Изобретение относится к способу получения изомеров про.изводных пенициллановой кислоты.
В литературе известен способ получения а-амино-а-(оксифенилацетамиио) - пенициллановой кислоты общей формулы
/S у /
Т СНСОШ - СН - СН С(СНз)2 Ш2 OC-NСНСООН
Способ заключается в том, что 6-аминопенициллановую кислоту или ее соль подвергают взаимодействию с функциональным производным а-амино-/г-одсифенилуксусной кислоты. Продукты выделяют известным способом. По такому способу получено три изомера указанных ироизводных пенициллина - о-, м- и пизомер в виде смеси двух оптически активных эпимеров (dl). Причем из этих трех изомеров наибольшей активностью обладают м- и л-изомеры, по сравнению с активностью стандартного поливалентного пенициллина- D- (-) -а-аминобензилпениллином.
Дальнейшие исследования показали, что из этих двух изомеров (п- и м-) только левовращающие эпимеры п-ИЗо,мера показывают активность почти в 2 раза большую, чем активность стандартного D-(-)-а-аминопенициллина, и в 3 раза большую, чем активность левовраш,ающего эпимера л -изомера. Таким образом, предлагаемый способ позволяет получить эпимер с новыми свойствами, более широкого спектра действия по сравнению со свойствами известных соединений.
Предлагаемый способ получения 6-(-)-аамино-п-оксифенилацетамидо - пенициллановой кислоты, основанный на известной реакции, заключается в том, что 6-аминопенициллавовую кислоту подвергают взаимодействию с производным (-)-изомера карбоновой кислоты общей формулы
е X - аминогруппа,
бензилоксикарбониламиногруппа, азидогруппа, аминогруппа, защищенная протоном, У - оксигруппа, галоид, остаток ангидрида этой кислоты или другой кислоты,
R - водород, бензил, бензилоксикарбонилгруппа.
Продукты выделяют известным способом. Полученное соединение может быть выде30 лено любым способом, обычно применяемым для выделения аминопенициллинов. Оно может быть получено в свободном виде или БЫделено в виде соли. Поскольку молекула пенициллина содержит и- основные, и кислотные свойства, то получают соли двух типов. К кислым солям, среди которых некоторые умеренно растворимы в воде и ноэтому могут быть использованы для выделения, относятся соли неорганических кислот, например соляной, фосфорной или тиоциановой кислоты, а также соли сильных органических кислот, например нафталин-р-сульфоновой кислоты. К основным солям относятся соли щелочных и щелочноземельных металлов, соли аммония и нетоксичных аминов. Все эти соединения могут быть как безводными, так и содержащими воду. Они могут быть аморфными или кристаллическими, но предпочтительны кристаллические формы, как более устойчивые. На любой стадии процесса продукты могут быть подвергнуты очистке для удаления следов высокомолекуляр ых аллергенных примесей. Полученные пе.нициллины могут применяться в смеси с соответствующими фармацевтическими носителями в различных медицинских формах дозировки. Кроме того, пенициллины могут использоваться в разных синергетических комбинациях с известными пенициллиназостойкими пенициллинами, папример метициллином, клоксациллином, дикло,ксациллином, флуклоксациллином и нафциллином. Пример 1. Разделение сс-бензилоксикарбониламино-«-оксифенилуксусной кислоты. Раствор а-бензило,ксикарбопиламино-/г-о,ксифенилуксусной а ислоты (224 г) и тригиДрата хинопа (285 г) в кипящем этиловом спирте (2,5 л) охлаждают, выделивщиеся кристаллы собирают и дважды перекристаллизовывают из этилового спирта. Получают с выходом 76о/о хиноновой соли левовращающей кислоты, ajg - 158,5° (С, 1 в МеОН). После обработки соли хинона (68 г) разбавленным едким натром, удаления хинона путем эфирной экстракции и подкисления водного раствора получают левовращающую кислоту, которую дважды перекристаллизовываюгг из водного раствора этилового спирта. Получают 28 г (85%) (-)-а-бензилоксикар5ониламино-п-оксифенилуксусной кислоты с т. пл. 159-161°С, ,0° (С,1 в МеОН). Найдено, %: С 64,1; Н 5,2; N 4,7. C24H2lN07 Вычислено, %: С 63,9; Н 4,9; N 4,7. роп, который обрабатывают водным раствором едкого натра; хинон удаляют путем эфирной экстракции. При подкислении водного слоя получают сырую правовращающую кислоту (108 г), которую собирают, сущат и обрабатывают эфедрином (63 г) в кипящем этиловом спирте (450 мл). При охлаждении раствора выделяют эфедриновую соль правовращающей кислоты, которую собирают и перекристаллизовывают из этилового спирта. Выход Ills, afo -f46,8° (С,1 в НЮ). Кислоту выделяют из этой соли обычным способом, получая (-|-)-а-бензилоксикарбониламино - п - оксифенилуксусную кислоту (960/0), которая после перекристаллизации из 50%-ного водного раствора этилового спирта имеет т. пл. 158-16РС, :-f 120,2° (С,1 в МеОН). Найдено, С 64,1; Н 5,3; N 4,8. C24H2|NO7. Вычислено, %: С 63,9; Н 4,9; N 4,7. Пример 2. Получение двух эпи.меров ос-бензилоксикарбониламино - п - оксибензилиеНициллина. а)Этилхлороформиат (6,3 мл) прикапывают при температуре -5°С в интенсивно перемешиваемый раствор (-)-а-бензилокси«арбониламино-п-оксифенилуксусной кислоты (20 г) и 2,6-лутидина (8,3 мл) в чистом сухом ацетоне (140 мл). Смесь выдерживают при температуре от -5 до +5°С в течение 30 мин для полного образования этоксимуравьиного ангидрида. Затем быстро добавляют ледяной раствор 6-аминопенициллановой кислоты (14,3 г) и 2,6-лутидина (10,5 мл) в воде (140 мл), и смесь перемешивают при температуре О-5°С в течение 30 мин, далее еще 1 час при комнатной температуре. Раствор концентрируют при пониженных давлении и температуре, отгоняя ацетон, затем водный концентрат поглощают метилизобутилкетоном (100 мл) И доводят рН до 2, добавляя Разбавле)нную соляную кислоту. Слои разделяют, и экстрагируют водную фазу дополнительным количеством метилизобутилкетона (2x50 мл). Органические экстракты промывают водой, затем .нейтрализуют водным раствором двууглекислого натрия до рН 7. В результате разделения слоев и выпаривания нейтрального водного раствора при низкой температуре и давлении получают твердую натриевую соль 6-(-)-а-бензилоксикарбониламино - п - оксифенилацетамидо -пенициллановой кислоты (32 г, 92%). б)При повторении вышеописанной процедуры, но применяя (+)-изомер-а-бензилоксикарбониламино - п - оксифенилуксусной кислоты, получают натриевую соль 6-(+)-абензилоксикарбониламино - п - оксифенилацетамидо) - пенициллановой кислоты, выход 90%, Пример 3. Получение 6-(-)-а-аМИНоп-оксифенилацетамидо.-ценициллановой кислоты..
Суспензию 50/о-ного палладия па катализаторе - углекис.1ом кальции (40 г) в воде (150 мл) встряхивают при пропускании водорода в течение 1 час, добавляют раствор натриевой соли- 6-(-)а-бензилоксикарбониламино - п- оксифенилацетамидо - пенициллановой кислоты (16 г) в воде (50 мл). Смесь встряхивают в водороде в течение 40 мин, затем катализатор отфильтровывают через кизельгуровую. подушку и промывают водой (3X50 мл). Объединенные фильтрат и промывные воды доводят до рН 1,9 и промывают метилизобутилкетоном (3X50 мл). Водную фазу доводят до рН 5,1 и концентрируют при низких температуре и давлении до объема около 75 мл. Выделившееся бесцветное кристаллическое твердое вещество выделяют, промывают небольшим количеством воды, ацетоном и эфиром. После сушки в вакуум-эксикаторе получают 6,3 г (выход 56%) аМИнопенициллина, который анализируют в виде трехгидрата.
Найдено, о/о: С 46,0; Н 6,5; N 10,3; S 7,4.
C,6Hi9N305S-3H20
Вычислено, %: С 45,8; Н 6,0; N 10,1; S 7,6.
При хранении во влажном воздухе образец впитывает воду и превращается в тетрагидрат +24Q,5° (С,0,1 в Н2О).
Найдено, %: С 44,1; Н 6,1; N 10,0; S 7,6; НаО 16,3.
С,бН19Нз055-4Н20
Вычислено, %: С 43,9; Н 6,2; N 9,6; S 7,4; НгО 16,4.
Пример 4. 6-(+)-а-амИ|Но-«-оксифенилацета1мидо -пенициллановой кислоты.
Натриевую соль 6-(+)-а-бензилоксикарбониламино -/I-оксифенилацетамидо - ценициллановой кислоты гидрируют так же, как и эпимер в примере 3. Кристаллический продукт (6,1 г, 54о/о) после сушки в вакуум-эксикаторе и выравнивания -влажиости на воздухе вмеет -f 154,6° (С,0,1 в НгО) и при анализе оказывается тетрагидратом.
Найдено, %: С 43,7; Н 6,5; N 9,3; S 7,6; НгО 15,8.
C,6H,9N305S-4H20
Вычислено, /о: С 43,9; Н 6,2; N 9,6; S 7,3; НгО 16,4.
Пример 5. Разделение а-бензилоксикарбониламино-ж-оксифенилуксусной кислоты.
Рацемическую л-оксикислоту растворяют с хинидином в кипящем этиловом спирте (1,875 л1моль}. При охлаждении выкристаллизовывается хинидиновая соль (-)-изомера. Кристаллы собирают, кипятят в этиловом спирте (1,3 ), суспензию охлаждают и фильтруют. Из соли выделяют свободную
кислоту, в основном аналогичную описанной в примере 1 для п-оксиизомер а. При перекристаллизации И.З хлороформа или толуола получают с выходом 79% (-)-а-бензилоксикарбониламино-лг-оксифенилуксусную кислоту, -110,8° (С,1 вМеОН).
Этанольный фильтрат и промывные воды от указанной кристаллизации хинидиновой соли выпаривают в вакууме, оставшийся сироп
кристаллизуют путем растирания с эфиром. При перекристаллизации из изопропанола получают хинидиновую соль ( + )-кислоты, из которой выделяют свободную кислоту обычным способом. При перекристаллизации из
хлороформа пли толуола получают с выходом 73 % (-f-) -а-бензнлоксикарбониламино-льоксифенилуксусную кислоту.
-f 110,5° (С,1 в МеОН).
Пример 6. Получение двух эпимеров а-бензилоксикарбониламино - м - оксибензилпенициллина.
Эти вещества получают так же, как в примере 2.
Из (-) -а-бензилоксикарбониламино-ж-оксифенилуксусной кислоты получают натриевую соль 6-(-)-а-бензилокс.икарбониламино-лг-оксифенилацетамидо - пенициллановой кислоты.. Выход 90%.
Из (-|-) -а-бензилоксикарбониламино-л4-оксифенилуксусной кислоты получают натриевую соль 6- (+)-а-бензилоксикарбониламино-уИ - оксифенилацетамидо - пенициллановой кислоты. Выход 90%.
Пример 7. Получение 6-(-)-а-амино-.иоксифенилацетамидо -пенициллановой кислоты.
Проводят каталитическое гидрирование 6-(-)-сх-бензилоксик.арбониламино - м - оксифенилацетамидо -пе.нициллановой кислоты по методике, описанной в примере 3. Водный раствор восстановленного пенициллииа доводят до рН 5,5 и концентрируют пр;И низких температуре и давлении.. Выход гидрированного аминопенициллина 50Э/о, -f-239° (С0,2 в НзО). Проба по Карлу Фишеру показывает, что кристаллы содержат 15% воды.
Пример 8. Получение 6-(+)-а-амино-жоксифенилацетамидо -пенициллановой кислоты. Опыт проводят по методике, описанной в
примере 7, но в качестве исходного материала применяют натр.иевую соль 6-( + )-а-бензилоксикарбониламино - м - оксифенилацетамидо -пенициллановой кислоты. Выход кислоты бОо/о. Кристаллический аминопеницилли.н содержит 15% воды, 4-135° (С0,2в НгО).
Пример 9. Получение 6-(-4-)-а-амино.и-(/г-оксифенил) - ацетамидо - пенициллановой кислоты.
а)Суспензию (-)-а-бензилоксикарбониламино-ж- (п-оксифенил) -уксусной кислоты (21,8 г) в воде (180 л«уг) обрабатывают разбавленным раствором едкого натра. Получают прозрачный раствор с рН 8,7. Далее вносят 5%-ный палладий на катализаторе - углекислом кальции (2,2 г), смесь встряхивают в водороде под атмосферным давлением до прекращения поглощения водорода. Катализатор отфильтровывают через кизельгуровую подушку и промывают водой. Объединенные фильтрат и промывные воды доводят до рН 5,0 и раствор выпаривают в вакууме до небольщого объема. Сырой продукт отделяют в виде студенистого осадка, который растворяют при нагревании смеси до кипения. При охлаждении раствора выделяется бесцветная кристаллическая (-)-а-амино-а-(«оксифенил)-уксусная кислота , которую выделяют, промывают небольщим количеством холодной воды и сущат в вакууме над фосфорным ангидридом. Выход 10,1 г (83%), т. пл. 225-226°С, а -108° (С,1 в НгО).
Найдено, в о/о: С 57,2; Н 5,4; N 8,3. CsHgNOa
Вычислено, %: С 57,5; Н 5,4; N 8,4.
Нормальный магнитный резонанс D2O+ -4-NaOD: мультиплет центрирован на т 3,15 (4Н, ароматич.), синглет т 5,8 ( -СН).
б)Раствор едкого натра в метиловом спирте (60 мл, 0,324 н., 0,0195 моль) добавляют к (-)-а-амино-ос-(л-оксифенил) - уксусной кислоте (3,34 г, 0,02 моль) и промывают метанолом (20 мл). При нагревании в сосуде с обратным холодильником суспензии почти до температуры кипения получают светлый раствор, из которого выделяют кристаллическую натриевую соль аминокислоты.
К кипящей суспензии при перемещивании добавляют в течение 10 мин р.аствор метилацетоацетаТа (2,4 мл, 0,022 моль) в метиловом спирте (20 мл), кипятят еще 20 мин. Получают светлый раствор, который кипятят еще 20 мин. Метиловый спирт отгоняют (температура бани 130°С) и сразу же добавляют небольщое количество сухого толуола. После внесения 90 мл толуола выделяется белое кристаллическое вещество. Процесс продолжают до тех пор, пока температура отгонки не достигнет 100°С и не будет введено всего 170 мл толуола. Суспензию оставляют на ночь при температуре 5°С, затем продукт выделяют, промывают сухим толуолом и сушат в вакууме при температуре 40°С над фосфорным ангидридом. Выход натрий-(-)-Nметоксикарбонилпропен-2-нл)-а-амино - а-(поксифенил)-ацетата 4,5 г (95о/о)Найдено, %: С 54,35; Н 4,9; N 4,9.
CiaHnNOsNa БычиCv eнo, %: С 54,4; Н 4,9; N 4,9.
Инфракр. (нужол) 3300 см-i (N- Н-), 1655 CM-i (С О-), 1560 сл-1 (СОО-).
в) Перемешиваемую суспензию 6-аминопенициллановой кислоты (2,16 г, 0,01 моль) в
воде (25 мл) доводят до рН 7,8 путем внесения 10%-ного. водного раствора едкого натра. При этом следят, чтобы величина рН не превышала 8,0. Затем вводят сухой ацетон (40 мл) и раствор охлаждают до -10°С.
Сухой ацетон (25 мл) перемешивают и выдерживают при температуре от -10 до -8°С, добавляя при этом этиловый эфир хлоругольпой кислоты (1,0 мл, 0,0104 моль). Далее приливают lo/0-ный н-метоксикарбонилпропен2-ил)-а-амино-а-(/г-оксифенил)-ацетат (2,87 г, 0,01 моль), который промывают в холодном, сухом ацетоне (15 мл). Смесь перемещивают при температуре -10°С в течение 30 мин, затем выливают ее в вышеописанный раствор натрий-6-аминопенициллината и промымывают в холодном сухом ацетоне (20 мл). Смесь перемешивают в течение 20 мин при температуре -10°С, отгоняют ацетон в вакууме при комнатной температуре и добавляют изобутилметилкетон (40 мл) к оставшемуся водному раствору. Далее смесь охлаждают до 5°С, сильно перемешивают и регулируют рН до 0,9 концентрированной соляной кислотой.
Смесь выдерживают при рН 0,9 и температуре 5-10°С в течение 75 мин, затем слои разделяют. Водный слой промывают изобутилметилкетоном (10 мл), остаток растворителя удаляют в вакууме. Водный раствор,
охлаждают до 5°С и доводят рН до 5,2 Ю /о-ным раствором едкого натра. Полученную суспензию перемешивают при 50°С в течение 5 мин, затем концентрируют в вакууме при температуре 20°С до Vs прежнего объема. Белую кристаллическую 6-(-)-а-амино«-(я-оксифенил) - ацетамидо - пенициллановую кислоту выделяют, промывают водой (20 мл) и сушат на воздухе при температуре 40°С.
Инфракрасная спектроскопия и спектроскопия с примеиением нормального магнитного резонанса и люминесцентная бумажная хроматография показывают, что полученный продукт (2,8 г) аналогичен продукту в примере 3.
Промежуточный этап, описанный в пункте б, может быть проведен также следующим образом, г) Перемешиваемую суспензию 6-аминопенициллаяовой кислоты (4,32 г, 0,02 моль) в воде (50 мл) доводят до рН 7,8, осторожно добавляя 10%-ный раствор едкого кали. Затем вносят ацетон (80 мл) и суспензию охлаждают до -10°С. Сухой ацетон (50 мл)
перемешивают и выдерживают при температуре от -1 до -8°С, вводя при этом этиловый эфир хлоругольной кислоты (2,0 мл, 0,0208 моль). Далее вносят 1%-ный н-метилморфолин в ацетоне (3 мл), а затем натрийамино-а-(п-оксифенил) - ацетат (5,74 г, 0,02 молъ), который промывают холодным сухим ацетоном (30 мл. Смесь перемешивают при -10°С в течение 30 мин до полного образования смешанного ангидрида в растворе, затем охлаждают до -25°С и быстро фильтруют через промытый кислотой кизельгур. Фильтровальную смесь промывают сухим холодным ацетоном (20 мл, и фильтрат вместе с ;промывной водой добавляют в холодный перемешиваемый водный ацетоновый раствор вышеописанного 6-аминопенициллата калия.
Прозрачный раствор перемешивают в течение 30 мин, затем без наружного охлаждения еще 30 мин, далее выпаривают досуха при пониженном давлении и температуре ниже 20°С. Смолистый остаток сушат в вакууме над фосфорным ангидридом. Вес сырого продукта 9,7 г. Большую часть (9,5 г) продукта обрабатывают сухим метиловым спиртом (70 мл, в котором большая часть продукта растворяется. Небольшое количество (0,54 г) нерастворившейся 6-а.минопенициллановой кислоты удаляют фильтрацией. Желтый фильтрат перемешивают 5 мин с активированным углем (2,3 г), затем смесь снова фильтруют. Фильтрат разбавляют сухим изопропиловым спиртом (250 м.л, вызывают кристаллизацию и оставляют смесь на ночь при температуре 5°С. Полученный белый твердый продукт фильтруют, промывают сухим эфиром, сушат в вакууме над фосфорным ангидридом. Получают полугидратный 6-(-)-N(1-метоксикарбонилпропен-2-ил) - ее - амино- (п-оксифенил) -ацетамидо -пенициллат калия.
Найдено, %: С 49,25; Н 5,2; N 8,3; S 6,35; К 7,6.
C2,H24N3O7SK-0,5 НгО
Вычислено, о/о: С 49,4; Н 4,9; N 8,25; S 6,25; К 7,65.
Из водного раствора этой соли, подкисленного до рН 2, быстро .выделяется метилацетоацетат и 6-(-)-a-aминo-a-(/г-oкcифeнил)aцeтaмидo -пeнициллaнoвyю кислоту.
Пример 10. Получение тригидрата гидрохлорида 6- (-) -а-амино (п-оксифенилацетамидо -пенициллановой кислоты.
Мелкоизмельченный тригидрат 6-(-)-аамино-(п-оксифенил)-ацетамидо - пенициллановой кислоты (2 г суспендируют в воде (5 мл} и добавляют 5 н. соляную кислоту (2,5 мл}. Смесь встряхивают до растворения большей части твердого вешества и быстро фильтруют. Фильтрат затравляют кристаллами и оставляют при 5°С на 30 мин - до начала выделения кристаллов шестигранной формы. Кристаллы отфильтровывают, промывают небольшим количеством холодной воды и сушат в печи при температуре 35-40°С. Получают тригидратный гидрохлорид 6-(-)а-амино-п-0|Ксифенилацетамидо - пенициллановой кислоты (1,6 г), который буреет при
90°С, затем дегидратируется при температуре 216-218°С (с разложением). Гидроксиламииовая тфоба 100%. Мол. вес. 496,0. Содержание НгО 11,50/0.
Найдено, %: С 42,1; Н 5,7; N 9,1; S 7,2; С1 7,9.
Вычислено для Ci6H2oN3O5Cl-3H2O, %: С 42,2; Н 5,7; N 9,2; S 7,0; С 7,8.
Пример 11. Получение дисульфата 6-(-)-а-амино- г-оксифенилацетамидо - пенициллановой кислоты.
Готовят суспензию мелкоизмельченного тригидрата 6- (-) -а-амино-п-оксифенилацетамидо -пенициллановой кислоты (2 г) в воде (200 мл и добавляют 5 н. серную кислоту (2,5 мл}. Смесь перемешивают при комнатной температуре 5 мин, затем фильтруют и выпаривают до небольшого объема (около
50 мл} при низких температуре и давлении. Выкристаллизовавшееся из раствора белое вешество отфильтровывают, промывают небольшим количеством холодной воды и сушат в печи при температуре 35-40°С. Получают
при этом дисульфат 6-(-)-а-амино-/г-оксифенилацетамидо -пенициллановой кислоты (1,2 г). Т. пл. (буреет) 210°С, разлож. 230- PC. Гидроксила.миновая проба 227%, содержание Н2О 1,1 о/о.
Найдено, %: С 46,1; Н 4,9; N 10,1; S 11,8.
Вычислено для CssHMNeSsOu, /о: С 46,4; Н 4,9; N 10,1; S 11,6.
Пример 12. Получение (-)-а-бензилоксикарбоамидо-а-(/1 - бензилкарбонилоксифенил)-уксусной кислоты.
а) В сильно перемешиваемый ледяной раствор (-)-а-бензилоксикарбонамид-а - (поксифенил)-уксусной кислоты (15 г) и едкого натра (7 г) в воде (1500 мл} добавляют бензиловый эфир хлоругольной кислоты (13 г. Раствор перемешивают 2 час, затем экстрагируют эфиром. Небольшое количество твердого осадка отфильтровывают и отбрасывают. Через отделенную водную фазу пропускают поток воздуха для удаления растворенного эфира. При добавлении кислоты к избытку соляной кислоты происходит осаждение смолы. Всплываюшую жидкость декантируют, а к влажному смоляному остатку приливают бензол (200 мл}. При нагревании в сосуде с обратным холодильником смола растворяется и удаляется азеотропная вода (установка Дина-Старка). При охлаждении
получают раствор (-)-а-бензилоксикарбоамидо-а-(п - бензилоксикарбонило ксифенил)уксусной кислоты в бензоле в виде белого кристаллического твердого продукта (14 г), т. пл. 94-95°С.
Анализ показывает, что соединение содержит молекулу кристаллизационного бензола. Найдено, %: С 69,8; Н 5,3; N 2,8.
Вычислено, %: С 70,2; Н 5,3; N 2,7; CDCU, частей на миллион: 10,34 (S, 1Н, NH); 7,25 (т, Аг, 2ОН); 5,35 (S, 1Н, СН); 5,25 (S, 2Н, СНг) и 5,05 (S, 2Н, СНг).
б)Получение (-)-Ы-карбокси - (rt-бензилоксикарбонилоксифенил) -глицилового ангидрида.
В бензольный сольват D-a-бензилоксикарбоамидо-ос - (« - бензилоксикарбоинлоксифенил)-уксусной кислоты (4,35 г) добавляют тионилхлорид и раствор кипятят в сосуде с обратным холодильником в течение 2 час. Избыток тионилхлорида удаляют при пониженном давлении, следы его - путем перегонки совместно с сухим бензолом при пониженном давлении, а остаток выдержи1вают в вакууме в течение 30 .чин. К смоляному осадку добавляют сухой эфир (15 мл), и получают прозрачный раствор в котором через 5- 10 мин выпадает (-)-а-карбокси-(д-бензилоксикарбонилоксифенил) -глициловый ангидрид в виде твердого белого кристаллического вещества (1,33 г). Т. пл. 118-120°С.
Найдено, %: С 62,3; Н 4,1; N 4,3.
CirHisNOe
Вычислено, о/о: С 62,4; Н 4,0; 4,3.
в)Получение 6-(-)-а-амино-а-(п-бензило:ксикарбонилоксифенил) - ацетамидо - пенициллановой кислоты.
Суспензию 6-аминопеНИциллановой кислоты (0,66 г) в воде (100 мл) доводят до рН 5,5 и при сильном перемешивании добавляют к суспензии при температуре 5°С порциями через каждые 5 мин (-)-а-карбокси-(п-бензилоксикарбонилоксифенил) -глициловый ангидрид (0,99 г). При этом следят за тем, чтобы величина рН была р.авна 5,5. Сильное перемешивание продолжают еш,е в течение 2 час при температуре 5-10°С. Затем смесь фильтруют через кизельгур, фильтрат концентрируют до 25 мл. В осадок выпадает в виде белого твердого вешества 6-(-)-а-амино-а-(д-бензилоксикарбоНИлоксифенил) - ацетамидо - пеницилла«овая кислота (0,09 г).
Анализ по методу бумажной хроматографии показывает, что продукт содержит приблизительно 5% примеси 6-а.минопенициллановой кислоты. В системе бутанол-этанол - вода 6-(-)-а-а.мино-а-(/г - бензилоксикарбонилоксифенил)-ацетамидо - пенициллановая кислота Rf 0,47; 6-амииопенициллановая кислота Rf 0,13.
Продукт подавляет Е. Coli 2 при концентрации 5 мкг/мл и Staiph Oxford при концентрации 0,1 мкг1мл.
Гидролиз О-бензилоксикарбонильной группы.
Вышеупомянутый пенициллин растворяют в фосфатном буфере с рН 9 и выдерживают при таком рН. Отбирают порции и периодически анализируют методом бумажной хроматографии. По истечении трех дней п-ри комнатной температуре превращение в 6-(-)-а-аминоа-(п-оксифенил) - ацета1мидо - пен-ициллановую кислоту происходит практически полностью.
Пример 13. Получение 6- (-)-а-а.миноа-(п-оксифенил) - ацетамидо - пенициллановая кислота.
Через суспензию (-)-а-амн}10-а,-(п-оксифенил)-уксусной кислоты (4 г) в диоксане (150 мл) при температуре 50-60° С пропускают фосген до получения прозрачного раствора. Избыток фосгена вытесняют азотом и раствор фильтруют. Из фильтрата удаляют диоксан при температуре 50°С и при пониженном давлении; остается масло,
которое затвердевает при выдерживании в вакууме над фосфорным ангидридом. Твердое вещество растворяют в кипящем ацетатном эфире (50 мл); остается небольщое количество смолянистого продукта. Затем добавляют активированный уголь и смесь перемещивают до охлаждения до комнатной температуры. После фильтрования через кизельгур фильтрат медленно выливают в перемешиваемый при 40-60°С петролейный эфир
(400 мл) для высалсивания (-)-сс-карбокси(п.-оксифенил)-глицилового ангидрида в виде твердого белого кристаллического вещества (3,1 г), т. пл. 260°С (с разложением). Найдено, С 56,1; Н 3,7; N 7,1.
C9HrN04
Вычислено, %: С 56,0; Н 3,65; N 7,25.
Суспензию 6-аминопенициллановой кислоты (1,5 г) в воде (100 мл) доводят до рН 5,6 путем внесения раствора едкого натра. К перемешиваемой суспензии при 5°С добавляют (-)-а-карбокси-(п-оксифенил) - глициловый ангидрид (1,5 г) порциями через каждые
5 мин. Смесь перемешивают при температуре 5-10°С в течение 1 час и затем еще 1 час при комнатной температуре. При этом происходит сильное вспенивание, которое подавляют 1-2 каплями н-октилового спирта. Далее
смесь .фильтруют через кизельгур и доводят рН фильтрата до 5,0. При концентрации осадок не выпадает, поэтому раствор выпаривают досуха. Получают твердый продукт почти белого цвета (1,7 г). Анализ по методу бумажной хроматографии показывает, что продукт содержит 6-аминопенициллановую кислоту и требуемую 6-(-)-а-амино-а-(п-оксифенил) -ацетамидо -пецициллановую кислоту приблизительно в одинаковых количествах.
Пример 14. Реакция 6-аминопенициллановой кислоты с гидрохлоридом (-)-а-амино-а-(д-оксифенил)-хлорацетила. Готовят суспензию (-)-а-амино-(х-(г-оксифенил)-уксусной кислоты (1,67 г) в хлорацетиле (50 мл) и охлаждают до 0°С, добавляя при этом тонкоизмельченный порошок фосфорного ангидрида (4,16 г) при перемешивании. Затем приливают диметилформамид
