Способ получения белковой основы для питательных сред Советский патент 1992 года по МПК C12N1/00 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к способам приготовления питательных сред при выращивании микроорганизмов.

Целью изобретения является упрощение способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу приготовления белковой основы для питательных сред, включающему промывание сырья водой, измельчение его и гидролиз с последующей фильтрацией и стерилизацией, используют биомассу дождевых червей в количестве 15-300 г/л воды, гидролиз осуществляют термофильными микроорганизмами Bacillus stearothermo- phillus взятыми в количестве 1-10 -5-10 м. кл. при 58-64°С в течение 2-4 ч,

П р и м е р 1. Дождевых червей в количестве 100 г промывают в воде, измельчают, заливают 1 л водопроводной воды и разливают в качалочные колбы емкостью 700 мл в количестве 100 мл в каждую.

Посевной материал получают выращиванием термофил (В. stearoThermopblllus штамм 510, 517, 518 и т.д., депонированы в музее живых культур института ИБФМ г. Пу- щино) на агаровых пластинках с МПА при 62°С в течение 2-4 ч.

Выросшие колонии смывают физиологическим раствором и доводят до концентрации 1-109 м.кл/мл по стандарту ГКИ.

В каждую колбу со tOO мл субстрата добавляют 1 мл бактериальной суспензии В, stearothermophlllus и инкубируют при 62°С в течение 2 ч. Полученный гидролизат фильтруют, контролируют рН, добавляют агар- агар и автоклавируют при 1 атм в течение 0,5 ч. Полученную среду разливают по чашкам Петри и остужают.

Среда на основе гидролизата дождевых червей обладает достаточной прозрачностью, оптимальным содержанием белка (до 60% по сухому веществу), не изменяет своих свойств в течение 2 мес хранения при комнатной температуре, что соответствует

сл го VI сл ю

логичным характеристикам для стандартного мясо-пептонного агара.

Г) р и м е р 2. Дождевых червей в количестве 15 г промывают в воде, измельчают, заливают 1 л воды и подвергают фермента- тивному гидролизу при 58°С в течение 4 ч при помощи В. stearpthermophillus штамм 510 в количестве 5-10 м.кл. Из полученного гидролизата готовят плотную питательную среду.

При посеве на такой среде кишечная палочка Е. coll штамм К-12 (референс- штамм) образует через 24 ч инкубирования характерные для данного вида микроорганизмов колонии. Контролем служит рост E.coll на стандартном мясо-пептонном агаре.

П р и м е р 3. Дождевых червей в количестве 300 г промывают в воде, измельчают, заливают 1 л воды и подвергают ферментативному гидролизу бактерий В. stearothermophillus штамм 517 при 64°С в течение 2 ч. Из полученного гидролизата готовят плотную питательную среду.

При посеве на такой среде кишечная палочка Е. соН образует через 24 ч инкуби- рования характерные для данного вида микроорганизмов колонии. Контролем служит рост кишечной палочки на стандартном мясо-пептонном агаре.

П р и м е р 4. Питательную среду на основе гидролизата, приготовленную предлагаемым способом (60 г на 1 л), проверяют на пригодность t росту различных групп микроорганизмов i(p. Escherlchia, i,

Salmonella, Staphylococcys, Pseudomonas, Bacillus). В качестве контрольной среды используют стандартный мясо-пептонный агар.

Из свежевыращенных на агаровых пластинках колоний микроорганизмов готовят бактериальные суспензии с концентрацией 1 -103м.кл,/мл по стандарту мутности ГКИ и высевают на чашки Петри со средой по 0,1 мл. Чашки инкубируют в термостате при 37°С в течение 1, 2 и 3 сут. Выросшие колонии микроорганизмов подсчитывают, Контролем служит рост этих микроорганизмов на стандартном мясо-пептонном агаре. Данные высевов представлены в таблице.

Преимуществами предлагаемого способа получения белковой основы для питательных сред является упрощение способа за счет использования биомассы дождевых червей. Предлагаемый способ занимает 8 ч./

Формула изобретения

Способ приготовления белковой основы для питательных сред, включающий промывание водой, измельчение и гидролиз сырья с последующей фильтрацией и стерилизацией, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве сырья используют биомассу дождевых червей в количестве 15-300 г на 1 л воды, а гидролиз осуществляют термофильными микроорганизмами Bacillus stearothermophillus, взятыми в количестве 1-107-5-107 м. л./мл, при 58-64°С в течение 2-4 ч.

Использование: в микробиологической промышленности при приготовлении питательных сред для выращивания микроорганизмов. Сущность изобретения: биомассу дождевых червей в количестве 15-300 г промывают 1 л водопроводной воды, измельчают и подвергают ферментативному гидролизу. Гидролиз осуществляют с помощью термофильных микроорганизмов Bacillus stearothermophlllus, взятых в количестве 1-107-5 107м.кл./мл, при58-64°Св течение 2-4 ч. Использование биомассы дождевых червей приводит к упрощению способа. 1 табл.