Способ дифференциальной диагностики хронического персистирующего гепатита и хронического активного гепатита Советский патент 1992 года по МПК G01N33/68 

(Л

С

Изобретение относится к медицине, инфекционным болезням и гепатологии. Цель: обеспечение повышение точности дифференциальной диагностики хронического персистирующего гепатита и хронического активного гепатита. Сущность изобретения: количественная оценка в биоптатах печени фермента ксантиноксидазы, значения активности которой от 0,1268 до 0.2124 ед позволяют диагностировать хронический персистирующий гепатит, а значения 0,2638 ед. и выше - хронический активный гепатит. Способ может быть применен также для прогнозирования дальнейшего течения хронического персистирующего гепатита и хронического активного гепатита.

Изобретение относится к медицине, инфекционным болезням и гепатологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики хронического персистирующего гепатита (ХПГ) и хронического активного гепатита (ХАГ) у лиц с хроническим вирусным поражением печени.

Известно общепринятое морфологическое исследование биоптатов печени, заключающееся в окраске материала гематоксилином и эозином, по Ван-Гизону, азуром и в последующем изучении препаратов методами световой микроскопии. Основными признаками, позволяющими осуществить морфологическую дифференциальную диагностику ХАГ и ХПГ, являются степень воспалительной активности, выраженность и распространенность некрозов гепатитов, наличие так называемых ступенчатых некрозов, а также степень выраженности склеротических изменений в печени.

Однако по ряду причин возможности дифференциальной диагностики ХПГ и ХАГ на основе данных морфологического исследования ткани печени ограничены.

Трудности в морфологической дифференциальной диагностике встречаются прежде всего в тех случаях, когда заболевание развивается вскоре после острого вирусного гепатита и морфологические признаки ХПГ и ХАГ на ранних сроках формирования хронического гепатита еще недостаточно определились. Кроме того, причиной недостоверного результата может быть сходство морфологически изменений при ХПГ и ХАГ с минимальной агрессией воспалительного инфильтрата, с одной стороны, и при морфологическом обострении ХПГ и вялотекущем ХАГ - сдруой И. нзкоi4

O J Сз 01

ел

Ч

нец, вследствие неправомерного развития хронического воспалительного процесса в печени и ограниченного объема биоптата в ряде случаев возможно получение образцов из относительно малопораженных участков органа, что приводит к неправильной интерпретации морфологических данных по типу или гиподиагностики хронического гепатита в целом, или постановке диагноза ХПГ вместо ХАГ.

Целью изобретения является повышение точности дифференциальной диагностики ХПГ и ХАГ.

Поставленная цель достигается тем, что согласно известному способу дифференциальной диагностики ХПГ и ХАГ, включающему исследование биоптата печени, гистохимически определяют активность ксантиноксидазы и при значениях от 0,1268 до 0,2124 ед. диагностируют ХПГ, а при значениях 0,2638 ед. и выше - ХАГ,

При обледовании 27 больных было установлено, что изменения активности ксантиноксидазы характеризуют степень активности патологического процесса в печени и позволяют с высокой степенью точности разграничить ХАГ и ХПГ.

Способ осуществляют следующим образом.

Материалом служит ткань печени больных, полученная с помощью пункционной биопсии печени по методу Менгини. Полученный биоптат немедленно замораживают в жидком азоте. Затем в криостате при температуре -20°С делают срезы толщиной 15 мкм. Активность ксантиноксидазы (КО) выявляют методом В.А.Симоненковой и И.Г.Бондаренко. Инкубационная смесь содержит гипоксантин { Реанал, Венгрия), 2,5 ЮМ; нитросиний тетразолий (Хема- пол, Чехословакия) 0,4 мг/мл; феназинме- тасульфат (Серва, ФРГ), 0,04 мг/мл; поливиниловый спирт 22%; 0,05 М трис- HCI-буфер, рН 8,0, Срезы инкубируют в течение 30 мин при 37°С. Количественную оценку активности КО осуществляют с помощью цитоспектрофотометрического комплекса на базе ЭВМ МК-64, измеряя оптическую плотность гранул формазана в 50 полях зрения и, производя подсчет средних величин показателя, результаты выражают в единицах оптической плотности.

Активность фермента КО в ткани печени измеряли у 11 больных ХПГ 16 больных ХАГ и сравнивали с результатами обследования контрольной группы (10 человек). При ХПГ средняя величина показателя составила 0,1696±0,0192ед., приХАГ-0,3009±0.0174 ед. Отличия статистически достоверны, р

0,001. Как при ХПГ, так и при ХАГ активность КО существенно отличалась от контрольных величин показателя (0.1096± ±0,0062 ед). Определяя границы доверительного интервала при вероятности 95% с помощью критерия Стьюдента, установили, что активность фермента у больных ХПГ может находиться в интервале от 0,1268 до 0,2124 ед., а при ХАГ - от 0,268 до 0,3380 ед.

0П р и м е р 1. Больной П., 25 лет поступил в клинику для обследования. Из анамнеза известно, что 5 лет назад перенес острый вирусный гепатит А, 2 года назад - острый вирусный гепатит 8. Наблюдался в

5 поликлинике. За 2 недепи до госпитализации - слабость, тошнота, боль в правом под- реберье. При поступлении жалобы прежние. Жултухи нет. Умеренная гепато- мегалия (край печени на 1.5 - 2,0 см ниже

0 реберной дуги по срединно-ключичной линии). Лабораторные показатели: билирубин 5 мкмоль/л; АлАТ 0,1 ммоль/ч -л; тимоловая проба 6,0 ед.; сулемовый титр - 1,9 мл; альбумины - 61,2%; глобулины 18,7%; про5 тромбиновый индекс - 64,3%, НВ А не обнаружен, С диагностической целью больному произведена прижизненная пункци- онная биопсия печени. Скудные изменения в материале не позволяли судить о степени

0 активности хронического вирусного гепатита (прототип).

Активность КО в ткани составила 0,1633±0,0062 ед , что давая ; основание установить диагноз ХПГ, подтвержденный

5 при дисперсном наблюдении за больным.

П р и м е р 2. Больной М., 16 лет. направлен в стационар для обследования. В 1976 году перенес острый вирусный гепатит. С 1978 г наблюдается в поликлинике с диагно0 зом хронический вирусный гепатит, HBsag(+). При очередном осмотре в январе 1987 г обнаружено повышение активности АлАТ (1,1 ммоль/ч -л), увеличение тимоловой пробы (25 ед.). При поступлении жалоб

5 не предъявлял, температура субфебриль- ная. Определялась умеренная гепатомега- лия (край печени пальпировался на 1,0 см ниже реберной дуги по срединно-ключичной линии), Лабораторные показатели:

0 АлАТ 6,3 ммоль/ч- л; билирубин 21,5 мкмоль/л; тимоловая проба 15,4 ед., сулемовый титр 1,4мл. Был выявлен НвА. Больному с диагностической целью произведена прижизненная пункционная биопсия пече5 ни. На основании данных морфологического обследования (прототип) был поставлен диагноз ХАГ. Однако величина активности КО в ткани печени (0,2120±0,0030 ед.) свидетельствовала о наличии у больного ХПГ.

При диспансерном наблюдении диагноз ХПГ подтвержден.

ПримерЗ, Больной К., 45 лет, посту- пил в клинику с жалобами на слабость, снижение аппетита, субфебрильную темпера- туру, потемнение мочи. Из анамнеза известно, что 4 года назад с диагнозом хрониче- ский вирусный гепатит лечился в стационаре. Ухудшение самочувствия в течение 6 дней, предшествовавших госпита- лизации, В прошлом морфологическое исследование печени не проводилось. При поступлении состояние удовлетворительное, температура субфебрильная. Выявлялась субиктеричность склер, увеличение печени, край которой пальпировался на 3 см ниже реберной дуги. Пальпировалась селезенка. Лабораторные показатели: АлАТ 3,4 ммоль/ч-л: билирубин 23,0 мкмоль/л; тимоловая проба 24,2 ед.: сулемовый титр 1,15 мл. На шестой день пребывания в стационаре с диагностической целью больному выполнена прижизненная пункционная биопсия печени. Активность КО в ткани печени составила 0,3378±0,0011 ед., т.е. была выше величины 0,2638, что позволило установить диагноз ХАГ. подтвержденный при дальнейшем наблюдении за больным.

П р и м е р 4. Больной У., 25 лет, поступил в стационар для обследования. Из анамнеза известно, что 2 года назад перенес острый вирусный гепатит В. Спустя 2 месяца после выписки из больницы стал отмечать периодические боли в правом подреберье. Ухудшение самочувствия в течение 2 недель, предшествовавших госпитализации. Появилась слабость, усилились боли в правом подреберье, температура субфебрчльная. При поступлении жалобы прежние. Кожа и слизистые обычной окраски. Печень на 3 см выступает из-под края реберной дуги. Лабо- раторныё показатели: билирубин б

мкмоль/л: АлАТ - 16,0 ммоль/ч-л; тимоловая проба 8,5 ед.; сулемовый титр 1,4 мл; протромбиновый индекс 91%; альбумины 58,4%; глобулины 21,9%. Нв А не обнаружен, с диагностической целью больному произведена прижизненная пункционная биопсия печени. По результатам морфологического исследования биоптата нельзя было с достоверностью судить о степем, активности хронического вирусного гепатита.

Активность КО в ткани печени составила 0,2681 ±0,0031 ед. что указывало на наличие у больного ХАГ. Диагноз был подтвержден при диспансерном наблюдении.

Способ позволяет разграничить ХПГ и ХАГ, возникающих в исходе острого вирусного гепатита, обеспечить дифференциальную диагностику ХАГ и ХПГ в ранние сроки у больных, впервые обратившихся за медицинской помощью в связи с подозрением на хронический гепатит, прогнозировать течение заболевания,благоприятное при хроническом персистирующем гепатите и не благоприятное, с зачастую фатальным исходом, при хроническом активном гепатите, обеспечить своевременное назначение адекватной терапии ХПГ и ХАГ.

Формула изобретения Способ дифференциальной диагностики хронического персистирующего гепатита и хронического активного гепатита путем исследования биоптата печени, о т л и ч а го- ид и и с я тем. что. с целью повышения точности диагностики, количественно определяют активность ксантиноксмдазы и при значениях от 0,1268 до 0,2124 ед. диагностируют хронический персистирующий гепатит, а при значениях 0,2638 ед. и выше - хронический активный гепатит.