СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ iea-ОКСИСТЕРОИДОВ Советский патент 1966 года по МПК C07J7/00 

Известны способы получения 16а-оксистероидов путем микробиологического гидроксилирования стероидов актиномицетами.

Для получения 16а-оксистероидов по предлагаемому способу 16-дезоксистероиды ф рментируюг с культурой Actinomyces gibsonii АТСС 6852 или Actinomyces cinnamoneus Benedict, выращенной на питательной среде, которая содержит источники углерода, азота и минеральные соли. По окончании ферментации продукты реакции извлекают несмешивающимися с водой растворителями и после обработкрт экстракта выделяют стероиды кристаллизацией или хроматографированием.

Пример 1. В 47 колб емкостью по 500жл, содержащих каждая 100 мл 24-часовой культуры Actinomyces cinnamoneus Benedict, которая выращена при 28° С на круговой качалке на питательной среде, содержащей 2% глюкозы, 1% кукурузного экстракта, 0,5%, поваренной соли и 0,5% карбоната кальция, вносят по 15 мг прогестерона в 0,3 мл этилового спирта и ферментируют при 28° С на круговой качалке в течение 77 час. Содержимое колб объединяют и экстрагируют хлористым метиленом (8 раз по 1 л). Экстракт упаривают до объема 500 мл, промывают 500 мл воды и упаривают в вакууме досуха. Остаток растворяют в смеси 40 мл метилового спирта и 10 мл воды и экстрагируют хлористым метиленом. Экстракт сушат над безводным сульфатом магния и фильтруют через 15 г нейтральной окиси алюминия, которую затем промывают хлористым метиленом. Фильтрат и промывной раствор объединяют, выпаривают в вакууме и получают 727 аморфного вещества. Перекристаллизацией из смеси ацетона с метиловым спиртом получают 180 мг хроматографически однородного 16а-оксипрогестерона с т. пл. 217-223°С. Из маточного раствора хроматографированием на колонке с 30 г нейтральной окиси алюминия выделяют еще 245 мг вещества, после перекристаллизации которого получают дополнительно 107мг

препарата с т. пл. 217-221° С. Общий выход

составляет 39% от теоретического количества.

Пример 2, В стальной ферментер с 20 л

питательной среды, содержащей 2%, глюкозы,

1% кукурузного экстракта, 0,5%. поваренной

соли, 0,5Vo карбоната кальция и водопроводную воду, вносят 1 л 48-часовой культуры Actinomyces gibsonii АТСС 6852, выращенной на питательной среде, содержащей 1 %. крахмала, 0,2% сульфата аммония, 0,1о/о сульфата

магния, 0,1% поваренной соли, 0,3о/о карбоната кальция и 0,1% фосфата калия. Актиномицет выращивают при 28° С при перемещивании и аэрации (20 л/мин) в течение 47 час, после чего в среду вносят раствор 3 г прогеруют при 28° с, перемешивании и аэрации в течение 69 час. По ококчаиии ферментации культуральную массу трижды экстрагируют хлористым метиленом (по 7 л) и упаривают экстракт в вакууме досуха. Остаток растворяют в хлористом метилене и фильтруют через слой нейтральной окиси алюминия. После упаривания фильтрата и промывного раствора получают 934 мг 16:а-прогестерона с т. ил. 207-216° С. После промывки охлажденным эфиром получают 795 мг препарата с т. пл. 210-219 С (30% от теоретического количества). Предмет изобретения Способ получения 16а-оксистероидов путем микробиологического гидроксилирования стероидов актиномицетами, отличающийся тем, что ферментацию 1б-дезоксистероидов ведут с помощью культур микроорганизмов Actinomyces gibsonii АТСС 6852 или Actinomyces cinnamoneus Benedict.