Способ получения производных 3-(бензотиазол-2-илалкил)-4-оксо-3Н-фталазин-1-илуксусных кислот или их сложных алкиловых эфиров Советский патент 1991 года по МПК C07D417/06 A61K31/502 A61P3/10 

П р и м е р 1. Этил-3-(5-трифторметилензотиазол-2-илметил)-4-оксо-ЗН-фталазин-ил ацетат.

A,Смесь этил З-цмэнометил-4-оксо-ЗН- талазия-1-илацетата (2,71 г), 2-амино-4- рифтор-метил-тиофенол гидрохлоридз 2,40 г) м этанола (20 мл) подвергают дефлегации в течение 8 ч, Тяжелый осадок, полченный при охлаждении, отделяют ильтрацией и собранное твердое вещество сушзт воздухом, чтобы получить целевое оединение (выход 4,3 г; т.пл. 136°С),

B.Смесь этил З-цианометил-4-оксо-ЗН- фталазин-1-илзцетата (0,27 г) и 2-амино-4- трифторметилтиофенол гидрохлоридз (0,23 г) нагревают до т.пл, 180°С, которую подерживают в течение 10 мин. Подвижную жидкость охлаждают, а затем суспендируют в воде. В результате фильтрации смеси получают целевое соединение выход 75%.

Пример 2. Этил 3-(5,7-дифторбензо- тиазол-2-илметил)-4-оксо-ЗН-фталазин-1илацетат.

Смесь этил 13-циаиометил-4-оксо-ЗН- фталазин-1-илацетата (1,29 г),- 2-амино-4,б- дифтортиофенол гидрохлорида (0,98 г) и этанола (20 мл) подвергают дефлегмации в течение 6 ч. После охлаждения целевое соединение выпадает в осадок в виде бледно- желтого твердого вещества (выход 1,62 г; т.пл. 115-117°С).

П р м м е р 3, 3-(5-Трифтормегилбензо- тиазол-2-илметил-(-4-оксо-ЗН-фталазин-1- млуксусная кислота.

А. Смесь этил 3-(5-трифторметилбензо- тиазол-2-илметил)-4-оксо-3 Н-фталазин-1-ил- ацетата (5,0 г), метанола (60 мл), тетрагид- рофурана (30 мл) и 10%-ного водного раствора гидрата окиси калия (20 мл) перемешивают в течение 10 мин при комнатной температуре. Раствор концентрируют до объема 20 мл, а затем разбавляют водой (50 мл). Полученный раствор подкисляют примерно до рН 4,0 при помощи добавления достаточного количества 10%-ного раствора HCI. Выпавшее в осадок не совсем белое твердое вещество собирают и сушат воздухом (еыход 4,8 г; т.пл. 197- 198°С).

В Смесь этил З-цианометил-4-оксо-ЗН- «Ьталазин-1-илацетата (2,71 г), 2-амино-4- триФторметилтиофенол гидрохлорида (2,40 г) и этанола (20 мл) подвергают дефлегмации в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до 40°С и в нее добавляют тетрагидро- фуран (10 мл) и 5%-ный водный раствор гидрата окиси калия (10 мл). Смесь перемешивают-в течение 1 ч при комнатной температуре и растворители удаляют выпариванием. Остаток разбавляют водой (50 мл), а полученный раствор экстрагируют простым эфиром (20 мл). Основной водный слой собирают и подкисляют примерно до

рН 4,0 добавлением достаточного количества 10%-ного раствора НС, Осажденное твердое вещество собирают и сушат нз воздухе (выход 3,68 г; т.пл. 197-198°С).

П ри м е р4. 3-(5,7-Дифторбензотиазол2-илметил)-4-оксо-ЗН-фталазин-1-илуксус - пая кислота,

Этил 3-(5,7-дифторбензотиазол-2-илме- тил)-4-оксо-ЗН-фталазин-1-илацетат (1,0 г) подвергают гидролизу аналогично примеру

3, А. Получают целевое соединение (т.пл. 178°С).

5

П-р и м е р 5. 3-(5-Трифторметилбензо- тиазол-2-илэтил)-4-оксо-ЗН-фталазин-1-ил уксусная кислота,

Смесь этил З-цианоэтил-4-оксо-ЗН-фта- лазин-1-илацетата (2,71 г), 2-амино-4-триф- торметилтиофенол гидрохлорида (2,29 г) и этанола (20 мл) подвергают дефлегмации в течение ночи. Сырой продукт, полученный после выпаривания этанопа, подвергают очистке с использованием хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гексана и тетрагидрофурана (4:1). Полученное белое твердое вещество (0,3 г) используют непосредственно на следующей стадии, которая заключается в растворении этого соединения в этаноле (20 мл), содержащем 5%-ный водный раствор KCI (2 мл), и перемешивании при комнатной температуре в течение 2 ч. Этанол выпаривают, остаток разбавляют водой (10 мл), экстрагируют простым эфиром (2x10 мл) и водный экстракт подкисляют до рН 2,0. Осажденное твердое вещество собирают, а затем кристаллизуют из этанола (выход 0,12 г, т.пл-. 184-185°С).

0

5

Пример 6, Стадия 1, Гидрохлорид этил-3(этилацетимидат)-4-оксо-ЗН-фталазин-1-илацетата.

Сухой хлористый водород (в газообразном виде) пропускают в течение 5 мин через раствор З-цианометил-4-оксо-ЗН-фта- лазин-1 -йлацетата (27,1) в сухом тетрагидрофуране (200 мл) и абсолютном этаноле (5,9 мл). Образовавшийся осадок после того, как реакционную смесь выдерживают при ком-, натной температуре а течение ночи, отделяют фильтрацией. Получают целевой продукт

(13,05 г, т.пл. 208-210°С).

Стадия 2. Этил-3(5-трифторметилбензо- тиазол-2-илметил)-4-оксо-ЗН-фталазин-1- илацетат,

Смесь гидрохлорида этил 3-(этилацети- мидат)-4-оксо-ЗН-фталазин- 1-й л ацетата (0,35 г) и 2-амино-5-трифторметилтиофенол гидрохлорида (0,23 г) в толуоле (20 мл) подвергают дефлегмации в течение 16 ч. Полученный при охлаждении осадок кристаллизуют из этанола, в результате чего получают целевой продукт (т.пл. 136°С).

Аналогично получают соединения примеров 7-33, приведенные в таблице.

Способность соединений, полученных по предлагаемому способу, ингибировать альдозредуктазу была изучена в опытах in vitro.

Сравнения проводили с ближайшим аналогом по структуре и действию - 2-(4- бромбензил}-1,2-дигидро-1-оксофталазин- 4-илуксусной кислотой.

Методика испытания in vitro.

Приготовление фермента.

Альдозредуктазу (АР) частично очищают из плаценты человека с помощью моди- фицированного метода Хаймэна и Киношиты, описанного для хрусталиков глаз крысы. Свежеполученные плаценты гомогенизируют в 3 объемах 0,1-молярного буферного раствора фосфата калия с рН 7,0, который содержит 5 моль 2-меркаптоэтано- ла, и вращают в центрифуге в течение 20 ; мин при 4°С и ускорении 33000 х g (9,8 м2/с). Объединенные жидкости над осадком от предыдущих стадий подвергают фракцио- нированию с 30-75%-ным сульфатом аммония. Полученные таблетки совместно повторно суспендируют в минимальном объеме буфера и подвергают диализу в течение ночи. Продукт диализа очищают хроматографически на колонке ДЕАЕ-целл- люлоза, причем альдозредуктазу элюируют при линейном градиенте хлорида натрия (0- 1 моль/л). Пиковые фракции, содержащие активную альдозредуктазу, объединяют, причем их эликвотные растворы хранят в замороженном состоянии. Эта методика приводит к препарату, обогащенному более чем в 30 раз по активности альдозредукта- зы.

Проведение испытания.

Альдозредуктазу испытывают на бихро- матическом клиническом анализаторе Аббот Ви-Пи посредством измерения уменьшения скорости окисления никотинамиддигидропи- ридина (НАДГП) при 24°С в течение 10 мин при длине волны 340 нм. Единица альдозре- дуктазы определяется как 1 мкмоль НАДГП, окисляющийся при 25°С за 1 мин с dl-глице- ральдегидом в качестве субстрата. Испытуемые вещества оцениваются при различных концентрациях. Результаты приводятся в виде процента ингибирования контрольной скорости окисления НАДГП.

Условия испытания.

Альдозредуктазу испытывают в 0,25 мл буферного раствора (50 ммоль/л) фосфата калия, рН 7,1, который содержит 400 ммоль/л сульфата аммония, 0,067 ммоль/л НАДГП и 0,5 ммоль/л dl-глицеральдегида. Добавляют достаточное количество фермента, чтобы обеспечить скорость окисления НАДГП, равную 4 мед. в течение 10 мин.

Результаты испытания представлены в таблице (эффективность ингибирующего альдозредуктазу действия выражена в виде молярной концентрации ингибирования на 50%: 1Сбо(молярн).

Концентрация ингибирования (на 50%) сопоставляемого соединения - 2-{4-бром- бензил)-1,2-дигидро-1-оксофталазин-4-илу- ксусной кислоты - 1,0 моль/л.

Формула изобретения

Способ получения производных 3-(бен- зотиазол-2-илалкил)-4-оксо-ЗН-фталазик-1 -илуксусных кислот или и( сложных алкило- вых эфиров формулы I О

C-ORj

( о R2s R6

где RI - атом водорода или Ci-Gj-алкил;

R2 - атом водорода или метил;

п 0 или 1;

R3 и RA, одинаковые или различные, - атом водорода, фтора, хлора или брома, трифторметил, С1-С4-алкил, Ci-Ci-алкокси или нитрогруппа;

Rs и Re, одинаковые или различные, - атом водорода, фтора, хлора или брома, трифторметил, СгСз-алкил, С1-С4-алкокси-, С1-С4-алкилтио- или нитрогруппа, отличающийся тем, что сое динение формулы II

о

г

N

N-CH2-fcH2)fi-Q

О R2

где R2, n, Rs и R4 имеют указанные значения RI - СгСд-алкил; Q - цианогруппа или группа формулы

OR-,

в которой RT- С-|-С4-алкил, или его аддитивную соль с галоидводородной кислотой под- в ергают взаимодействию с аддитивной

R

;NH

солью с галоидводородной кислотой соединения формулы И

-Re

H2N HS

при кипячении с обратным холодильником и в случае необходимости получаемый в виде сложного алкилового эфира целевой продукт-подвергают гидролизу с полученигде RS и Re имеют указанные значения, в 5 ем целевого продукта, в котором RI - атом расплаве или s органическом растворителе водорода.

V

при кипячении с обратным холодильником и в случае необходимости получаемый в виде сложного алкилового эфира целевой продукт-подвергают гидролизу с получени

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению производных ЗЧбензотиазол-2-илал- кил)-4-оксо-ЗН-фталазин-1-илуксусных кислот или их сложных алкиловых эфиров ф-лы Изобретение относится к способу получения новых биологически активных химических соединений, а именно производных 3-(бензотиазол-2-илалкил)-4-оксо-ЗН-фтала- зин-1-илуксусных кислот или их сложных алкиловых эфиров, которые действуют в качестве ингибиторов альдозредуктазы, их используют для лечения некоторых хронигде где RI - Н или С1-С4-алкил, R2 - Н или метил, или 1, Ra и R4, одинаковые или различные, - Н/, CI или Вг, трифторметил, С1-С4-ал- кил, С1-С4-алкокси- или нитрогруппа RS и Re, одинаковые или различные, -H,F,CI или Вг, трифторметил, С1-С4-алкил, Ci-C4 алкокси-, С1-С4-ЗЛКИЛТИО- или нитрогруппа. Цель - разработка способа получения соединений, обладающих способностью ингибировать альдозредуктазу в более низких концентрациях. Получение ведут из соединения ф-лы R-Q, где R2,n, Rs и R4 - указаны выше, RI - Ci - С4-алкил и Q - цианогруппа или группа ф-лы - C(NH)(OR), в которой R - Ci-Gi-ал- кил, или его аддитивной соли с галоидводо- родной кислотой и аддитивной соли с галоидводородной кислотой в расплаве или в органическом растворителе при кипячении с обратным холодильником и в случае необходимости получаемый в виде сложного алкилового эфира целевой продукт подвергают гидролизу с получением целевого продукта в котором Ri-H. 1 табл. ческих осложнений, вызванных избыточным содержанием сахара в крови, таких как катаракта, отслоение сетчатки и неврастения. Цель изобретения - получение новых производных оксофталазинилуксусных кислот, обладающих Способностью ингибировать альдозредуктазу в более низких концентрациях. (Л о VI 00 ю о 00 со