра- I 4,9-диен-17,2оксетан)-3-он.

0,944 г полученного на пятой стадии продукта растворяют в 6,6 см3 70%-ной уксусной кислоте, нагревают при 41-43°С и перемешивают 2 ч 15 мин. Охлаждают до , прибавляют гидрат окиси аммония до рН выше, чем 8, экстрагируют хлористым метиленом, промывают насыщенным раствором хлорида натрия и сушат досуха. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния (элюент: циклогексан-этиловый эфир уксусной кислоты, взятые в соотношении 80:20) и выделяют 0,468 г целевого продукта.

После перекристаллизации в изопропа- ноле продукт плавится при 108°С.

ИК-спектр(), см 1:1654(соп ряженный кетон); 1612 (); 1561 (ароматическое соединение).

УФ-спектр (ЕЮН): макс. 260 ммк, е 17.400; макс. 302 ммк, е 20,500.

УФ-спектр (EtOH HCI, 0,1 н.): макс. 300 ммк, Е 18.900; перегиб 218-240 ммк.

ЯМР-спектр (СОС1з), ч./млн: 2,92 (Н диметиламино); 5,76 (Н/0; 0,48 (Же); 4,40 (Нц и Н21); 6,67-7,07 (ароматические соединения).

Пример 2.(17Р)-11-бета-(4-{метил- тио(фенил)спиро-)эстра-4,9- диен-17,2-оксе- тан)-3-он.

На первой стадии получают (17RH1.2- 40 вводят раствор 2,4 см 3-бутинола в 20 см этандиил)циклический ацеталь 5-альфа-гид- рокси-11-бета-(4-{метилтио(фенил)спиро)эст- ра-9-ен-17,2- оксетан)-3-он.

В инертной атмосфере охлаждают до

тетрагидрофурана, перемешивают 1 ч и вы ливают в 200 см3 насыщенного раствора

0-5 С в течение 15 мин 55,3 см 4-(метил- тио)фенил магния в тетрагидрофуране (титр 0,81 М) и 0,148 г хлористой меди. В течение 25 мин при 3,5-5°С, вводят 5,36 г (17RH1.2- этандиил)циклического ацеталя 5-альфа, 10- альфа-эпокси(спиро)эстра-5(10),9(11)-диен -17,2-оксетан-З-она в 53 см тетрагидрофурана и перемешивают при 0-5°С 1,5. Затем реакцию продолжают аналогично пятой стадии примера 1, получая 0,24 г целевого продукта.

ЯМР-спектр (CDCIs), ч./млн: 2,46 (НзС); 3,9-4,1 (Н этилендиокси); 0,38 (His); 4,30- 4,45 (Нц, Н21 и ОН); 7,16 (ароматические соединения).

первичного фосфата натрия, а затем экстра гируют водный слой хлористым метиленом

45 и сушат досуха. Остаток очищают на двуокиси кремния, элюируя смесью циклогексан- этиловый эфир уксусной кислоты (1:1), а затем этиловым эфиром уксусной кислоты содержащей 1 % гидрата окиси аммония

50 Собирают 1,775 г целевого продукта.

ЯМР-спектр (CDCIs + 1 капля CsDsN), ч./млн: 2,90 (Н диметиламино); 3,97 (Н этилендиокси); 0,5 (His); 3,73 (СНа-ОН); 6,62 и 55 7,04 (ароматические соединения).

На второй стадии получают 11-бета-{4- (диметиламино(фенил)-17-бета-гидрокси-17 -аяьфа-)4- гидроксибутил)-эстра-4,9-диен-3- он.

На второй стадии получают (17R}-11-6e- та-(4-(метилтио(фенил)спиро-)эстра-4,9-ди- ен-17,2-оксетан)-3-он.

2 г полученного на первой стадии про- 5 дукта растворяют в 40 см3 этанола, прибавляют 2 г смолы Амберлит IRC 84 (Ром Хаас) и нагревают с рефлюксом в течение 7 ч в инертной атмосфере. При комнатной температуре отсасывают смесь смолы и продукта, 0 прополаскивают этанолом, хлористым метиленом и фильтрат доводят досуха для получения 1,194 г целевого продукта, т.пл. 154°С.

После перекристаллизации в99,8%-ном 5 этаноле получают продукт, плавящийся при 160°С.

ИК-спектр (СНС1з), 1653 (); 1603 (); 1556 и 1493 (ароматические соединения).

0 УФ-спектр (EtOH): макс. 260 ммк, Е 16.500; макс. 300 ммк, Ј 20.10.

ЯМР-спектр (), ч./млн: 5,77 (H-j); 2,46 (S-СНз); 0,44 (Hie): 4,3-4,5 (H2l); 7,12 и 7,18 (ароматические соединения). 5 ПримерЗ. (17S)-11-бета-(4-(диметила- мино(фенил)-3,4,5,6-татрагидро-спиро) эст- ра-4,9-диен-17,2-(2Н)-пиран}-3-он.

На первой стадии получают (1,2-этанди- ил)циклический ацеталь 5-альфа, 17-бета- 0 дигидрокси-11-бета-(4-(диметиламино-(фе- нил)-17-(альфа-)- 4-гидрокси-1-бутинил)эст- ра-9-ен-З-она.

5 г третбутилата калия растворяют в 20 см3 безводного тетрагидрофурана, ох- 5 лаждают до -5°С и в течение 5 мин вводят 1,9 г (1,2-этандиил)циклического ацеталя 5-альфа-гидрокси-11-бета-(4-(диметил- амино(фенил)-эстра)-9-ен)-3-она. Перемешивают 10 мин, а затем в течение 15 мин

вводят раствор 2,4 см 3-бутинола в 20 см

тетрагидрофурана, перемешивают 1 ч и выливают в 200 см3 насыщенного раствора

вводят раствор 2,4 см 3-бутинола в 20 см

первичного фосфата натрия, а затем экстрагируют водный слой хлористым метиленом

и сушат досуха. Остаток очищают на двуокиси кремния, элюируя смесью циклогексан- этиловый эфир уксусной кислоты (1:1), а затем этиловым эфиром уксусной кислоты, содержащей 1 % гидрата окиси аммония,

Собирают 1,775 г целевого продукта.

ЯМР-спектр (CDCIs + 1 капля CsDsN), ч./млн: 2,90 (Н диметиламино); 3,97 (Н этилендиокси); 0,5 (His); 3,73 (СНа-ОН); 6,62 и 7,04 (ароматические соединения).

На второй стадии получают 11-бета-{4- (диметиламино(фенил)-17-бета-гидрокси-17 -аяьфа-)4- гидроксибутил)-эстра-4,9-диен-3- он.

871 г полученного на первой стадии продукта подвергают гидрогенизации в 40 см3 метанола в присутствие 0,4 г смеси палладий/уголь. После фильтрации, удаления растворителей, остаток забирают в 10 см3 10%-ной уксусной кислоты и перемешивают 1 ч при 45°С. Нейтрализуют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, а затем экстрагируют хлористым метиленом. Органический слой сушат, доводят досуха под уменьшенным давлением. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируют этиловым эфиром уксусной кислоты и получают 640 мг целевого продукта.

ИК-спектр(СНС1з), 1654(); 1612,

1561, 1518 (-N); 3615 (ОН).

ЯМР-спектр (CDCI3), ч./млн: 2,9 ());

4,33 (Нц); 0,57 (Hie); 5,73 (Н4); 3,67(СН2ОН); 6,65 и 7,02 (ароматические соединения).

На третьей стадии получают (17S)-11- бета-(4-(диметиламино(фенил)-(3,4,5,6- тетрагидроспиро)эстра-4,9-диен-17,2 (2Н пиран)-3-он.

Раствор, содержащий 788 мг полученного на второй стадии продукта и 15 см3 безводного пиридина, охлаждают до 0°С, прибавляют 1,5 г хлористого тозила и перемешивают 1 ч при комнатной температуре. Прибавляют 30 см3 льда и нейтрализуют 14,5 см3 концентрированной соляной кислоты. Водный слой экстрагируют хлористым метиленом и сушат дрсуха. Остаток очищают проходом на двуокиси кремния, причем элюант хлористый метилен - ацетон (95-5), и собирают 0,2 г целевого продукта,

ЯМР-спектр (CDCIa), ч,/млн: 2,90 (Н ди- метиламино); 4,33 (Нц); 0,53 (-СНаО); 5,74 (Н4); 7,02 и 6,4 (ароматические соединения). П р и м е р 4. (17SH 1-бета-(4-(диметила- мино(фенил)спиро)эстра-4,9-диен-17,2 -ок- сиран)-3-он.

Аналогично второй стадии примера 2 исходят из 2,42 г (1,2-этандиил)циклическо- го ацеталя 11-бета-4-(диметмламино(фе- нил-5-альфа-гидроксиспиро)эстра-9-ен- 17,2-оксиран)-3-она со смолой Амберлит IRC84.

После охлаждения отфильтровывают смолу, прополаскивают ее с 60 см3 этанола и доводят досуха, Сгущают остаток в 30 см3 изопропилового эфира, перемешивая при 40°С. Ледянят, отсасывают, прополаскивают изопропиловым эфиром, сушат под уменьшенным давлением и получают 9,844 г

целевого продукта. Из маточных растворов

собирают еще 0,273 г продукта, т.пл. 228°С.

После очищения хроматографией на

двуокиси кремния, причем элюант: циклогексан-зтиловый эфир уксусной кислоты (70:30), выделяют 0,750 г продукта, т.пл. 234°С; (альфа)о - + 270 ± 3,5° (к 0,5% ).

ЯМР-спектр (CDCts). ч./мян: 2,92 (Н ди0 метиламино); 5,8 (Н4); 4,33 (Нц); 0,6 (Же); 2,63 и 2,98 (Н оксирана); 6,67 и 7,01 (ароматические соединения).

П р и м е р 5. (175)-11-бета-{4-(метил- тио(фенмл)спиро-)эстра-4,9-диен-17,2 -ок5 сиран)-3-он.

На первой стадии получают 3,3-(1,2- этандиил)циклический ацеталь 5-альфа-гид- рокси-11 -бета-{4-{метилтио(фенил)-эстра-9 -ен)-3,17-диена.

0 Охлаждают до -6°С 0,672 г хлорной меди, 0,212 г хлористого лития, 165см безводного тетрагидрофурана и 16,6 г 3,3-(1,2-этандиил)циклического ацеталя 5- альфа, 10-альфа-эпокси-эстра-9-(11)-ен5 3,17-диона и вводят капля по капле в течение 1 ч 15 мин 100 см 0,75 М раствора бромида 4-(метилтио)-фенилмагния. В инертной атмосфере при -10°С перемешивают 1 ч, прибавляют 100 см3 насыщенного рас0 твора хлористого аммония и перемешивают 10 мин.

Экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, промывают водой, сушат и концентрируют досуха под уменьшенным

5 давлением. Остаток забирают в немного гексана, отсасывают, промывают гексан и получают после сушки под уменьшенным давлением при 60°С в течение 1 ч 22,2 г сырого продукта, т.пл. 202°С.

0 После хроматографии этого продукта на двуокиси кремния, элюант циклогексан- этиловый эфир уксусной кислоты (1/1)+ 1% триэтиламина, перекристаллизации в этиловом эфире уксусной кислоты, получают

5 продукт, плавящийся при 209°С.

На второй стадии получают (17SHL2- зтандиил)циклический ацеталь 11-бета-(4- (метилтио(фенил)спиро)эстра-9-ен-17,2 -оксиран)-3-он,

0 Охлаждают до 5°С 12,7 см3 раствора (0,9 М) трётбутилата калия, 22 см3 тетрагидрофурана и 27 см3 безводного диметилсуль- фоксида, прибавляют в несколько минут 2,20 г иодида триметилсульфония и переме5 шиввют 30 мин при 5°С. Затем выливают при 5 ± 1°С в течение 7 мин 2,45 г полученного на первой стадии продукта в 30 см3 безводного тетрагидрофурана и перемешивают 1 ч при 0-5°С. Реакционную смесь

выливают в 300 см воды, экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат досуха. Остаток забирают в 15 см3 этилового эфира, леденят, отсасывают, сгущают с минимальным количеством холодного этилового эфира, сушат под уменьшенным давлением и получают 2,1 г целевого продукта, т.пл. 130°С (момент.).

ИК-спектр (CHCI3), 3508 (ОН); 1592, 1555, 1493 (ароматические соединения).

На третьей стадии получают(17S)-11 -бе- та-(4-(метилтио(фенил)спиро)-эстра-4,9-ди- ен-17,2 -оксиран)-3-он.

В инертной атмосфере растворяют 2,1 г полученного на второй стадии продукта в 100 см3 этанола. Прибавляют 4,2 г смолы Амберлит IRC 84/POM-XAA и нагревают с рефлюксом 15,5 ч. После охлаждения отфильтровывают, промывают этанолом, упаривают фильтрат, выдерживают 1 ч на холоде, отсасывают и сгущают продукт с минимальным количеством холодного эта- нола, сушат под уменьшеным давлением и выделяют 0,49 г целевого продукта, т.пл. 121-122°С.

После перекристаллизации в смеси этанол-хлористый метилен (4:5) получают про- дукт, плавящийся при 122°С, а затем при 167°С.

УФ-спектр (ЕтОН) MB 406,6: макс 259 ммк, Ј 15.700; макс. 300 ммк, е 18.700.

ЯМР-спектр(), ч./млн:2,43(СНз5); 5,76 (Нв); 4,32 (Ни); 0,55 (Ню); 2,61 и 2,94 (Н оксирана); 7,02 и 7,13 (ароматические соединения).

Проводят фармакологическое изучение продуктов, полученных по предлагаемому способу.

Изучение активности предлагаемых продуктов проводят на гормонных рецепторах.

Прогестогенные рецепторы матки крольчихи.

Не достигшие полового возраста крольчихи весом в около 1 кг получают накожное прикладывание в 25 г эстрадиола. 5 дней спустя животные умерщвляются, матки вы- нимаются, взвешиваются и гомогенизируются при 0°С при помощи Поттера тефлон/стекло в буферном растворе TS (трис 10 мМ, сахароза 0,25 М, HCI рН 7,4/1 г ткани на 50 мл TS).

Затем продукт гомогенизации ультра- центрифугируется (105000 г х 90 мин) при 0°С. Полученные аликвотные части поверхности инкубируются при 0°С в течение времени t при постоянной концентрации (Т)

насыщенного тритием продукта Р(17,21-ди- метил-19-нор-4,9-прегнадиен-3,20-дион) в присутствии увеличивающихся концентраций (0-2500 -ЮМ) либо холодного R, либо холодного прогестерона, либо холодного исследуемого продукта. Концентрация насыщенного тритием R (связанного В) измеряется затем в каждом продукте инкубирования техникой поглощения уголь - декстран.

Глкжокортикоидный рецептор вилочной железы крысы.

Самки крысы Sprague-Dawley EOPS, весящие 160-200 г, подвергают удалению надпочечников . Через 4-8 дней после удаления животные умервщляются и вилочные железы вынимаются и гомогенизируются при 0°С в буферном растворе (трис 10 мМ, сахароза 0,25 М, дитиотрейтоль 2 мМ, HCI рН 7,4) при помощи Поттера политетрафторэтилен-стекло (1 г ткани на 10 мл ТС). Продукт гомогенизации подвергается ульт- рацентрифугации (105000 г х 90 мн) при 0°С. Полученные аликвотные части поверхностного продукта инкубируются при 0°С в течение времени t с постоянной концентрацией (Т) насыщенного тритием дексаметазона в присутствии увеличивающихся концентраций (0-2500 М) либо холодного дексаметазона, либо холодного исследуемого продукта. Концентрация связанного насыщенного тритием дексаметазона (В) измеряется а каждом продукте инкубации техникой поглощения уголь-декстран.

Проводят вычисление относительного аффинитета связи (ARL), которое одинаково для всех рецепторов.

Чертят две кривые: процент связанного

В

насыщенного тритием гормона в зависимости от логарифма

Т

концентрации хо- В

лодного контрольного гормона и -т-в

зависимости от логарифма концентрации холодного исследуемого продукта. Определяют прямую уравнения

Вмакс Вмин п J 50 I р ) . ,

где

в,

т

т т

процент связанного насыщенного тритием гормона для инкубации этого насыщенного тритием гормона при концентрации (Т);

D

-процент связанного насыщенного тритием гормона для инкубации этого тритием насыщенного гормона при концентрации (Т) в присутствии большого избытка холодного гормона (2500 М).

Пересечение прямой JBO и кривых позволяет дать оценку концентраций холодного контрольного гормона (СН) и холодного изучаемого продукта (СХ), который ингиби- рует на 50% связь насыщенного тритием фрмона на рецепторе.

Относительный аффинитет связи (ARL) изучаемого продукта определяется урэвне- Нием:

ARL iЈJ±L L icxi

Получают результаты, приведенные в тЈбл. 1.

Исследуемые продукты, особенно про- Дукт примера 1, проявляют определенный Аффинитет к глюкокортикоидному и проге- с/гогенному рецепторам.

Из полученных результатов можно за- йлючить, что продукты могут проявить «(гонистические или антагонистические активности глюкокортикоидов и прогестоге- йов.

, Исследуют антиклюкортикодную активность.

Употребляемая техника вытекает из известного способа Dausse and all. The relationship beetween glucoccrtlcold Structure and effects upon Thymoxytes.- Molecular Pharmacology, 1977, 13, 948-955 Для клеток загрудинной железы мыши.

Клетки загрудной железы у крыс с удаленными надпочечниками инкубируются fipn 37°C в течение ч, в питательной среде, Содержащей М дексаметазона в присутствии или в отсутствии изучаемого Продукта при различных концентрациях. Прибавляют тритием насыщенный уридин и Продолжают инкубацию 1 ч. Охлаждают продукты инкубации, обрабатывают их 5%- ным раствором трихлоруксусной кислоты, фильтруют на бумаге Ваттман GF/A, промывают их при помощи 5%-ной трихлоруксусной кислоты три раза. Определяют . радиоактивность, удержанную на фильтре. Глюкокортикоиды, в частности дексаме- тазон, вызывают уменьшение включения насыщенного тритием уридина, Продукты примеров 1-3 противодействуют этому эффекту (табл. 2).

Если исследуемые продукты употребляются одни, то никакого эффекта типа глико- кортикоида не отмечают.

Исследуемые продукты проявляют антиглюкокортикоидную активность и, одновременно не проявляют глюкокортико- идной активности.

Исследуют абортивную активность у крысы самки.

Определяют день DI беременности присутствием сперматозоидов в вагинальном мазке. В день Dg беременности вводят продукт в суспензии в карбоксиметилцеллюло- зе, содержащей 0,5% твина.

Животных умерщвляют через 72 ч после обработки и матку исследуют для определе- ния состояния беременности.

Устанавливают полный аборт на всех животных группы с продуктом примера 1, введенного при дозе в 3 мг/кг.

Работают согласно предлагаемым усло- виям при определении аффинитета (сродства) соединений к гормонным рецепторам и определяют относительный аффинитет связи (АР) на рецепторах прогестогена и глюко- кортикоида у следующих продуктов (табл. 3). Продукт примера 1 (продукт А) и лактон 3- (11-бета-(4-диметияаминофенил)-17-бета- окси-3-оксо-4,9-(10)- эстра-диен-17-альфа- ил)-пропионовой кислоты (продукт X).

Предлагаемое соединение имеет более высокий аффинитет к рецепторам прогестогена и глюкокортикоида, чем известный продукт.

30

Формула изобретения

Способ получения производных стероидов общей формулы

R

40

где RI - диалкил-С1-С4-аминофенил, отличающийся тем, что соединения общей формулы

45

О

О

50

к

он

где RI имеет указанные значения;

К - группа циклического кеталя, подвергают обезвоживанию с одновременным освобождением кетонной функции.

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3