Способ диагностики инфекционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний, протекающих с инфекционно-аллергическим и аутоиммунным компонентом.

Известен способ диагностики инфек- ционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний путем фотометрического определения иммунных комплексов в плазме или сыворотке крови, образующихся при добавлении специального антигена.

Недостатком известного способа является необходимость взятия не менее 30-40 мл крови, что в условиях неблагоприятной эпидемиологической ситуации по СПИД нежелательно. Известный способ не исключает параспецифические и неспецифические реакции, что снижает диагностическую ценность результатов и не всегда объективизирует клинический диагноз.

Цель изобретения - упрощение и повышение чувствительности способа диагностики инфекционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний.

Поставленная цель достигается путем использования в качестве объекта исследования для иммунодиагностики мочи обследуемых больных

Способ осуществляют следующим образом.

У обследуемого при мочеиспускании или катетеризацией собирают в стерильную посуду 30-40 мл мочи, в которой визуально определяют степень мутности. При наличии мутности, соответствующей эталону II-IV, моча непосредственно используется в иммунологическом исследовании. При мутности, соответствующей эталону I, мочу

;hO

00

со о о

дополнительно выдерживают в течение 4-6 при температуре 4-8°С.

Для иммунодиагностического исследования инфекционно-аллергических заболеваний используют набор стандартных микробных аллергодиагностикумов, например выпускаемых Казанским НИИВС. а для иммунодиагностики аутоиммунных заболе- ваний - тканевые антигены, полученные из гомогенатов висцеральных органов по изве- стному способу. Рабочие разведения эмульсий и растворов антигенов получают путем разбавления 1 мл в равном объеме физиологического раствора натрия хлорида с последующим отстаиванием в течение 30 мин при комнатной температуре.

Иммунодиагностическое исследование проводится путем фотометрического определения количественного содержания иммунных агрегатов в моче. Для каждого антигена и аллергена готовят последовательные разведения от 1:30 до 1:30720 (10 пробирок) в дистиллированной воде. В кюветы ФЭК-М наливают по 1,7 мл исследуемой мочи (опыт) и дистиллированной воды (контроль). О устанавливают по воде. Затем берут 0,1 мл из 10-й пробирки соответствующего аллергена или антигена добавляют в опыт и колориметрируют, затем из 9-й пробирки и т.д. Количество иммунных агрегатов определяют по следующей формуле:

0,.jy)(xit г) +(и - У1 (УЗ Уз)

(«-x./fc-y,)2 Ч«-«гУг(Уз-У2)г

г.

В случае отсутствия в моче антител к специфическому антигену или аллергену иммунные агрегаты не образуются и оптическая плотность мочи непрерывно снижается. В зависимости от интенсивности реакции преципитации получают один из трех вариантов перегиба кривой: пологое снижение оптической плотности плато или пик.

Результаты оцениваются следующим образом: Qv 0,004 - отрицательная реак- ция; Qv 0,160 - слабоположительная реакция; 0 0.9298 - положительная реакция; Qy 1,657 - резкоположительная реакция.

Диагностическое значение имеют результаты, соответствующие слабоположи- тельному, положительному и резкоположи- тельному показателям. Варьирование положительных результатов в пределах диагностических значений свидетельствует об интенсивности патологического процесса.

5 10 15

0 5 0

5

0 5

0

5

Результаты отличаются строгой специфичностью и позволяют решить диагностические задачи, связанные с обследованием больного.

Пример 1.У20 больных с I и 11 стадией атеросклеротической дисциркуляторной энцефалопатией параллельно исследованы кровь и моча с использованием 20 антигенов сосудов и тканей головного мозга. Установлены следующие нарушения: позвоночная артерия 0,33 ± 0,09 (моча) 0.29 ± 0,06 (кровь); передняя мозговая артерия 0,48 ± 0,11 - 0,52± 0,13; средняя мозговая артерия 0,45 ± 0,11 - 0,54± 0,13; височная кора 0,25± 0,005 - 0,22± 0,007; теменная кора 0,218± 0,060-0,234± 0,080.

Пример 2. У больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом параллельно исследованы кровь и моча. Получены следующие результаты (моча-кровь): тон- зиллярный антиген 0,782± 0,140 - 0.820 ± 0,180; стрептококк 0,427± 0,015- 0,432 ±0,016: стафилококк 0.722± 0,170- 0.718± 0,110.

Пример 3. Параллельно исследованы моча и кровь 20 больных с диагнозом цирроз печени, Получены результаты: антиген паренхимы печени 0,442± 0,094 - 0,419± ±0,008; антиген соединительно-тканого замещения печени 0,834± 0,134 - 0,867± ±0,184.

Пример 4. Обследованы моча и кровь 10 больных инфекционно-аллергической бронхиальной астмой. Получены следующие результаты: антиген трахеи 0,111± ± 0.018 - 0,123 ± 0,031: антиген бронхов 0,483± 0,083 - 0,465± 0,072; антиген легких 0,874± 0,117-0,856+ 0,134.

Таким образом, к преимуществам предлагаемого способа иммунодиагностики инфекционно-аллергических и аутоиммунных заболеваний относится использование в качестве исследуемой жидкости физиологического экскрета организма (мочи), исключение манипуляций и операций, связанных с применением шприцев, нарушением кожных покровов и забором крови, чувствительность и простота методического исполнения.

Формула изобретения 1. Способ диагностики инфекционно- аллергических и аутоиммунных заболеваний путем выявления антител к специфическому антигену в исследуемой жидкости организма, отличающийся тем. что, с целью упрощения способа, выявление антител ведут в моче, в которой предварительно определяют степень мутности.

2. Способ по п.1,отличающийся тем, что, с целью оптимизации способа, мочу, соответствующую эталону I мутности, выдерживают при 4-8°С в течение 4-6 ч..

Использование: изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний, протекающих с инфекционно-аллер-: гическим и аутоиммунным компонентом. Цель - упрощение способа. Для этого исследуют мочу обследуемого больного с последующим использованием иммунологических тестов, например метода фотометрического определения иммунных агрегатов. При этом предварительно определяют степень мутности и используют мочу, соответствующую стандарту мутности II-IV. Если степень мутности соответствует стандарту 1, то ее выдерживают при 4-8°С в течение 6-8 ч. 1 з.п. ф-лы. СО С