Способ стимуляции иммунного ответа организма Советский патент 1992 года по МПК A61B10/00 G01N33/53 

Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для стимуляции иммунного ответа у животных.

Известно, что воздействие магнитного поля на организм приводит к изменению иммунологической реактивности организма.

Наиболее близким к предлагаемому является способ стимуляции иммунного отве- та у животных путем введения эритроцитов, обработанных in vitro лизоцимом.

Сингенные эритроциты, обработанные 0,5%-ным раствором яичного лизоцима и введенные экспериментальным животным иммунизацией двухкратно с интервалом 24 ч внутрибрюшинно в дозе 2x10 клеток на 100 г массы тела, повышают показатели гуморального иммунного ответа - количество антителообразующих клеток (АОК) и розеткообразующих клеток (РОК) - в 5-6 раз по сравнению с контрольной группой.

Описанный способ стимуляции требует дополнительной (3-4 ч) обработки эритроцитов in vitro раствором лизоцима, при этом не исключена возможность введения в организм, наряду с модулированными эритроцитами, чужеродного белка (лизоцима), что может сопровождаться нежелательным аллергическим компонентом.

Целью изобретения является повышение эффективности за счет увеличения иммунного ответа у животных путем введения тяжелой фракции сингенных или аутологич- ных эритроцитов, подвергнутых действию электромагнитного излучения.

Указанная цель достигается тем, что экспериментальным животным, например крысам Вистар, перед иммунизацией однократно внутрибрюшинно в дозе 2х108 клеток на 100 г массы тела вводят тяжелую фракцию сингенных эритроцитов, предварительно подвергнутых действию магнитного излучения с параметрами 1000 Э (табл.2).

П р и м е р 1. Эритроциты интактных крыс подвергали воздействию электромагнитного излучения в дозе 500 Э в течение 20 мин. В качестве источника электромагнитных волн использовали стационарный элек- тромагнит (сила тока 1,3 А, напряжение 15В). Время экспозиции в магнитном поле выбрано в соответствии с: временем, приме(/)

С

оо х

го

01

няемым в клинике (20 мин), при котором наблюдается улучшение биохимических показателей крови. Облученные эритроциты вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 2 108 клеток на 100 г массы тела здоро- вым животным. В день введения сингенных эритроцитов животных иммунизировали эритроцитами барана, который вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 2 10 клеток на 100 г массы тела. Через 5 дней крыс умерщвляли и определяли в селезенке количество АОК и РОК. О степени стимуляции иммунного ответа судили по определяемым показателям по сравнению с контрольными животными, получавшими только эритроциты барана.

Так, количество АОК в опытной группе было в 3 раза, а РОК в 3,9 раз выше, чем в контрольной группе.. , .

Йммуномодулирующая активность син- генных эритроцитов, подвергнутых электро- магнитному воздействию, приведена в табл..

П р и м е р 2. Эритроциты интактных крыс экспонировали в электромагнитном поле напряженностью 1000 Э в течение 20 мин. Сингенные или аутологенные эритроциты после воздействия электромагнитного поля вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 2 108 клеток на 100 г массы тела здоровым животным одновременно с инъекцией эритроцитов барана в качестве иммунизирующего средства (см. пример 1). Через 5 дней крыс умерщвляли и определяли в селезенке количество АОК и РОК.

Полученные данные свидетельствуют, что количество АОК в опытной группе было в 7,2 раза, а РОК в 7,4 раза выше, чем в контрольной группе (см. табл.1).

П р и м е р 3,- На эритроциты интактных крыс воздействовали электромагнитным полем напряженностью 3000 Э в течение 20 мин. Сингенные или аутологичные эритро- циты после экспонирования в магнитном поле вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 2 108 клеток здоровым крысам, которых затем иммунизировали эритроцитами барана по схеме (см. пример 1). Через 5 дней в селезенке определяли количество АОК и РОК, которое было ниже, чем в конт- рольной группе.

Из приведенных примеров видно, что наиболее иммуностимулирующий эффект проявляют сингенные эритроциты, экспонированные, в электромагнитном поле на- пряженностью 1000 Э.

Пример 4. С целью более направленного и эффективного воздействия на организм животных исследовали иммуномодулирующую способность различных фракций эритроцитов, подвергнутых воздействию магнитного излучения напряженностью 1000 Э. Для этого перед экспонированием в магнитном поле эритроциты фракционировали в градиенте плотности яичного альбумина. Получали 3 фракции: легкие (молодые) эритроциты с плотностью меньшей 1,079. средние, имеющие плотность 1,091-1,105, и тяжелые (старые) эритроциты, плотность которых превышала 1,117. Фракции эритроцитов выдерживали 20 мин в поле электромагнитных волн и вводили здоровым крысам однократно внутрибрюшинно в дозе 2 108 клеток на 100 г массы тела. Затем животных иммунизировали эритроцитами барана по схеме (см. пример 1). На 5-й день в селезенке определяли количество АОК и РОК. Полученные данные показали, что наиболее иммунномодулирующей активностью обладает тяжелая фракция эритроцитов. Так, показатели АОК и РОК в селезенке по сравнению с контрольной группой возрастают соответственно в 15 и в 10 раз.

В табл.2 приведена иммуномодулирую- щая активность различных фракций эритроцитов, подвергнутых электромагнитному воздействию, напряженностью 1000 Э. ,

В табл.3 приведены данные, характеризующие иммуномодулирующую активность различных доз сингенных эритроцитов, экспонированных в магнитном поле напряженностью 1000 Э.

Результаты исследований показали, что применение указанного способа стимуляции иммунного ответа не требует длительной обработки эритроцитов, исключается введение в организм нежелательных химических агентов (чужеродного белка лизоци- ма), быстрее (однократная инъекция эритроцитов) и значительнее (особенно тяжелая фракция эритроцитов) повышает показатели гуморального иммунного ответа у здоровых крыс.

Способ может быть использован в эксперименте и в ветеринарии для стимуляции гуморального иммунного ответа у животных.

Формула изобретения

Способ стимуляции иммунного ответа организма путем введения в организм отработанных in vitro эритроцитов, отличаю- щ и и с я тем, что, с целью повышения эффективности способа, путем снижения аллергических проявлений, обработку эритроцитов проводят электромагнитным полем напряженностью 1000 Э в течение 20 мин при20-25°С,

Таблица 1

Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для стимуляции иммунного ответа у животных. Целью изобретения является повышение стимуляции иммунного ответа у животных путем введения тяжелой фракции синген- ных эритроцитов, подвергнутых действию электромагнитного излучения напряженностью 1000 Э. 3 табл.

Таблица 2

Таблица 3

Продолжение табл. 3