СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ ИЗ МИКРООРГАНИЗМОВ Советский патент 1966 года по МПК C12N9/00 

Известен способ нолучения ферментных препаратов из микроорганизмов, например из бактерий Bacillus mesentericus, путем выращивания их на питательной среде, состоящей из обрата, молочного гидролизата, фермента (сычужного порощка), с носледуюнхим нагреванием и выделением препаратов одним из известных приемов, например осаждением.

Предложено среду нагревать в две стадии -сначала до 20°С, а затем до 35°С, причем после каждой стадии нагревания ее выдерживать с последующей нейтрализацией раствором солей, например карбонатом натрия, до кислотности не выще 80°Т, что способствует более полному гидролизу белка.

Ферментный препарат из пропионовокислых бактерий получают следующим образом.

Обезжиренное молоко - обрат - пастеризуют при 90°С, охлаждают до 5-8°С, после чего добавляют в него 5-8% чистых культур пропиоповокислых бактерий и 0,5% ферментного препарата, например Бациллус мезентерикус. Вместо последнего можно использовать другие препараты (препарат аспергилиус террикола и др.). Для стимуляции роста бактерий в среду вносят также 2% гидролизата молока, предварительно подогретого до 56-63°С и выдерлсапного 30-45 мин, хлористый кальций и микроэлемент. Последние

вносят из расчета 150 г СаСЬ и 15 г СоС.. на тонну смеси.

Перемешанную смесь оставляют при данной температуре на 18-24 час, после чего постеneiuio нагревают до 20°С и выдерживают при этой температуре 10 час. Если кислотность превышает , смесь нейтрализуют солями , Na2HPO4, КаСОз или другими до кислотности 80°Т и выдер.живают около суток, после чего вновь нодогревают до и выдерживают еще 24 час. Затем смесь вторнчно нейтрализуют КаоСОз.

Двухстадийное новышение температуры пеобходимо для того, чтобы предотвратить образование твердых частиц негидролизованного казеина.

Когда кислотность после вторичной нейтрализации достигнет 140°Т, переходят к выделению препарата любым известным способом, например осаждением.

Чтобы применить осаледение, предварительно готовят смесь из двух частей муки бобовых Н одной части крахмала, к которой прибавляют 60-70э/о спирта до нолучения кашеобразной смеси.

Получениую смесь делят на три части, из которых первую часть насыщают 65%-ным раствором (NH4)2SO4 из расчета 800 мл раствора на 1 кг смеси; вторую часть насыщают

ьпст.юром органической кислоты {.молочьой, .ii.t.MoiiHOH пли любой другой с рМЗ,8-4,2, титруемая кислотность 120-150) до консистенции густой сметаны; третью часть насыщают NaoCOs до рН 8,0. ,

При такой обработке смеси осаждают не только ферменты, но и бактериальные клетки и гидролизованные частицы белка. Каждую из этих смесей выдерживают 1-2 час. Затем, смешав смеси, нрибавляют их к питательной среде в количестве 0,2-0,8% к весу среды, перемешивают и выдерл ивают I час, нериодически номешивая. Затем полученную массу охлаждают до 2-8°С. Отстоявшуюся жидкость декантируют, осадок высуяшвают или при температуре или путем сублимации. Полученный ферментный препарат, выделенный описанным выше способом из нропиомово.;ислых бактерий, содержит витамин Ъ,.

П р е д м е т и з о б р е т е ir и я

Способ получения ферментных препаратов из микроорганизмов, например из пропионовокислых бактерий, путем выращивания их на среде - обезжиренном молоке - с доба 5лением сычужного порошка, гидролизата молока, хлористого кальция, микроэлементов, с последующим нагреванием и выделением нрепарата одним из известных приемов, отличающийся тем, что, с целью более нолного гидролиза белка, среду нагревают двухстадийно -

сначала до 20°С. а затем до 35°С с выдержкой после каждой стадии нагревания и последующей нейтрализацией среды раствором солей, например карбонатом натрия, до 80°Т.