Способ количественного определения азатиоприна Советский патент 1991 года по МПК G01N31/16 

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения азатиоприна - 6-{1-метил-4-нитроимидазолил-5)-меркапто- пурин. и может быть использовано контрольно-аналитическими лабораториями.

Целью изобретения является повышение чувствительности и точности определения.

Пример 1. В мерную колбу на 100 мл помещают около 0,03 г (точная масса) порошка азатиоприна, прибавляют 10 мл 1 М раствора гидроокиси натрия (калия), раствор перемешивают и объем водой доводят до метки. В стакан для титрования помещают 5 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл 0,5 М раствора серной кислоты (рН 7,0) и водой доводят общий объем анали-зируемой смеси до 30 мл. Стакан помещают в титратор Т-107 и при включенной магнитной мешалке титруют анализируемый раствор 0,01 М раствором сульфата меди (II) и измеряют величину светопропускания при светофильтре № 1. Титрованный раствор добавляют к смеси по 0,1 мл через 10 с.

По полученным данным строят кривую титрования в координатах: г - V раствора,

мл, где г - величина светопропускания, %; V - объем раствора сульфата меди (II), мл.

Точку эквивалентности находят графически экстраполяцией двух прямых линий кривой титрования. Концентрацию исследуемого вещества в процентах находят по формуле

V-T-V2-100

LFRfi

где Н - масса препарата, взятая для анализа, г;

Т - титр стандартного раствора по исследуемому веществу, г/мл;

V - объем стандартного раствора, пошедший на титрование, мл;

Vi - объем испытуемого раствора, взятый для анализа, мл;

V2 - объем мерной колбы, мл.

1 мл 0,01 М раствора сульфата меди (II) соответствует 0,002773 г азатиоприна.

Результаты анализа азатиоприна (рН 7) и статическая обработка приведены в табл. 1.

В табл. 1 видно, что относительная ошибка определения азатиоприна предлагаемым способом +0,57%. Количественное определение азатиоприна при данной отноС/

С

о

ОС

i0

ос

&

О

сительной ошибке можно проводить при содержании его в пробе от 1,109 до 3,050 мг. Таким образом, нижний предел определения исследуемого вещества 1,109 мг, верхний 3,05 мг.

Аналогичные результаты получают при введении в исследуемый раствор препарата 0,4 - 0,6 мл (рН 6,5 - 7,5) 0,5 М раствора соляной кислоты.

Пример 2. Анализ азатиоприна в таблетках по 0,05 г (табл. 2).

Точную массу (около 0,06 г) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл. Азатиоприн растворяют в 10 мл 1 М раствора гидроксида натрия (калия) и водой доводят до метки. Раствор фильтруют. В стакан для титрования помещают 5 мл фильтрата и далее поступают аналогично примеру 1. Содержание азатиоприна в таблетках рассчитывают по формуле

V Т V2 Р ТГГЧЛ

С где Р - вес таблетки азатиоприна, г,

Н - масса порошка растертых таблеток, г.

В табл. 3 представлены результаты анализа азатиоприна за границей оптимального значения рН среды раствора при рН 8.

Установлено, что ошибка количественного определения анализируемого вещества при этом увеличивается до ±9,44% и получаются завышенные результаты, кроме того, на кривых титрования точка эквивалентности выражена нечетко, что и обуславливает большую погрешность анализа, При создании рН раствора менее 6,5 реакция практически не протекает.

Исследование азатиоприна за границами концентрации титрованного раствора сульфата меди (II) представлено в табл. 4.

Установлено, что при концентрации реактива 0,015 М анализ препарата можно проводить при содержании его в пробе от 1,797 до 2,501 мг с относительной ошибкой ±0,91%. При 0,02 М концентрации титрованного раствора светопропускание продукта реакции с азатиоприном невозможно измерить прибором (зашкаливание стрелки гальванометра). При концентрации сульфата

меди(Н) 0,005 М анализ азатиоприна проводить нельзя, так как реакция протекает медленно и незначительно, а точка эквивалентности не фиксируется. Таким образом, для количественного определения азатиоприна можно

использовать 0,010 - 0,015 М раствор сульфата меди (II).

В табл. 5 и 6 представлены результаты анализа азатиоприна за границами концентраций исследуемого вещества в анализируемых пробах.

Установлено, что ошибка количественного определения при этом увеличивается до +4,19 - 13,34%. Причем получают сильно заниженные или завышенные результаты

анализа, что можно объяснить их невоспроизводимостью (табл. 5) и неподчиняемостью раствора основному закону светопоглоще- ния (табл. 6).

Сравнительные данные по затрате времени исследуемого вещества на один анализ, чувствительности и относительной ошибке приведены в табл.7

Из табл. 7 видно, что предлагаемый способ позволяет повысить точность анализа в

2,1 -2,5 раза, уменьшить время одного анализа в 2 - 4 раза по сравнению с прототипом и базовым объектом. Кроме того, предлагаемый способ позволяет значительно повысить чувствительность определения и сократить

затрату исследуемого вещества.

Формула изобретения Способ количественного определения азатиоприна путем растворения анализируемой пробы и титрования раствором реагента, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и точности определения, анализируемую пробу растворяют в растворе гидроксида натрия, титрование ведут в присутствии серной кислоты при рН

6,5-7,5 и в качестве реагента используют раствор сульфата меди (II).

Т а б л и ц а 1

Изобретение касается аналитической химии, в частности количественного определения азатиоприна, применяемого в медицине препарата. Цель - повышение чувствительности и точности анализа. Его ведут растворением пробы в растворе NaOH с последующим титрованием раствором СиЗОз в присутствии серной кислоты при рН 6,5-7,5. Эти условия повышают точность анализа в 2,1-2,5 раза при снижении времени его в 2-4 раза и повышении чувствительности с 0,01 до 3,1 -10 5 г/мл 7 табл

Таблица2

ТаблицаЗ

Таблица

Таблицаб

Таблицаб

Таблица