СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1ба-ОКСИСТЕРОИДОВ Советский патент 1968 года по МПК C12P33/14 

Известны способы получения 16-а-оксистероидов путем ферлтентадии с актйиомицетами. Предлагаемый способ позволяет расши{)ить ассортимент микроорганизмов, используемых для получения 16а-оксистероидов. В качестве таких микроорганизмов рекомендуются, в частности штаммы Act. саргае 206 J.A. W., Act. streptomycini (Krainsky emmend WKS) krass.. Act. flavus 3369, Act. venezuelae 3624, Act. fulvoviridis 607, Act. griseus var. purpurescens. Act. gedaniensis 4880 ATCC.

Стероид ферментируют с указанны.ми культурами, выращенными на .питательной среде, содержащей источники углерода, азота ,и минеральные соЛИ. По окончании фер;ментации продукты реакции извлекают несмешивающимися с водой растворителями и выделяют стероид хроматографированием на окиси алюминия.

Пример 1. В две колбы, содержащие по 100 мл питательной среды (2% глюкозы, 1% кукурузного экстракта, 0,5% поваренной соли и 0,5% карбоната кальция в водопроводной воде ipH 7, вносят ло 10 мл 72-час, культуры Act. g-edaniensis 4880 ATCC, выращенной на питательной среде, содержащей 0,2% сульфата аммония, 0,1% сульфата магния, 0,1% поваренной соли, 0,1% карбоната кальция, 0,1% фосфата калия и 1 % крахмала. Культуру выращивают 24 час на круговой качалке

(200 об/мин) при , затем вносят в каждую колбу раствор 15 мг прогестерона ,в 0,5мл этилового спирта и ферментируют лр1И тех же условиях 66 час. По окончании ферментации мицелий отфильтровывают, иромывают водой и экстрагируют ф:ильтрат 4 раза по 50 M.I хлороформа. Экстракт упаривают в вакууме до 50 мл, сушат над безводным сульфатом магния и выпар.ивают в вакууме досуха. OCTHTOIK растворяют в 0,5 мл хлористого метилена и тонкослойным препаративным хроматографированием на нергтральной окиси алюмагния (пластинка 13x18, толщина слоя 1 Л1м) выделяют 19 мг 16а-окоипрогестерона, который очищают двукратной перекристаллизацией из ацетона.

Пример 2. Так же, как это описано в примере 1, осуществляют ферментацию 30 мг прогестерона с культурами Act. саргае J.A. W. 206, Act. streptomycini (Krainsky emmend WKS) krass. Act. flavus 3369 и Act. venezuelae 3624 и после хроматографирования иа окиси алюминия получают соответственно 15, 22, 16 1И 10мг 16а-оксипрогестерона. Пример 3. В 10 колб, содержащпх по 50 мл питательной среды с кукурузным экстрактом, как это описано в примере 1, вносят по 5 мл 48-час культуры Act. fulvoviridis 607, выращенной на той же питательной среде. Культуру -выращивают 24 час на круговой качалке при 28°С, затем вносят в каждую колбу раствор 10 мг .прогестерона в 0,5 мл этилового спирта и ферментируют в тех же условиях 72 час. По окончании ферментации культуральную жидкость экстрагируют 4 раза по 100 мл хлороформа. Экстракт концентрируют в вакууме до 50 мл, сушат над безводным сульф,ато1М |М:аг,ния и выпаривают в вакууме досуха. Остаток растворяют ,в 1 мл хлористого м-етилена и препаративным хроматографированием в тонком слое окиси алюминия (пластинка 20x20, толщина слоя 1,2 мм) выделяют 31 мг 16а-оксипрогестерона с т. пл. 220- 224°С.

Пример 4. Ферментацию 100 мг прогестерона с культурой Act. griscus var. purpurescens проводят, как это описано в примере

3, и после хро-матографиров:ания на окиси алюминия получают 18 мг 16а-1оксиирогестерона.

Предмет изобретения

Способ получения 16а-оксистероидов путем ферментации с актиномицетами, отличающийся тем, что с целью расширения ассортимента

микроорганизмов, осуществляющих 16а-гидроксилирование, используют штаммы Act саргае 206 J.A.W., Act. streptomycini 3369 (Krainsky emmend WKS) krass.. Act. flavus 3369, Act. venezuelae 3624, Act. fulvoviridis 607, Act. grisens var. purpurescens. Act gedaniensis 4880 ATCC.