ЦИАНАЦЕТИЛ- ИЛИ ИЗОБУТИРИЛГИДРАЗИД МАЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ АНТИАГРЕГАНТНУЮ АКТИВНОСТЬ ПО ОТНОШЕНИЮ К ТРОМБОЦИТАМ Советский патент 1996 года по МПК C07C243/30 A61K31/16 

Изобретение относится к органической химии, к новым биологически активным соединениям класса ациклических кислород- и азотсодержащих соединений производных гидразида малеиновой кислоты, а именно к цианацетил- или изобутирилгидразидам малеиновой кислоты общей формулы I
RNHCOCH=CHCOOH, где R-N≡С-СН₂СONH(Ia) или (СН₃)₂СHCONH(Iб), которые проявляют антиагрегатную активность по отношению к тромбоцитам, что позволяет предполагать возможность их применения в медицине в качестве лекарственных препаратов с антиагрегантным действием по отношению к тромбоцитам плазмы крови.

Цель изобретения изыскание в ряду моно-N-замещенных гидразидов малеиновой кислоты новых соединений с более высокой антиагрегантной активностью по отношению к тромбоцитам.

Указанная цель достигается синтезом цианацетил- и изобутирилгидразидов малеиновой кислоты формулы I, которые проявляют антиагрегантную активность по отношению к тромбоцитам.

Новые соединения формулы I получены при взаимодействии гидразидов циануксусной кислоты или изомасляной кислоты с эквимолярным количеством малеинового антигидрида в среде этилацетата при комнатной температуре по схеме
RNH₂+ RNHCOCH=CHCOOH
П р и м е р 1. Цианацетилгидразид малеиновой кислоты (Ia).

К раствору 9,9 г (0,1 моль) гидразида циануксусной кислоты в 200 мл этилацетата при комнатной температуре добавляют при перемешивании раствор 9,8 г (0,1 моль) малеинового ангидрида в 100 мл этилацетата, смесь выдерживают в течение 3 ч, затем осадок отфильтровывают и кристаллизуют из этанола. Получают 18,8 г (95% ) кристаллического соединения Ia с т. пл. 153-154^оС (разложение).

Найдено, С 42,48; Н 3,64; N 21,20.

С₇Н₇N₃O₄ (мол. м. 197,17).

Вычислено, С 42,65; Н 3,58; N 21,31.

ИК-спектр, γ, см^-1 (кристаллы): 3140, 3200, 3280 (NH амид), 3050 (СН=), 1717 (СOOH), 1685 (СН=CH), 1630 (СONH).

Спектр ПМР, δ, м. д. (СД₃)₂SO (ГМДС): 3,78 с (2Н, СН₂), 6,42с (2Н, СН= СН), 10,40ш (3Н, 2NH, OH).

П р и м е р 2. Изобутирилгидразид малеиновой кислоты (Iб).

К раствору 10,2 г (0,1 моль) гидразида изомасляной кислоты в 150 мл этилацетата при комнатной температуре добавляют при перемешивании раствор 9,8 г (0,01 моль) малеинового ангидрида в 100 мл этилацетата, смесь выдерживают 2 ч, затем осадок отфильтровывают и кристаллизуют из этанола. Получают 19,6 г (98%) кристаллического соединения 1б с т. пл. 169-170^оС (разло- жение).

Найдено, С 48,24; Н 6,13; N 14,12.

С₈H₁₂N₂O₄ (мол. м. 200,21).

Вычислено, С 48,00; Н 6,04; N 13,99.

ИК-спектр, γ, см^-1 (кристаллы): 3190-3200 (NH амид), 3060 (СН=), 1710 (СOOH), 1672 (CH=CH), 1630 (CONH).

Спектр ПМР, δ, м. д. (СД₃)₂SO (ГМДС): 1,0д (6Н, 2СН₃), 2,48 сл. с. (1Н, СН), 6,35с (2Н, СН=СН), 10,07ш (2Н, 2NH), 11,20ш (1Н, OH).

Изменение структуры новых соединений формулы I по сравнению с аналогом по структуре II приводит к увеличению антиагрегантной активности по отношению к тромбоцитам.

Новые соединения были испытаны на острую токсичность и на антиагрегантную активность в отношении тромбоцитов.

Острую токсичность определяли на нелинейных белых мышах массой 16-25 г. Исследуемые соединения вводили в хвостовую вену в виде водного раствора из расчета 0,1 мл на 10 г массы животного в возрастающих дозах. При этом учитывали дозы, вызывающие гибель животных от 0 до 100% Результаты обрабатывали методом Литчфильда и Уилкоксона с вычитанием ЛД₅₀ при Р= 0,05 на микроЭВМ.

Антиагрегантную активность исследовали фотометрическим методом Борна с тромбоцитами плазмы собак и оценивали в процентах падения оптической плотности. Агрегация тромбоцитов вызывалась АДФ в дозе 0,05 мг/мл. Соединения Ia и Iб, аналог по структуре (II) испытывали в одной концентрации (0,67 мг/мл), которая в пересчете на вес животного составляет 1/20 от ЛД₅₀ аналога по структуре, а эталон сравнения в 1/10 от его ЛД₅₀.

Результаты испытания биологической активности приведены в таблице, из которой видно, что оба новых соединения проявляют высокую антиагрегантную активность по отношению к тромбоцитам, значительно превосходя в этом отношении аналог по структуре (соответственно, вещество Iа в 1,8 раза, и вещество Iб в 1,6 раза) и эталон сравнения (соответственно вещество Iа в 2,4 раза, вещество Iб в 2,1 раза).

Определение острой токсичности показало, что средние смертельные дозы (ЛД₅₀) новых соединений и аналога по структуре мало отличаются и составляют: Iа 450 (416,7-486,0) мг/кг, Iб 580 (547,2-614,8) мг/кг, аналога по структуре II 540 (477,9-610,2) мг/кг; ЛД₅₀ этанола сравнения равна 27 (23,5-31,0) мг/кг.

Таким образом, новые соединения проявляют высокую антиагрегантную активность, значительно превосходящую активность аналога по структуре и эталона сравнения, при токсичности, близкой к токсичности аналога по структуре. Следовательно, соединения могут найти применение в медицине в качестве лекарственных средств для профилактики и лечения больных с тромбоэмболическими осложнениями, в основе которых лежит повышенная агрегантная активность тромбоцитов.

Использование: в медицине, так как проявляет антиагрегатную активность по отношению к тромбоцитам. Сущность изобретения: продукт - цианацетил- или изобутирилгидразид малеиновой кислоты RNHCOCH=cHCOOH, где R-N ≡ C-CH₂NH(1a), (CH₃)₂CHCONH(1b) 1a C₇H₇N₃O₄. Т. пл. 153-154^oС;1б, C₈H_1 2N₂O₄. Т. пл. 169-170^oС. Реагент 1: гидразид циануксусной кислоты или изомасляной кислоты. Реагент 2: малеиновый антигидрид. Условия реакции: эквимолекулярные количества реагентов в среде этилацетата при комнатной температуре. 1 табл.

Цианацетил- или изобутирилгидразит малеиновой кислоты формулы
RNHCOCH = CHCOOH,
где R означает или (CH₃)₂CHCONH,
проявляющий антиагрегатную активность по отношению к тромбоцитам.