Способ определения периодов гипертонической болезни Советский патент 1993 года по МПК G01N33/92 

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, преимущественной областью его использования является диагностика различных периодов клинического течения гипертонической болезни (ГБ) - гипертонического криза и внекризового периода.

Цель изобретения - повышение точности и надежности способа диагностики различных клинических периодов течения ГБ путём определения .величины антиокислительной активности (АОА) липидов эритро- цитарных мембран во взаимосвязи с количеством мембранных липидов.

Способ осуществляется следующим образом.

Из локтевой вены больного в пробирку с раствором цитрата натрия отбирают 5 мл крови, центрифугируют 10 мин (4000 об/мин) и затем отделяют эритроцитарную массу от плазмы. Эритррмассу дважды промывают физиологическим раствором (перемешиванием и центрифугированием по 5 мин при 2000 об/Мин). После второго центрифугирования надосэдок сливается и 1 мл . промытой эритромссы переносится в пустую пробирку, куда добавляется для гемолиза эритроцитов дистиллированная вода (до 10 мл), после перемешивания смесь центрифугируют при 4000 об/мин 10 мин, надоса- док (8,5 мл) удаляется. К оставшейся смеси добавляют физиологический раствор (до 10 мл), содержимое перемешивается и вновь центрифугируется в том же режиме. Поочередное добавление в пробирку дистиллированной воды и физиологического раствора с последующим центриифугированием проводится трижды, в результате чего получается 1 мл стандартного раствора мембран . эритроцитов, который переносится в пробирку с притертой пробкой, куда после этого добавляется 8 мл экстрагирующей гептан- изрпропаноловой смеси (в пропорции 1:1). В первые 30 мин пробирку, содержащую мембраны и экстрагирующую смесь, встряхивают каждые 5 мин, а затем в пробирку добавляют 1,2 мл 0,02 н раствора HCI и плавно перемешивают. Смесь выдерживают при 1б-20°С в течение 60 мин. Смесь разделяется на 2 слоя. 3 мЯ верхнего (гепта- нового) слоя, содержащего экстрагированные лилиды, отбирается и в них

ел

С

00

о

CJ 00 VJ

о

определяется.количество липидов по известной методике с применением сульфофос- фованилинового реактива 4. Рассчитывается количество общих липидов в мг на 1 мл стандартного раствора эритроцитарных мембран, полученного из 1 мл промытой эритромассы, по калибровочному графику для определения концентрации общих липидов. Затем, измеряется обьем оставшейся части верхнего (гептанового) слоя, которая переносится в бюкс и выпаривается до сухого вещества на водяной бане при 60°С. В дальнейшем рассчитывается общее количество липидов, содержащихся в бюк- се, и в него добавляется хлороформ с таким расчетом, чтобы в 1 мл хлороформа содержалось 0,005 г липидов. В реакционный сосуд вносится 1,14 мл аутоокисляемого органического соединения кумола, 0,005 г инициатора окисления азобисизобутиро- нитрилаи 1 мл хлороформенного экстракта, содержащего 0,005 г липидов. Реакционный сосуд герметично подключается к установке для определения АОА липидов, которая заполняется кислородом при постоянном давлении. Реакционную смесь инкубируют в жидкости термостата при 65°С при постоянном встряхивании с помощью магнитной мешалки и определяют скорость поглощения кислорода этой реакционной смесью. О величине АОА липидов судят по времени задержки окисления кумола, т.е. по времени задержки поглощения кислорода реакционной смесью.

Рассчитывают диагностический коэф- фициент(ДК) - произведение величины АОА липидов мембран (АОАлм) и количества мембранных липидов (Лм):.

ДК АОАлм х Лм.

В среднем для гипертонического криза ДК 20,3 ± 1,3, для внекризового периода течения ГБ ДК 50,3± 2,4. Исчисление этого показателя у каждого из обследованных больных и анализ полученных данных пока- зали, что ДК от 6,4 до 29,4, характерен для 95,5% больных ГБ во время гипертонического криза, а от 40,5 до 77,2 - для 96% больных, находящихся во внекризовом периоде.

П р и м е р 1. Больной М., 47 лет, был впервые госпитализирован в терапевтическое отделение по поводу повышения АД. Диагноз при поступлении: гипертоническая болезнь.

При исследовании АОА липидов и их количества в эритроцитарных мембранах обнаружено: величина АОА составила 4 мин, общие липиды - 1,6 мг/мл, ДК 6,4. На основании этих данных было высказано

мнение о наличии у больного гипертонического криза.

Дальнейшее изучение анамнеза, клини- ко-лабораторные данные, наблюдение за

динамикой процесса и эффективностью терапии подтвердили данное предположение, П р и м е р 2. Больная К., 48 лет, поступила в терапевтическое отделение в плановом порядке при отсутствии значительных

жалоб с умеренно повышенным АД (170- 175/100-105 мм рт.ст.). Диагноз при поступлении: гипертоническая болезнь, II стадия. При исследовании АОА липидов и их количества в эритроцитарных мембранах

5 обнаружено: величина АОА составила 13 мин, общие липиды - 1,47 мг/мл, ДК 19,1. Был сделан вывод о наличии у больной гипертонического криза.

Тщательное изучение анамнеза, эффек0 тивность терапии и динамика реабилитации больной подтвердили наличие у нее гипер- то нического криза.

ПримерЗ. Больной Л., 43 года, поступил в терапевтическое отделение по

5 поводу повышенного АД, выявленного при подготовке к операции на лор органах. Диагноз при поступлении: гипертоническая болезнь.

При исследовании АОА липидов и их

0 количества в эритроцитарных мембранах обнаружено: АОА составила 17 мин, общие липиды - 1,73 мг/мл, ДК 29,4. Полученные данные позволили сделать вывод о наличии у больного гипертонического криза.

5 При проведении комплексного клинического и лабораторно-инструментального исследования диагноз был подтвержден. Окончательный диагноз: гипертоническая болезнь, II стадия, криз.

0 П р и м е р 4. Больной В., 50 лет, поступил в терапевтическое отделение с резким повышением АД на фоне эмоционального стресса. Диагноз при поступлении: гипертоническая болезнь II стадии, криз.

5 При исследовании АОА липидов и их количества в эритроцитарных мембранах обнаружено: величина АОА составила 19 мин, общие липиды - 2,13 мг/мл, ДК 40,5. На основании этих данных был сделан аы0 вод о наличии у больного внекризового периода течения ГБ.

В дальнейшем, динамика состояния больного, быстрая нормализация АД при поддерживающей терапии позволили отка5 заться от предварительного диагноза наличия у больного гипертонического криза.

П р и м е р 5. Больная Ф., 45 лет, обследована амбулаторно по поводу повышения АД. Диагноз: гипертоническая болезнь II стадии.

При исследовании АОА липидов и их количества в эритроцитарных мембранах обнаружено: величина АОА составила 20 мин, общие липиды - 2,67 мг/мл, ДК 53,4. Бил сделан вывод о наличии у больной вне- кризового периода течения ГБ.

В дальнейшем при динамическом наблюдении предположение подтвердилось.

Примерб. Больной К., 39 лет, поступил в терапевтическое отделение с диагнозом: гипертоническая болезнь II стадии, криэовоё течение.

При исследовании АОА липидов и их количества в эритроцитарных мембранах обнаружено: величина АОА составила 34 мин, общие липиды - 2,27 мг/мл, ДК 77,2. На основании этих данных было высказано мнение об отсутствии у больного гипертонического криза.

В дальнейшем, наблюдение за боль- ным, быстрая нормализация его состояния с переходом на поддерживающую гипотен- зивйую терапию, а также выписка больного на fj-й день подтвердили предположение об отсутствии гипертонического криза.

П р и м е р 7, У служащей Е., 37 лет, при проведении профосмотра какой-либо патологий обнаружено не было.

При исследовании АОА липидов и их количества в эритроцитарных мембранах , обнаружено: величина АОА составила 33 мин, общие липиды - 2,80 мг/мл, ДК 92,4.

Таким образом, отсутствие гипертонической болезни было подтверждено.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить точность и надежность диагностики различных периодов клинического течения ГБ. Кроме того, отпадает необходимость использования сложной и дорогостоящей электронно-оптической регистрирующей аппаратуры. Хорошая воспроизводимость, относительная простота и доступность позволяют широко внедрить данный способ в работу учреждений прак-. тического здравоохранения.

Формулаизобретения Способ определения периодов гипертонической болезни, включающий отбор венозной крови, получение эритрицйтарных мембран, экстрагирование из них липидов и последующий их анализ, отличающийся тем, что, с целью повышения точности диагностики, определяют величину антиокислительной активности липидов эритроцитарных мембран при соокислении их к кумолом, затем рассчитывают диагностический коэффициент как произведение величины антиокислительной активности в минутах, содержащие общих липидов в мг/мл и при значении коэффициента 29,4 и ниже определяют наличие гипертонического криза, а при значении от 40,5 до 77,2 - внекризовый период гипертонической бо лезни.

Использование: диагностика периодов (криз, вне криза) течения гипертонической болезни (ГБ). Сущность изобретения: регистрируют количество общих липидов эрит- роцитарных мембран и их антиокислительную активность, рассчитывают уровень диагностического коэффициента. Способ повышает точность и надежность диагностики периодов течения ГБ, включаетхеобходимость использования сложной и дорогостоящей аппаратуры.