СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ Советский патент 1966 года по МПК C12N9/54 

Известен способ получения ферментных препаратов, согласно которому на питательной среде, содержанлей отвар солодовых ростков, в аэробных условиях выращивают продуцирующие их микроорганизмы, отделяют культуральную жидкость от бактериального мицелия одним из известных приемов, например фильтрацией, концентрируют ее вымораживанием, носле чего из полученного концентрата адсорбируют препарат.

Предлагаемый способ обеспечивает получение активного сычужного ферментного препарата, свободного от примеси сопутствующих ферментов. Достигается это тем, что в качестве его продуцента используют штамм бактерий Bacillus mesentericus sp. renninus № 61, кроме того, адсорбируют препарат из культуральной среды при помощи кизельгура с последующей десорбцией его молочной сывороткой.

Предлагаемый способ заключается в следующем.

Штамм бактерий Bacillus mesentericus sp. renninus № 61 культивируют на стерильной питательной среде, содержащей отвар солодовых ростков, поверхностным или глубинным методом с аэрацией при 30°С в течение 48- 72 час.

которые отваривают. Полученный отвар фильтруют, затем сепарируют, доводят до рН 6,2-6,0 и стерилизуют.

Окончив выращивание, среду подвергают грубому фильтрованию для отделения основной части бактериальной биомассы, после чего для полного удаления бактерий ее сепарируют.

Прозрачный фильтрат, содержащий сычужный и нротеолитические ферменты, смешивают с раствором поваренной соли, получая раствор 4-5%-ной плотности, который затем подвергают концентрированию путем вымораживания.

Полученную полужидкую массу, содержащую твердую фазу - чешуйчатый лед и жидкую фазу - концентрат ферментов в солевом растворе, подвергают разделению на центрифутах. После этого для выделения сычужного препарата концентрат подвергают адсорбции на кизельгуре, получая при этом две фракции - сычужный фермент на носителе и жидкий концентрат протеолитических ферментов в фильтрате. Адсорбированный на кизельгуре сычужный фермент элюируют молочной сывороткой.

Полученный после элюцик сычужного фермента фильтрат концентрируют методом выморал ивания. Концентрат хранится при температуре минус 10°С, Б течение 6-12 месяцев.

Из концентрата можно получить кристаллический сычужный фермент.

Предмет изобретения

Способ получения ферментных препаратов путем выращивания из продуцента в аэробных условиях на питательной среде, содержа1цей отвар солодовых ростков, отделения культуральной жидкости от бактериального мицелия одним из известных приемов, например фильтрацией, концентрирования ее вымораживанием с носледующей адсорбцией препарата из полученного концентрата, отличающийся тем, что, с целью получения активного сычужного ферментного препарата без примеси сопутствующих ферментов, в качестве его продуцента используют штамм бактерий Bacillus mesentericus sp. renninus № 61, a адсорбцию препарата из культуральной среды производят при помощи кизельгура с последующей десорбцией его молочной сывороткой.