ФЕНИЛАЦЕТИЛГИДРАЗИД МАЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНУЮ АКТИВНОСТЬ В ОТНОШЕНИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ РС-ИНФЕКЦИИ Советский патент 1996 года по МПК C07C243/30 A61K31/165 

Изобретение относится к органической химии, к классу замещенных гидразидов алифатических ненасыщенных карбоновых кислот, а именно к фенилацетилгидразиду малеиновой кислоты I формулы
С₆Н₅СН₂CONHNHCOCH-CHCOOH, который проявляет противовирусную активность в отношении возбудителя респираторно-синтициальной (РС) инфекции, что позволяет предполагать возможность его применения в медицине в качестве лекарственного препарата с противовирусным действием.

Ближайшим аналогом по структуре к предлагаемому соединению является ацетилгидразид малеиновой кислоты II формулы
CH₃CONHNHCOCH-CHCOOH, который получен при взаимодействии малеинового ангидрида с гидразидом уксусной кислоты в среде уксусной кислоты по схеме
CH₃CONHNH₂__→ CH₃CONHNHCOCH=CHCOOH
II
Данные о биологической активности, в том числе противовирусной, аналога по структуре в литературе отсутствуют. Отсутствуют также какие-либо сведения о противовирусной активности в отношении возбудителя РС-инфекции среди замещенных гидразидов малеиновой кислоты и близких к ним по структуре соединений.

В качестве эталона сравнения выбран широко применяющийся в медицинской практике противовирусный препарат ремантадин, который активен и в отношении возбудителя РС-инфекции. Для сравнения противовирусного эффекта также использован контрольный физиологический раствор (плацебо).

Целью изобретения является поиск малотоксичных соединений, обладающих значительной противовирусной активностью в отношении возбудителя РС-инфекции, среди ацилгидразидов малеиновой кислоты.

Указанная цель достигается синтезом фенилацетилгидразида малеиновой кислоты, который проявляет противовирусную активность в отношении возбудителя РС-инфекции.

Предлагаемое соединение фенилацетилгидразид малеиновой кислоты получено при взаимодействии малеинового ангидрида с гидразидом фенилуксусной кислоты в среде уксусной кислоты при комнатной температуре по схеме
C₆H₅CH₂CONHNH₂__→ C₆H₅CH₂CONHNHCOCH=CHCOOH
(I)
П р и м е р. Фенилацетилгидразид малеиновой кислоты (I).

К раствору 1,50 г (0,01 моль) гидразида фенилуксусной кислоты в 30 мл уксусной кислоты при комнатной температуре добавляют при перемешивании раствор 0,98 г (0,01 моль) малеинового ангидрида в 20 мл уксусной кислоты, смесь выдерживают 1 ч, затем осадок отфильтровывают, промывают эфиром и кристаллизуют из хлороформа. Получают 2,15 г (86,7%) кристаллического соединения I с т. пл. 156-157^оС (разложение).

Найдено, С 58,22; Н 4,74; N 11,36.

С₁₂Н₁₂N₂O₄ мол. м. 248,24.

Вычислено, С 58,06; Н 4,87; N 11,28.

Соединение I представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в воде, диметилсульфоксиде, трудно растворимое в уксусной кислоте, хлороформе, ацетоне и нерастворимое в эфире и гексане.

Строение соединения I доказано данными элементного анализа, ИК- и ПМР-спектроскопии.

В ИК-спектре кристаллов соединения I, снятом в вазелиновом масле, имеются интенсивные полосы 3293, 3200-3180 см^-1, обусловленные валентными колебаниями групп NH амидных фрагментов, а также полосы 1723, 1688 и 1632 см^-1, соответствующие валентным колебаниям карбонила карбоксильной группы, связи С=C малеоильного фрагмента и двух карбонильных групп амидных фрагментов.

Спектр ПМР (ДМСО-Д₆), δ, м. д. 3,48 с (2Н, СН₂), 6,30 с (2Н, СН=СН), 7,23 с (5Н, С₆Н₅), 10,45 с (2Н, 2NH).

Исследование противовирусной активности в отношении возбудителя РС-инфекции, а также острой токсичности соединения I проводили в лаборатории патоморфологии патогенеза ВНИИ гриппа МЗ СССР.

Минимальную летальную дозу ЛД_мин. (мг/кг) соединения I определяли по методу Г. Н. Першина при внутрибрюшинном введении белым мышам массой 15-20 г в виде взвеси в 2% -ной крахмальной слизи. ЛД_мин. ремантадина (125 мг/кг) приведена в работе.

Исследование противовирусной активности соединения I проводили в опытах на культуре ткани L-41, зараженной возбудителем респираторно-синтициальной инфекции (РС), по схеме, изложенной в Методических указаниях, утвержденных МЗ СССР. В каждый опыт по испытанию противовирусного действия соединения I включали 3 группы пробирок с культурой:
пробирки, в которые вносили соединение I и вирус РС;
пробирки, в которые вносили растворитель (физиологический раствор) и вирус РС;
пробирки, в которые вносили только соединение I (контроль токсичности).

Оценку активности соединения I проводили путем определения количества пробирок с наличием цитопатогенного действия (ЦПД) и его интенсивности.

Проведенные исследования показали, что соединение I значительно снижает репродукцию РС-вирусов (см. таблицу).

Соединение I практически нетоксично белые мыши хорошо переносят его однократное введение через рот в дозе 1600 мг/кг. Острая токсичность ЛД₅₀ соединения I соответственно больше 1600 мг/кг, однако определить точное ее значение не представляется возможным вследствие pаздpажающего действия на желудочно-кишечный тракт.

Как видно из таблицы, соединение I уступает на 11% (81-70) по индексу эффективности ремантадину. Однако ремантадин почти в 13 раз (1600:125) токсичнее соединения I и условная широта противовирусного эффекта последнего, таким образом, в 8 раз больше, что подтверждает положительный эффект соединения I по сравнению с ремантадином.

Учитывая, что соединение I практически нетоксично и обладает выраженной противовирусной активностью в отношении вирусов респираторно-синтициальной инфекции, можно считать, что фенилацетилгидразид малеиновой кислоты формулы I целесообразно использовать как потенциальный химиопрепарат для лечения и профилактики РС-инфекции.

Таким образом, соединение I проявляет выраженную противовирусную активность в отношении возбудителя РС-инфекции и может найти применение в медицине в качестве специфического противовирусного лекарственного средства.

Использование: в медицине как проявляющее противовирусную активность в отношении возбудителя РС-инфекции. Сущность изобретения: фенилацетилгидразид малеиновой кислоты C₆H₅CH₂CONHNHCOCHCHCOOH. БФ C_1 2H_1 2N₂O₄, выход 86,7%. т. пл. 156-157^oС(разл.). Реагент 1: малеиновый ангидрид. Реагент 2: гидразид фенилуксусной кислоты. Условия реакции: в среде уксусной кислоты при комнатной температуре. 1 пр. 1 табл.

Фенилацетилгидразид малеиновой кислоты формулы
C₆H₅CH₂CONHNHCOCH-CHCOOH,
проявляющий противовирусную активность в отношении возбудителя РС-инфекции.