Штамм бактерий МYсовастеRIUм аVIUм используемый для получения преципитирующей сыворотки Советский патент 1992 года по МПК C12N1/00 C12N1/20 

научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. Л. А. Тарасовича под № 39.

Морфология. Клетки имеют вид палочек длиной 1,2-3,0 мкм. окрашиваются по Гра- му, по Цилю-Нильсену окрашиваются в красный цвет.

Культуральные характеристики. На плотной яичной среде Левенштейна-Йенсе- на при температуре 37°С вырастает за 12-15 дней, на картофельно-глицериновой среде Павловского - за 13-16 дней в виде мелких блестящих колоний. Размножается при температуре 22-45°С, не размножается при температуре 50°С. Оптимум роста отмечен при 30-40°С.

На жидких питательных средах растет на поверхности в виде влажной плотной пленки белого цвета, среда остается прозрачной.

Физиологические свойства. Не растет на плотной питательной среде Левенштей- на-Йенсена с добавлением 5% хлористого натрия. Растет на среде с салицилатом натрия. Не продуцирует ниацин, не редуцирует нитраты, не гидролизует Твин-80, не обладает галактозидазой и уреазой. имеет активные никотинамидазу и нитразинами- дазу.

Состав жирных кислот, определенный методом сопиролитической газовой хроматографии соответствует видовому составу Mycobacterlum avlum.

По реакции агглютинации на стекле с типоспецифическими сыворотками к трем серотипам Mycobacterium avlum штамм Mycobacterium avium № 561 был отнесен к серотипу 2.

После заражения морских свинок бактерийной массой в количестве 1,0-1,5 мг (влажный вес бактерийной массы) внутримышечно животные в течение трех месяцев оставались здоровыми, на вскрытии патоло- го-анатомическая картина микобактериоза отсутствовала.

Антигенные свойства. При введении кроликам вызывает образование преципи- тинов з титре 1:16-1:32 (в реакции преципитации в агаре).

Пример 1. Получение антигенного материала.

Штамм Mycobacterium avlum № 561 засевали на жидкую синтентическую среду Линниковой-Могилевского и выращивали при 37°С в течение 4-6 недель. Бактерийную

массу отделяли на стерильном бумажном фильтре, промывали дистиллированной водой, заливали на 18-24 часа 2%-ным фенолом, повторно отмывали дистиллированной водой, помещали в коллодиевые пистоны по

480-520 мг с последующим замораживанием притемпературе-40-45°С. Разрушенную бактерийную массу заливали десятикратным объемом стерильной дистиллированной воды и выдерживали в холодильнике

при температуре 3-5°С в течение 40-48 часов. Суспензию фильтровали через стерильный бумажный фильтр. Оставшуюся массу использовали в качестве антигенного материала для иммунизации животных.

П р и м е р 2. Получение преципитирую- щей и агглютинирующей сывороток.

Кроликов массой 2,0-3,0 кг иммунизировали антигенным материалом штамма Mycobacterium avium № 561, полученным

как в примере 1. Антигенный материал вводили в количестве 50,0-100,0 мг в 0,8-1.0 мл неполного адъюванта Фрейнда внутрикож- но в три разные места еженедельно в течение 3-5 недель. Полученную сыворотку

исследовали в реакции диффузионной преципитации в агаре. В реакции диффузионной преципитации образовывалась линия преципитации при разведении 1:16-1:32 с экстрактами штаммов М. avlum, M.

intracellulare (вид, родственный М, avlum), полученных из ГИСК им. Л. А. Тарасевича (2 штамма) и свежевыделенных от свиней и из торфа (4 штамма), а также с экстрактом штамма М. avlum № 561 и не образовывала

линий преципитации с эксратактами штаммов следующих видов микробактерий М. tuberculosis, M. bvols M. fortuitum, M. phlel, М kansasil, M. chelonei.

Экстракты микобактерий для реакции диффузионной преципитации в агаре готовили растиранием 20,0-30,0 мг бактерийной массы со стерильным стеклянным песком в 0,2-0,3 мл дистиллированной воды, подщелоченной 0,1 H.NaOH до рН 9,5-10,0. Формула изобретения

Штамм бактерий Mycobacterium avlum ГИСК Ns 39, используемый для получения преципитирующей сыворотки.

Использование: медицинская и ветеринарная микробиология, серологическая идентификация микроорганизмов. Сущность изобретения: получение штамма Mycobacterium avium, обладающего антигенными свойствами. Штамм выделен из лимфоузла хряка, положительно реагирующего на птичий туберкулин. Морфология: клетки имеют вид палбчек длиной 1,2-3,0 Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии и представляет собой новый штамм Mycobacterium avium, отличающийся антигенными свойствами, и может быть использовано для серологической идентификации микроорганизмов, Известны штаммы микобактерий Mycobacterium avium, обладающие культу- рально-морфологическими и химическими свойствами, характерными для микробактерий данного вида, выделенные в США и мкм. Окрашиваются по Граму, по Цилю- Нильсену окрашиваются в красный цвет. Культуральныехарактеристики: на плотной яичной среде Левенштейна-Йенсена при 37°С вырастает за 12-15 дней, на картофельной глицериновой среде Павловского за 13- 16 дней в виде белых мелких блестящих колоний. Размножается при 22-45°С, не растет при 50°С. Оптимум роста - 30-40°С. На жидких питательных средах растет на поверхности в виде влажной плотной пленки белого цвета, среда остается прозрачной. Через 4-8 недель роста среда окрашивается в желтый цвет при сохранении прозрачности. Физиолошческие .свойства. Не растет на плотной питательной среде Левенштейна-Йенсена с добавлением 5% холристого натрия, растет на среде с салицилатом натрия. Не продуцирует ниации, не редуцирует нитраты, не гидролизует Тоин-80, не обладает галактозидазой и уреазой. Имеет активные никотин а мидазу и пиразинамидз- зу. Антигенные свойства. При введении кроликам вызовет образование преципитинов в титре 1:16 - 1:32 (в реакции преципитации в агаре). Франции и хранящиеся в коллекциях этих стран (1.2). Целью изобретения является штамм Mycobacterium avium, характеризующийся антигенными свойствами. Штамм Myconacterlurn avium 561 выделен из лимфоузла хряка, положительно реагирующего на птичий туберкулин, в 1988 году. Штамм Mycobacterium avium Nk 561 депонирован в коллекции Государственного (Л о 00 о со ю