СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНСУЛИНА Советский патент 1972 года по МПК A61K38/28 

Изобретение относится к производству терапевтически активных препаратов.

Известны способы получения инсулина экстракцией поджелудочной железы подкисленным спиртом, осаждением балластных веществ и их отделением с последующим высаливанием и кристаллизацией конечного продукта.

Цель изобретения - повышение активности И увеличение выхода инсулина. Это достигается тем, что экстракт обрабатывают хлористым кальцием при рН 3,3-3,5, осаждают балластные вещества при рН 4,3-5,3 и далее процесс ведут известными приемами.

Пример . I кг измельченной поджелудочной железы заливают 3 л 82°-ного спирта, подкисленного 30 мл ортофосфорной кислоты (уд. вес 1,67) до рН 2,8-3,2, и экстрагируют при перемещивании и температуре 16°С Б течение 3 час. Экстракт отделяют центрифугированием, а остаток повторно экстрагируют 1,5 л 65°-ного спирта, подкисленного 3 мл ортофосфорной кислоты, в течение 2 час. К экстрактам добавляют 12,5%-ный аммиак до рН 3,5, а затем 20%-ный раствор хлористого кальция (по 15 мл на 1 л экстракта). Через 10- 15 мин раствор подвергают разделительной фильтрации. В фильтрате устанавливают значение рН 4,3-4,7 добавлением 12,5%-ного раствора аммиака или 5 н. раствора едкого натра, оставляют на 2 час, отделяют прозрачный раствор сифонироваиием и отфильтровывают осадок. В прозрачном растворе добавлением 30%-ной серной кислоты устанавливают значение рН 3,2-3,5 и .после отстаивания в течение 2-3 час упаривают в вакууме. Водный концентрат обезжиривают и высаливают инсулин-сырец, очистку которого осуществляют известными приемами. Выход 2556 ед/кг, активность 24,7 ед/мг.

Пример 2. Экстракцию и обработку экстрактов до установления рН 3,2-3,5 ведут,

как в примере 1. Полученный раствор со скоростью 150 мл/час/см фильтруют через колонку с катионитом СДВ-ЗТ в Н-форме (на 1 л экстракта 20 мл набухшей смолы). Катионит промывают 65°-ным спиртом и водой, уравновешивают аммонийацетатным буферным раствором при рН 6,5 и элюируют инсулин 0,25 н. раствором аммиака, содержащим ацетон. Элюат подкисляют до рН 2,6, добавляют ацетон до концентрации 33%, доводят рН до 4,5-4,8, 3 растворе. Выход 3100 ед1кг, активность 25,5 . гт fПредмет изобретения Способ получения инсулина экстракцией5 поджелудочной железы подкисленным спиртом, осаждением балластных веществ и их отделением с последующим высаливанием и кри4сталлизацией конечного продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения активности инсулина и увеличения его выхода, экстракт обрабатывают хлористым кальцием при рН 3,3-3,5, осаждают балластные вещества при рН 4,3-5,3 и далее процесс ведут известными приемами.