Способ определения парацетамола Советский патент 1993 года по МПК G01N21/64 

ел

с

Способ определения парацетамола заключается в том, что в качестве растворителя используют изопропиловый спирт, пробу обрабатывают 0,6 мл 8%-ного раствора гид- роксида калия, 0,8 мл хлороформа, нагревание проводят 15-20 мин при 70-80°С. Интенсивность флуоресценции измеряют при длине волны возбуждения 407 нм и длине волны излучения 512 нм всредедиметил- формамид - 10%-ный раствор гидроксида аммония, взятых в соотношении 9:1,5 табл,

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам анализа парацетамола, и может быть использовано в фармацевтическом и биофармацевтическом анализе.

Целью изобретения является снижение предела обнаружения парацетамола.

Для достижения поставленной цели предлагается способ, который заключается в том, что анализируемую пробу растворяют в изопропиловом спирте для обработки используют 8% раствора КОН прибавляют 0,6 мл 8% раствора гидроксида при объемном отношении КОН: хлороформ - 3-4, нагревают на водяной бане, температура 70-80°С в течение 15-20 мин. Интенсивность флуоресценции измеряют при длинах волн возбуждения 407 ими излучения 512 нм в среде диметилформамид 10% раствор гидроксида аммония, взятых в соотношении 9:1.

В табл.1 показана зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации и объема гидроксида калия и от объема хлороформа. Максимальная интенсивность флуоресценции соответствует использованию 8% раствора гидроксида калия, взятому в количестве 0,6 мл. При увеличении объема хлороформа от 0,8 до 1,2 мл интенсивность флуоресценции не изменяется, выбран объема 0,8 мл. В соответствии с табл.2 максимальные значения интенсивности флуоресценции достигаются при нагревании пробы на водяной бане температуры 80-80°С за 20-15 мин, В табл.3 представлена зависимость интенсивности флуоресценции от объемного соотношения диметилформамида и 10% раствора гидроксида аммония в смеси. В табл. 1-3 показаны результаты исследования проб с концентрацией парацетамола 10 мкг/мл. В табл.4 и 5 даны результаты определения па00

о

ы

00

со ы

рацетамола в субстанции и в пробах цельной крови соответственно.

П р и м е р 1. Определение парацетамола в субстанции.

Точную навеску парацетам ола (0,5- 0,002 г) внося в мерную колбу емкостью 100 мл и растворяют в иэопропиловом спирте, объем раствора доводят до метки (раствор А). 1 мл раствора 3 вносят в мерную колбу емкостью 50 мл и объем раствора доводят до метки изопропило- вым спиртом (раствор Б). К 1 мл раствора Б прибавляют 0,6 мл 8% раствора гидроксида калия, 0,8 мл хлороформа, пробу нагреваю на водяной бане температуры 70- 80РС в течение 15-20 мин. Объем доводят до 5 мл смесью диметмлформамида и 10% раствора гидроксида аммония (9:1) и измеряют интенсивность флуоресценции при 407м им (возбуждение) и 512 нм (излучение). Концентрация вещества в пробе определяется по калибровочному графику. Предлагаемый способ позволяет определять 0,02-40 мкг/мл. Результаты определения представлены в табл.4.

П р и м е р 2. Определение парацетамола в жидкости организма.

Готовили пробы крови, содержащие известное количество парацетамола. К 1 мл пробы прибавляли 8 мл изопропилового спирта, встряхивали, центрифугировали, жидкую фазу упаривали и переносили на хроматографическую пластинку параллельно со свидетелем. После разделения зону, выявленную по свидетелю вУФ-светесдли- ной волны 254 нм, переносили в пробирку, прибавили 1 мл изопропилового спирта, 0,6 8% раствора гидроксида калия, 0,8 мл хлороформа. Пробу нагревали при температуре 70-80°С 15-20 мин, объем доводили до 5 мл диметилформамидом и 10% гидроксидом аммония (9:1). Интенсивность флуоресценции измеряли при 407 нм (возбуждение) и 512 нм (излучение) против серии стандартных и.контрольного растворов. Результаты представлены в табл.5.

Таким образом, способ по сравнению с

известным более чувствителен (определяемый минимум концентраций снижен от 0,1 до 0,02 мкг/мл, что составляет 5 раз) и может быть использован для определения количества парацетамола в жидкостях

организма и лекарственных средствах с пониженным содержанием препарата. Формула изобретения Способ определения парацетамола, включающий растворение анализируемой

пробы в спирте и обработку пробы гидроксидом калия и хлороформом с последующим нагреванием раствора, облучение раствора светом и регистрацию интенсивности флуоресценции раствора, по величине которой проводят определение, от л ича ющи- й с я тем, что, с целью снижения предела обнаружения, пробу растворяют в изопропило- вом спирте, для обработки используют 8% -ный раствор гидроксида калия при объемном соотношении последнего и хлороформа 3:4, а нагре- вание проводят при 70-80°С, возбуждают флуоресценцию раствора видимым светом с длиной волны AI 407 нм, а регистрацию флуоресценции проводят на длине

волны Аа 512 нм в смеси диметилформамида и 10%-ного раствора гидроксида аммония, взятыми в соотношении 9:1.

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Таблица 4

Таблица 5