Способ получения производных цефалоспорина, заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, или их фармацевтически совместимых солей с щелочными металлами Советский патент 1993 года по МПК C07D501/06 C07D501/34 C07D501/46 A61K31/545 

ч со

XJ

Изобретение относится к-полусинтетическим цефалоспориновым антибиотикам, в частности к получению производных цефалоспорина, заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, или их фармацевтически совместимых солей с щелочными металлами, которые обладают бактерицидной активностью, что может найти применение в медицине. Цель - расширение спектра бактерицидного действия. Синтез ведут взаимодействием 7-аминоце- фалоспорина, заместитель которого имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, с N-ацилирующим реагентом в среде растворителя. Изучены минимальные концентрации торможения роста бактерий в жидкой среде, которые для новых соединений в основном составляют величины от 0,25 до 1 мг/мл против 32-128 мг/мл для известного антибиотика цефотзксима. Новые соединения эффективны против более широкого спектра бактерий по сравнению с цефотак- симом. Новые соединения нетоксичны, их суточная доза может составить 5-500 мг/кг. 4 табл. С

Изобретение относится к способу получения новых антибиотиков цефалоспори- нового ряда, а именно производных цефалоспорина, заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл общей формулы I

Н Н

где А - карбоксильная группа - СООН и RI - радикал формулы

-N N-Q -OCO-N

N-Q

СН,

iQ

СЛ Ю

или

СО

или А - карбоксилатная группа - СОО и RI - радикал формулы

(dd, 1H, J 5 и 7 Гц, СН), 6,68 (5, 1 Н, Аг), 7,25 (S, 2H, NH2), 7,92 (d, 1Н, J 12 Гц, Аг), 8,88 (5, 1Н,СН-), 9,44 (d, 1H. J 7 Гц, NH). Аналогичным образом получают:

b). 6Р-транс -4- 3-карбокси-1-(2-фторэ- тил)-6,7-дифтор-1,4-дигидро-4-оксохинолин-7-ил -1- 2-карбокси-8-оксо-7-{(феноксиаце- тил)амино -5-тиа-1-азабицикло 4.2.0 окт-2- ен-3-ил -метил -1 -метил пиперазинйодида.

NMR (ядерный магнитный резонанс) (MeaSO-de) д 3,15 (S, 3H, NCHs), 3,45-3,85 (m, 9H, 4xNCH2 и СН от 5СН2), 3,95 (d, 1H, Jo6m - 16,5 Гц, СН от SCH2), 4,39 и 4,77 (АВ, 2Н, J06m 13 Гц, NCH2), 4,61.и 4,64 (АВ. 2Н, Jo6iM 15 Гц, ОСН2СО), 4,83-5,07 (т, 4Н, .NCH2CH2F), 5,24(d, 1H, J 5 Гц, СН), 5,82 (dd, 1 Н, J 5 и 7 Гц, СН), 6,95 (d, 2H, J 8 Гц, Аг), 6.97 (t. 1Н, J 8 Гц, Аг), 7,29 (t, 2Н, J 8 Гц). 7,96 (d, 1H, J - 12 Гц, Аг), 8,91 (S, 1H, СН-), 9,18 (d. 1Н, J 7 Гц, NH); инфракрасный спектр (IR) (КВг) 3400,. 1788, 1728, 1700, 1612 , масс-спектр m/z 716 (катион).

c). a, 7/(г)(2-амино-4-ти- азолил) (метоксиимино)ацетил амино -2- карбокси-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло 4.2. окт-2-ен-3-ил метил -4-(3-кэрбокси-1-этил-6- фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-хинолинил)- 1-метилпиперазинйодида.

NMR (Me2SO-d6) б 1.45 (brt, 3H. СНз от NEt), 3,15 (S, ЗН, МСНз), 3,50-3,95 (m, 9H, 4xNCH2 и СН от SCH2), 3,85 (S, ЗН, ОСН3), 3,99 (d, 1 Н, Jo6iu 16,5 Гц, СН от SCH2), 4,43 и 4,70 (АВ, 2Н, и0бщ 14 Гц, NCH2), 4,61 (brg, 2Н, СН2 от NEt), 5,31 (d, 1Н, J 5 Гц, СН), 5,94 (dd, 1 Н, J 5 и 8 Гц, СН), 6,76 (S, 1 Н, Аг), 7,30 (br, 2H, NH2), 7,31 (d. 1H, J 6,5 Гц. Аг), 8,03 (d, 1Н, J 12,5 Гц, Аг), 9,03 (S, 1 Н, СН-), 9,68(d,1H, J 8 Гц, NH); 1R(KBr) 1785,1720, 1680, 1628 , масс-спектр m/z 729 (катион),

d).6R-{6 a,lfi (2)(2-амино-4-ти- азолил) (метоксиимино)ацетил амино -2- карбокси-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло 4.2.0 окт-2-ен-3-ил -метил -4- 3-карбокси-б,8-ди- фтор-1-(2-фторэтил)-1,4-дйгидро 4-оксо-7- хинолинил -1-метилпиперазинйодида. NMR (Me2SO-d6) 6 3,15 (S, ЗН, NCHa), 3.50-3,90 (m, 9H, 4XNCH2 и СН от SCH2), 3,86 (S, ЗН, OCH3),3,96(d. 1H,, CHorSCHz), 4,42 и 4,73 (АВ, 2Н, и0бщ 14 Гц, NCH2), 4,85-5,10 (m, 4H, NCH2CH2F), 5,29 (d, 1 H, J - 5 Гц, СН), 5,93 (dd, 1H, J 5 и 7 Гц, СН), 6,86 (S, 1Н, Ar),7,24 (S, 2Н, Н2), 7,98 (d, 1H,J 12Гц,Аг), 8,94(5, 1Н,- СН-), 9,67 (d, 1H, J

- 7 Гц, NH); 1R (КВг). 3420, 1775, 1720, 1675, 1618см 1.

e). (6Р-транс)-4- 3-карбокси-6,8-дифтор- 1-(2-фторэтил)-1,4-дигидро-7-хинолинил -1- 2-(1,1-диметилэтокси)карбонил-7-(формиламино)-3-карбокси-8-оксо-5-тиа-1-азаби- цикло 4.2.0 окт-2-ен-3-ил -метил -1-метил- пиперазинйодида.

1R (КВг) 3440, 1785, 1720, 1610 масс-спектр m/z 666 (катион).

П р и м е р 2. Внутренней соли-мононат- риевой соли a, 7 fi (2)(2- амино-4-тиазолил)(1-карбокси-1-метил)- эток- си имино ацетил амино З-карбокси-8- оксо-5-тиа-1-азабицикло 4.2.0 -окт-2-ен-3- ил метил -4- 3-карбокси-1-(2-фторэтил)-6,3- диф- тор-1,4-дигидро-4-оксохинолин-7-ил}- 1-мет-илпиперазингидроокиси

15

CO,No

СОдН

и н

Раствор 102 мг полученного по примеру 1 соединения в 0,4 мл анизола, 1,5 мл хлористого метилена и 1,5 мл трифторуксусной кислоты выдерживают 12 ч при 0°С. После фильтрования, выпаривания досуха при пониженном давлении добавки хлористого метилена и снова выпаривания досуха остаток растирают с простым эфиром, причем получают твердое вещество. Последнее растворяют в водном натрийфосфатном буферном

растворе с рН 7 и очищают методом жидкостной хроматографии высокого давления с обратной фазой.

NMR(Me2SO-d6-D20)(5 1,37(5. ЗН, СНз), 1,44 (S, ЗН, СНз), 3,10 (S, ЗН, NCH3). 3,39 и

3,88(АВ, 2Н,и0бщ 16,5 Гц, SCH2). 3,40-3,70 (m, 8Н, 4xNCH2), 4,12 и 5,17 (АВ. 2Н, J06u, 12,5 Гц, NCH2), 4,62-4,94 (m, 4H. NCH2CH2F), 5,15(d, 1H, J 5 Гц, СН), 5,73 (d, 1H, J 5 Гц, СН), 6,74(S, 1 Н, Аг), 7,83 (d, 1 Н. J 12 Гц. Аг),

8,47 (brs, 1H, CH-), 1R (КВг) 3400, 1772, 1618,1595см 1;

масс-спектр m/z 859 (М+Н). Аналогичным образом получают (6В-транс)-4- 3-карбокси-6,8-дифтор-1(2-фторэтил)-1,4-дигидро-7-хинолинил -1-Ц 2-карбокси-7-(формиламино)-8-оксо-5-тиа- 1-азабицикло 4.2.0 окт-2-ен-3-ил метил -1- метилпиперазинтрифторацетата.

NMR (Me2SO-d6)..5 3,14 (S, ЗН, NCHs), 3,50-3,85 (m, 9H, 4xNCH и СН2 от SCH2), 3,95 (d, 1H, JoBtu 16,5 Гц, СН от SCH2), 4,35 (d, 1Н, , СН от NCH2), 4,82-5,05 (m, 5Н, NCH2CH2F и СН от NCH2), 5,23 (d, 1 Н, J

- 5 Гц, СН). 5,84 (dd, 1H, J 5 и 7 Гц, СН). 7.96 (d, 1 Н, J 13 Гц, Аг), 8,17 (S. 1 Н, NCHO), 8,92(S, 1H,-CH-).9.11(d. 1H. J - 7 Гц. NH); 1R 3400, 1780, 1720, 1685 масс-спектр т/г 610 (катион).

водный раствор экстрагируют этилзцета- том. Этилацетатный экстракт промывают два раза водой..Водные фазы соединяют (рН 8,7) и смешивают, с 0,025-молярным водным раствором кислого фосфата натрия до рН 7,8, Раствор выпаривают при пониженном давлении (для удаления следов этила- цетата) и затем подвергают хроматографии на колонке, содержащей 9 г Сш-силикагеля (Waters). Колонку промывают водным буферным раствором фосфата натрия с рН 7,8 и затем элюируют со ступенчатым градиентом воды-ацетонитрила (0-30% ацетонитри- ла) под давлением. Соответствующие фракции соединяют, выпаривают и сушат вымораживанием, получают 127,6 мг (59,7%) заглавного соединения. 52 мг этого соединения растворяют в 0,5 мл воды и добавкой бикарбоната натрия устанавливают величину рН 8. Для осаждения продукта добавляют 24 мл холодного ацетона. После центрифугирования избыточную жидкость удаляют, и остающееся твердое вещество растирают с холодным ацетоном, фильтруют и сушат при пониженном давлении над полупятиокисью фосфора. Получают 38 мг заглавного соединения: 1R (КВг) 3410, 2540, 1762,1672, 1622;

масс-спектр (FAB) 837 (M+Naf 815 (М+Н)4.

П р и м е р 6. Получение (6Р -транс) (3-карбокси-1-циклопропил-6-фтор-1,4-ди- гидро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пиперазинил - карбонил окси метил -8-оксо-7-(феноксиа- цетил)амино -5-тиа-1-азабицикло 4.2.0 -окт- 2-ен-2-карбоновой кислоты..

П н FrirV0 M ъ

. /

0 TvL-v A 6COjH . о

Раствор 184 мг (0,262 ммоль) используемого в примере 5 трифторацетата в 5 мл THF перемешивают пр.и 0-5°С и смешивают с раствором 101 мг (1,2 ммоль) бикарбоната натрия в 4,5 мл воды и затем с холодным раствором 54 мг (0,314 ммоль) феноксизце- тилхлорида в 1,5 мл THF по каплям. Всю смесь перемешивают при 0-5°С 20 мин и затем 3 ч при комнатной температуре. Смесь выпаривают при пониженном давлении (для удаления THF). Водный остаток разбавляют водой, промывают этилацетатом, охлаждают во льду и подкисляют для осаждения продукта до рН 2,5. Полученный осадок отфильтровывают и промывают водой и этилацетатом; получают 130 мг заглавного соединения. Последнее очищают методом жидкостной хроматографии высокого давления с Cie-обратной фазой на колонке с силикагелем при применении градиента натрийфосфатного буферного раство- ра-ацетонитрила с рН 7,5. После выпаривания и сушки вымораживанием соответствующих фракций остаток растворяют в воде. Раствор фильтруют и затем подкисляют для осаждения продукта до рН 2,5. Масс-спектр (FAB) т/г 722 (М+Н)+. Пример. Получение a . 7/3

(2)-7-(2-амино-4-тиазолил)-(1-карбокси-1 -метил-этокси)имино ацетил амино -3- Ц4- (3-карбокси-1-циклопропил-6-фтор-1,4-диг- идро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пиперазинил - карбонил -оксиЗметил -8-оксо-5-тиа-1-азабицикло 4.2.0 -окт-2-ен-2-карбоновой кислотыо

-ХсогнFY# X e 4H

/ Jv«4JK ГуАу .

А

С02М

Суспензию 552 мг(0,786 ммоль) используемого по примеру 5 трифторацетата в 14 мл THF охлаждают во льду и смешивают с

раствором 240 мл (2,85 ммоль) бикарбоната натрия в 15 мл воды. Смесь перемешивают 20 мин и затем смешивают с раствором 384 мг (0,804 ммоль) сложного 1,1-диметилэтилово- го эфира (2-амино-4-тиазолил)-2-(2бензотиазолил)тио -2-оксоэтилиден амино окси метил-пропановой кислоты в 6 мл THF. Смесь перемешивают 15 мин при охлаждении льдом и затем около 12 ч при комнатной температуре. Для удаления THF

смесь выпаривают при пониженном давлении. Остающийся водный раствор промывают этилацетатом и подкисляют до рН 2,7. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат при пониженном давлении над сульфатом кальция. Получают 540 мг промежуточного продукта, который растворяют при охлаждении в 2,4 мл и 6 мл трифторуксусной кислоты и выдерживают около 12чприО°С. Смесь выпаривают затем

при пониженном давлении, смешиваютс 10 мл хлористого метилена и потом снова выпаривают при пониженном давлении. После добавки 4 мл хлористого метилена и 16 мл этилацетата остаток затвердевает. Последний отфильтровывают, промывают этилацетатом и сушат на воздухе, получают 520 мг заглавного соединения в форме трифторацетата. Этот продукт растворяют с четы- рехзквивалентн.ым бикарбонатом натрия в

0,025-молярном натрийфосфатном буферном растворе с рН 7,5 и очищают методом хроматографии на Сш-силикагеле с буферным раствором-ацетонитрилом с рН 7,5 в качестве растворителя. Соответствующие фракции соединяют и подкисляют до рН 3,

Соль трифторацетатной кислоты, используемую в примере 5, ацилируют уксус- номуравьиным ангидридом в водном растворе ТГФ в присутствии бикарбоната натрия с получением заглавного соединения: 1R 3420, 1782, 1700, 1625 масс- спектр (FAB) m/z 616 (М+Н)+.

Аналогичным образом, как в примере 5.

однако с применением в качестве исходного

продукта трифторуксусной соли (6R-TpaHc)7-амино-3-{Ш11-(3-карбокси-1-этил-6-фтор-1,4дигидро-4-оксо-7-хинолинил)-3-пирролидинил амино карбонил окси метил -8-оксо-5Таблица 2

МНК в пробирке мг/мл, метод последовательного разведения

в среде агара

Таблица 3

Таблица 4