Способ получения сухих вирусных препаратов Советский патент 1993 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к технологии получения и хранения сухих вирусных препаратов и может быть использовано в медицинской и микробиологической промышленности.

Целью изобретения является упрощение технологии получения препарата с сохранением его биоактивности при длительном хранении при положительных температурах.

Это достигается следующей совокупностью существенных признаков. Способ включает расфасовку в емкости жидкого . вирусного материала с компонентами защитной среды, лиофилизацию материала в стерильных условиях до получения препарата в виде таблеток. Кроме того, в емкости вводят порции обезвоженного сорбента в виде слоев, нанесенных на открытые поверхности таблеток сухого вирусного материала с последующей герметизацией этих емкостей для хранения при положительных

температурах. В качестве сорбента используют зёрна ионита КБ-4П2 в Ma-форме с сорбционной емкостью, превышающей количество остаточной влаги в препарате.

Способ реализован следующим образом,

В суспензии, например вируса Венесуэльского энцефаломиелита лошадей (штамм ТС-83), растворяют при перемешивании стабилизирующие добавки (глюкозу, сахарозу, аминоуксусную кислоту, сыворотку крупного рогатого скота). Жидкий материал фасуют по 0,5 мл в пенициллиновые флаконы, Которые устанавливают на полках суб- лиматора LGA-0,5 (ГДР) и проводят л иофилизацию по стандартному режиму. Остаточная влажность лиофилизированных таблеток вирусного материала, определенная стандартным методом выдерживания образцов пои 105°С до постоянного веса, составляет 4,0±1,5% Определение биоактивности (биотитра) образцов проводят по

со

-«А

00 СО

стандартной методике на монослое культуры фибропластов куриных эмбрионов (ФЭК). Биотитр образцов выражают в бляш- кообраэующих единицах (БОЕ) на 1 мл ви- руссодержащей суспензии. Все операции по получению лиофилиэированного материала и определению его характеристик широко используются в вирусологической практике. Флаконы с лиофилизированным материалом делят на две части - контрольную и экспериментальную партии. Во флаконы экспериментальной партии (перед герметизацией) в стерильных условиях вводят порции обезвоженного сорбента в виде слоев, нанесенных на открытые поверхности таблеток сухого вирусного материала. Сорбционная емкость сорбента превышает количество остаточной влаги в препарате. В качестве сорбентов могут быть использованы цеолиты или ионнообменные смолы, например Na+ форма катионита КБ-4П2, имеющего влагоемкость 110 г воды на 100 г сорбента и насыпную плотность 1,0 г/см3. Катионит КБ-4П2 удобен для реализации способа, поскольку состоит из частиц сферической формы размером менее 0,1 см, имеющих значительную механическую прочность и большую сорбционную емкость. Для покрытия одной таблетки препарата в пенициллиновом флаконе катионитом КБ- 4П2 в форме достаточно 0,5 г этого сорбента. Далее емкости с контрольными и экспериментальными образцами герметично закупоривают и испытывают на сохране- ние биоактивности вируса ВЭЛ при температурах 20°С и 37°С в одинаковых условиях в течение длительного времени. В процессе хранения проводят анализ экспериментальных и контрольных образцов материала на биоактивность методом бляш- кообразующих единиц (БОЕ). Причем перед растворением таблеток во флаконах экспериментальных партий (при определении биотитра) сорбент из флаконов удаляется.

В табл.1 и 2 приведены экспериментальные данные по сохранению биоактивности вируса ВЭЛ в контрольных и экспериментальных партиях лиофилиэиро- ванного материала при температурах хранения 37°С и 20°С.

Как видно из табл.1, биоактивность образцов экспериментальной партии после 1,5 месяцев хранения при 37°С составляет 5,7 lg БОЕ/мл при отсутствии даже остаточной биоактивности в контроле (опыт 6). Хранение экспериментальных образцов при 20°С ведет к снижению биоактивности на 0,6 lg БОЕ/мл (т.е. в 3 раза) при снижении ее в контроле к 85 суткам на 3 fg БОЕ /мл (т.е.

в 1000 раз) (пример 10).

Технико-экономическая эффективность предлагаемого способа состоит в упрощении технологии получения новых вирусных препаратов при оптимизации их компонентных составов и подборе режимов сушки. В результате реализации данного способа отпадает необходимость в дорогостоящем оборудовании в постоянном контроле за остаточной влажностью экспериментальных

биопрепаратов, а также введения инертного газа в емкости или их вакуумирования перед герметизацией для увеличения срока хране.ния препарата, вследствие чего обеспечивается возможность получения и хранения новых препаратов в любых экспериментальных лабораториях. Формула изобретения 1. Способ получения сухих вирусных препаратов, включающий расфасовку в ем

кости жидкого вирусного материала с компонентами защитной среды, лиофилизацию материала в камере до получения препарата в виде таблеток и герметизацию емкостей для последующего хранения препарата, о тличающийся тем, что, с целью упрощения технологии получения препарата с сохранением его биоактивности при длительном хра-: нении при положительных температурах, в емкости перед их герметизацией вводят

сорбент воды а виде слоя, покрывающего поверхности таблеток лиофилизированного вирусного препарата, с сорбционной емкостью этого слоя, превышающей количество остаточной влаги в препарате.

2. Способ по п. 1,отличающийся тем, что в качестве сорбента воды используют зерна ионита КБ-4П2 в Na-форме, а соотношение исходного материала и ионита составляет не менее 1 мл:1 г при насыпной

плотности ионита 1 г/см3.

51818344 б

Та б л и ц а 1 Данные по сохранению биоактивности вируса ВЭЛ при температуре хранения 37°С

Использование: медицинская и микробиологическая промышленность. Сущность изобретения: жидкий вирусный материал фасуют в емкости с последующей его лиофи- яизацией в камере в присутствии сорбента до получения препарата в виде таблеток. На таблетки сухого материала наносят слой обезвоженного сорбента с последующей герметизацией емкостей. В качестве сорбента используют зерна ионита КБ-4П2 в Ma-форме с сорбционной емкостью, превышающей количество остаточной влаги в препарате.1 з.п. ф-лы, 2 табл.

Т а бл и ца 2 Данные по сохранению биоактивности вируса ВЭЛ при температуре хранения 20°С