СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ N-КАРБОКСИАНГИДРИДОВ ОКСИАМИНОКИСЛОТ Советский патент 1969 года по МПК C07C275/16 C07C275/42 

Изобретение относится к синтезу аминокислот и может найти применение в качестве физиологически активных веществ.

Предложен способ получения N-карбоксиангидридов оксиаминокислот, заключающийся в том, что оксиаминокислоту обрабатывают основаниями или солями переходных групп, например сульфатом кобальта, и полученные при этом хелаты подвергают взаимодействию фосгеном в диоксане или тетрагндрофуране. Целевой продукт выделяют известными способами.

, Пример 1. Хелат серебра а-аминор-оксипропионовой кислоты (серина). Все количество (13 г) серина растворяют в 500 .«. дистиллированной воды и добавляют 14,33 г свежеприготовленной окиси серебра. Смесь перемешивают при комнатной температуре до полного растворения окиси серебра. В ходе проведения реакции образуется коллоидная масса коричневого цвета, которую удаляют при помощи фильтрования через инфузорную землю. Полученный в результате фильтрат при перемешивании обрабатывают при комнатной температуре метанолом до помутнения. Необходимый готовый продукт отделяют и выделяют фильтрованием.

личество треонина (11,9 г) растворяют в 25 Л1Л воды, после чего в течение 10 мин добавляют 11,6 г свежеприготовленной окиси серебра. Смесь дополнительно перемешивают в течение приблизительно еще 1 час до полного растворения введенной окиси серебра. Полученная таки: 1 образом смесь содержит коллоидный гель, ее перемешивают в течение 1 час с активированным углем и фильтруют. Фильтрат охлаждают в бане со льдом, после чего обрабатывают вводимым приблизительно в течение 1 час 30 лгин метанолом в количестве 270 мл. Из смеси выделяют часть и вызывают искусственную кристаллизацию путем царапания стенок содержащего эту часть сосуда. Кристаллы смеси вновь помещают в основную баню, в которой поддерн-сивают в охлажденном состоянии при температуре 0°С и перемешивании в течение последующих 16 час. Необходимый готовый продукт осаждают и выделяют по окончании реакции фильтрованием.

Пример 3. N-K а р б о к с и а и г и д р и д серина. Все количество (21,20 г) продукта, приготовленного по способу, описанному в примере 1, суспендируют в 250 мл свежеперегнанного диоксана. Указанную операцию проводят в токе азота. Через полученную таким образом смес.ь пропускают, 0,1 и/оль ;фосгена.

при перемешивании магнитной мешалкой. В ходе введения фосгена смесь постепенно нагревается. К концу введения газа температуру смеси доводят до 70°С и поддерживают на таком уровне в течение 1 час. После этого смесь охлаждают, а выпадавший в осадок хлорид серебра удаляют фильтрованием. Фильтрат промывают несколькими порциями бензола; объединяют фильтрат и промывную жидкость и подвергают сушке при температуре 0°С, в результате получают готовый продукт.

Пример 4. N-Kap бо к сиа нгид р и д треонина. Все количество (9,5 е) продукта, приготовленного по способу, описанному в примере 2, суспендируют в 100 ли, диоксана, после чего в течение приблизительно 7- 12 мин через приготовленную таким, образом смесь пропускают эквимолярное количество фосгена. В ходе продувания фосгена через смесь температура ее самопроизвольно повышается до 40°С. После этого смесь перемешивают в течение 1 час и, затем, фильтруют для удаления выпавшего в осадок хлорида серебра. Полученный фильтрат подвергают сушке при температуре 0°С. Остаток растворяют в 30 мл этилацетата, после чего вновь осаждают продукт путем добавления в этот раствор 70 мл гексана. Смесь оставляют стоять на ночь, после чего готовый продукт выделяют фильтрованием.

Используя хелаты, полученные в ходе проведения процесса по способу, описанному в примере 2, по аналогии с вышеописанным способом приготавливают следующие соединения:

N-Карбоксиангидрид тирозина, N-Карбоксиангидрид 3,5-дниодтирозина, N-Карбоксиангидрид 3,5-дибромтирозина, N-Карбоксиангидрид гидроксипролина, N-Карбоксиангидрид р-гидроксилейцина, N-:Kapбoкcиaнгидpид а-гидроксинорвалина, N-Карбоксиангидрид е-гидроксинорвалина.

Нижеследующие описания методик иллюстрируют использование полученных в соответствии с изобретением продуктов в ходе проведения процессов приготовления К-.карбоксиангидридов о-триметилсилилов гидроксилированных аминокислот и их превращение в пе тиды. В ходе проведения процесса .приготовления пептида блокирующая триалкилсилильная группа отщепляется самопроизвольно исключая, таким образом, необходимость проведения дополнительной реакции выделения, которая является обязательной в случае применения в качестве блокирующей группы (для защиты гидроксильной группы аминокислоты) таких обычно используемых групп, как бепзильная и тому подобные.

пенно прибавляют к 5,1 г (35,2 моль) N-карбоксиангидрида треонина, растворенного в 65 мл сухого тетрагидрофурана. В ходе проведения этой операции над реакционной смесью поддерживают инертную атмосферу азота, температура смеси около 2°С. В полученный таким образом раствор постепенно вводят 2,98 мл (34 моль) сухого 4-метилтриазола. В ходе нроведения операции добавления последнего выпадает в осадок гидрохлоридиая соль основания. После этого реакционную смесь оставляют стоять до момента самопроизвольного достижения комнатной температуры, выпавший осадок затем удаляют фильтрованием под давлением азота. Затем из полученного фильтрата при пониженном давлении удаляют растворитель, а выделенный осадок растворяют в 35 мл этилацетата, после чего его оставляют стоять в течение 16 час при температуре 10°С. После этого находящийся в верхней части раствор декантируют, а растворитель удаляют в вакууме. Выпавший в осадок продукт растирают в порошок и кристаллизуют из гексана, после чего выделяют фильтрованием под давлением азота.

Пример 6. Треонилфенилаланин. Раствор, содержащий 145 мг фенилаланина в 10 мл воды и 10 мл 0,9 М борной кислоты, доводят в смесителе до значения рН 10,5 путем прибавления 50о/о-ного водного раствора гидрата окиси натрия, после чего при быстром перемешивании и в токе азота пропорционально N-карбоксиангидрид о-триметилсилилтреонина. Последний вводят в количестве 326 мг в течение 3 мин. В ходе проведения процесса температуру смеси поддерживают около 5°С, а рН - на постоянном уровне постепенным введением по каплям 0,75 мл (общее количество) 2,5 н. водного раствора гидрата окиси натрия. После этого величину рН путем введения серной кислоты снижают доЗ. В ходе проведения последующей реакции декарбоксилирования температура смеси повышается до 30°С, после чего смесь выдерживают при этой температуре в течение 5 мин до окончания процесса. Далее берут небольшую пробу реакционной смеси и подвергают электрофорезу через бумагу при рН 9,5 в 0,1 М растворе тетрабората натрия при напряжении 600 в. Эксперимент продолжается в течение 3 час, после чего путем сравнения подвижности испытанного образца с подвижностью пробы известного продукта при тех же условиях производят идентификацию полученного треонилфенилалавина.

Значение рП реакционной смеси доводят до 6,5 добавлением 2,5 н. водного раствора соляной кислоты и подвергают лиофилизации при температуре 0°С. После этого остаток экстрагируют метанолом, фильтруют и высушивают до сухого состояния. Остаток растворяют в небольшом количестве воды и профильтровывают. Фильтрат выпаривают до сухого состояния, а остаток растирают в спирте е

порошок. Раствор продукта в метаноле подвергают хроматографическому разделению при помощи дезактивированного древесного угля и производят вымывание, сначала водой (девятнадцать X 2 мл фракций), а затем смесью 50%-ной уксусной кислоты, ацетона и воды (47,5 ли ацетона; 47,5 мл воды и 5 мл уксусной кислоты). Выделение готового продукта .производится соединением фракций с 20 по 26 включительно, каждая из которых содержит около 2 мл -раствора, с последующей лиофилизацией при температуре 0°С.

Предмет изобретения

Способ получения N-карбоксиангидридоЁ оксиамнно-кислот «а основе окспаминокислот с применением фосгена в среде диоксана или тетрагидрофурана, отличающийся, тем, что оксиаминокислоту обрабатывают основаниями или солями металлов переходных групп, и полученные при этом хелаты обрабатывают фосгеном, с последующим выделением целевого продукта известными методами.