Способ получения производных катехина Советский патент 1992 года по МПК C07C235/66 

Изобретение относится к новым производным катехина общей формулы

НО

Известно использование для ингибиро- вания СОМТ 3,4 -дианурокси-2-метилфено- на формулыUQ

rtrt-x-CHj

0 СхШ3

VI

to ю

ND

чэ

CJ

Изобретение касается производных ка- техина и, в частности, получения соединений общей формулы 3-ОН, 4-ОН, 5-Х- CeH2-C(0)-NRiR2, где NRifa- п-бензоилпи- перидиниевая группа или при RI - Н Ra - бензил, низший гидроксиалкмл, адамантил; X - N02 или CN, проявляющих ингибйрова- ние против фермента катехин-0-метилтран- сферазы специфического действия, что может найти применение в медицине и биологии. Цель изобретения - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут обработкой соответствующим амином защищенного по гидр оксилу галои- дангидрида бензойной кислоты с последующим гидролизом для снятия защитных групп по гидроксилу. Новые соединения практически не блокируют биосинтез жизненно важных катехинаминов, обеспечивают перенос метильной группы от 5-аденозил-Ьметионина (известные вещества проникают через барьер кровь - мозг и блокируют биосинтез катехинаминов), в малой степени проникают через барьер кровь - мозг. 1 табл. (/ с

где NRiR2 - п-бензоилпиперидиниевая группа или при RI - Н R2 - бензил, проявляющим ингибирующую активность против фермента катехин-0-метилтрансфе- разы (СОМТ) специфического действия.

Однако активность его не очень высока.

Целью изобретения является разработка способа получения новых производных катехина, обладающих более высокой активностью по сравнению с известным,

Пример. М-(1-Адамантил)-3,4-диаце- токси-5-нитробензамид.

Раствор, содержащий 0,85 г 3,4-диаце- токси-5-нитробензойной кислоты и 0,32 мл тионилхлорида и каталитическое количество М,М-диметилформамида в 10 мл толуола, нагревают 1 ч при 80°С. Растворитель выпаривают в вакууме, растворяют остаток в 5 мл дихлорметана и прибавляют к смеси, содержащей 0,56 г 1-аминоадамантана солянокислого и 0,94 мл триэтиламина в 10 мл дихлорметана, перемешивают 15 мин при 0°С, а затем 15 мин при 20°С, К реакционной смеси прибавляют воду и отделяют дих- лорметановую фазу. Растворитель отгоняют в вакууме, получают 1,2 г (100%) желтого вязкого масла.

П р и м е р 2, Ы-(1-Адамантил)-3,4-диок- си-5-нитробензамид.

Раствор, содержащий ,2 г продукта, полученного в примере 1 и каталитическое количество серной кислоты в 10 мл метанола, кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. Прибавляют 20 мл воды и охлаждают, кристаллизуется 0,85 г (89,5%) целевого продукта, т.пл. 207-208°С.

Вычислено, %: С 61,43; Н 6,07; N 8,43.

Найдено, %: С 61,39; Н 6,31; N 8,61.

П р и м е р 3. 4-Циклогексилкарбонил-1- (3,4-диацетокси-5-нитробензоил)-пиперид ин.

Работают по методике примера 1, используя 0,58 г циклогексилкарбонилпипе- ридина и 0,38 мл 2,6-лутидина вместо солянокислого 1-аминоадамантана и триэтиламина соответственно. Выход 1,2 г (87%), вязкое желтое масло.

П р и м е р 4. 4-Циклогексилкарбонил-1- (3,4-диокси-5-нитробензолил)-пиперидин.

Работают по методике примера 2, используя 1,2 г продукта, полученного в примере 3. Выход 0,5 г (50%), т.пл. 155-165°С.

Вычислено, %: С 60,62; Н 6,43; N 7,44.

Найдено, %: С 60,48; Н 6,31; N 7,54.

П р и м е р 5. М-Бензил-3,4-диацетокси- 5-нитробензамид.

Превращают 0,75 г 3,4-диацетокси-5- нитробензойной кислоты в соответствующий хлорангидрид кислоты, как описано в примере 1. Его растворяют в 5 мл дихлорметана и прибавляют к раствору, содержащему 0,27 мл бензиламина и 0,5 мл 2,6-лутидина в 7 мл дихлорметана. Выход 0,95 г (96%), вязкое масло.

П р и м е р 6. М-Бензил-3,4-диокси-5-нит- робензамид.

Работают по методике примера 2, используя 0,95 г продукта, полученного в примере 5. Выход 0,5 г (60%), т.пл. 185-189°С.

Вычислено, %: С 58,74; Н 3,52; N 9,79.

Найдено, %: С 58,94; Н 3,59; N 9,59.

Пример. М-(1-Адамантил)-3,4-диаце- токси-5-цианобензамид.

Превращают 0,6 г 3,4-диацетокси-5-ци- анобензойной кислоты в соответствующий хлорангидрид и далее работают по методике примера 1. Выход 0,75 г (88%), вязкое масло.

ПримерЗ. М-(1-Адамантил)-3,4-диок- 0 си-5-цианобензамид.

Деацетилируют 0,75 г полученного продукта по методике примера 2. Выход 0,5 г (89%), т.пл. 253-255°С.

Вычислено, %: С 69,21; Н 6,45; N 8,97. 5 Найдено, %: С 69,50; Н 6,61; N 9,01.

П р и м е р 9. М-(3-Оксипропил )-3,4-ди- окси-5-нитробензамид.

Процесс проводят аналогично примерам 1 и 2, используя 3,4-диацетокси-5-нитробен- 0 зойную кислоту и З-аминопропан-1-ол. Выход 85%, т.пл. 160-163°С.

Вычислено, %: С 46,88; Н 4,72; N 10,93.

Найдено, %: С 47,03; Н 4,92; N 11,10.

Эффективность ингибирования СОМТ с 5 использованием полученных соединений.

СОМТ катализирует перенос метильной группы от З-аденозил-Ьметионина в ряду соединений катехиновой структуры.

Определение активности СОМТ in vitro. 0Активность in vitro для СОМТ была определена для препаратов ферментов, выделенных из мозга и печени крыс Han:WIST, весящих около 100 г. Крысы были умерщвлены диоксидом углерода, а ткани были удале- 5 ны и сохранены при -80°С до определения ферментативной активности.

Препарат фермента.был приготовлен путем гомогенизации тканей в 10 мМ фосфатном буфере, рН 7,4.(1:10 г/мл), который 0 содержит 0,5 мМ дитиотрейтола. Гомогенат центрифугируют при 15000xG в течение 20 мин. Супернатант повторно центрифугируют в течение 60 мин при ЮООООхС. Все процедуры были проведены при +4°С. Су- 5 пернатант от последнего центрифугирования (ЮООООхС) используют для определения растворимого СОМТ фермента.

Определение ИК-у. осуществляли путем 0 измерения СОМТ активности для нескольких концентраций лекарства в реакционной смеси, которая содержит препарат фермента, 0,4 мМ диоксибензойной кислоты (субстрат), 5 мМ хлорида магния, 0,2 мМ 5 5-аденозил- -метионина и ингибитор СОМТ в 0,1 М фосфатном буфере, рН 7,4. В контроль не добавляли ингибитор СОМТ. Смесь инкубируют в течение 30 мин при 37°С, после чего реакцию останавливают хлорной кислотой и удаляют центрифугированием