СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАНАБОЛА Советский патент 1969 года по МПК C12P33/00 

Известен способ иолучения дианабола микробиологической трансформацией Па-метил-А5-андростен-Зр,17р-диола микроорганизмами рода Corynebacterium. Для повышения выхода :цеииого анаболического препарата предлагается в качестве трансформирующего микроорганизма применять культуру Mycobacterium mucosum 77. Способ получения дианабола заключается в том, что на 17а-метил-Дз-аидростен-Зр,17рдиол действуют отмытыми клетками штамма Mycobaclerium mucosum 77 суспендированными в физиологическом растворе с добавлением хлористого кобальта. Пример 1. В семь колб емкостью 500 мл, содержащих по 100 мл среды из 1% глюкозы и 1 % кукурузного экстракта вносят но 4 мл 68-часовой культуры Mycobacterium mucosiim 77. Ее .выращивают в течение 47 час. После этого содержимое колб объединяют и клетки отмывают один раз от среды стерильным физиологическим раствором. Отмытые клетки суспендируют в 350 мл физиологического оаствора. По 10 мл этой суспензии добавляюг -к 90 мл физиологического раствора, содержащего . CoCU ,на 1 л раствора. В каждую из 33 КОлб, содержащих ПО 100 мл полученной суспензии, вносят ПО 1,5 мл этанольиого раствора Па-метил-Л -аидростенЗр,17р-диола, содержа-дего 1,5 г стероида в 49,5 мл этанола. Смеси ферментируют .при 28°С на круговой .качалке При 200 об/мин в течение 54 час. Содержимое колб объединяют и экстрагируют хлороформом (4 раза по 1 л). Экстракт упаривают до объема 50 мл и сушат над безводным сульфатом 1магния, затем фильтруют и упаривают в вакууме. Получают 1838 мг маслообраз.ного вещества, которое делят методом тонкослойной хроматографии на ЛЬОз 11 стеиени активности в системе эфир - этиладетат (9:1). Получают 1,063 г хроматографически однородного дианабола (выход 70,8%). После двух перекристаллизации из смеси этилацетата с гексано.м выделяют аиалитический образец с т. пл. 166-167°С (блок Кофлера), ие дающий депрессии с заведомым образцом. Предмет изобретения Способ получения диаиабола микробиологической трансформацией 17а-метил-Д-андростен-3р,17р-диола с последующим .выделением продукта известным способом, отличающийся тем, что, С целью повышения выхода продукта, в качестве трансформирующего микроорганизма применяют культуру Мусоbacteriiim mucosum 77.